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文档简介

1、微生物细胞形态及菌落特征观察实验报告马子午生命科学学院食品科学与工程专业14101班02号1.引言1.1实验目的学习细菌的一般接种方法;了解放线菌、蓝细菌、酵母菌、霉菌的菌落特征;学习并掌握如何观察细菌的形态特征,掌握常用霉菌制片方法。实验原理放线菌的菌落会产生大量的基内菌丝和气生菌丝,并进一步分化产生孢子丝和孢子,表面呈粉状、颗粒状或絮状;部分蓝细菌可以形成孢子,由成串细胞连成丝状的蓝细菌,在细胞断裂时形成片段,这个片段由异形胞、营养细胞以及极节组成;酵母菌无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子,有性繁殖可以形成子囊和子囊孢子,当酵母菌繁殖旺盛时,母细胞出芽产生的子细胞没有脱离母细胞的时候,子细胞

2、又开始繁殖,这样许多细胞连在一起,形成藕节状的假菌丝;霉菌有青霉和曲霉,青霉的菌落形态特征呈扫帚状,曲霉的形态特征为菊花状的头和足细胞。霉菌的有些结构在制片过程中容易被破坏,影响观察,采用载玻片培养法。简单易行,并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。12.材料与方法材料与试剂曲霉(Aspergillusspp.),青霉(Penicilliumspp.),放线菌,蓝细菌,啤酒酵母菌(Sac.cerevisiae),复红染液,美蓝染液,棉蓝染液,酸性酒精。仪器与设备显微镜,酒精灯,盖玻片,载玻片,镊子,接种环。方法与步骤放线菌的形态观察(插片法)准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,

3、放于桌面。接种与观察:用镊子从含放线菌菌种的培养基中取一块盖玻片,再用镊子在盖玻片上取菌种置于载玻片中央位置,直接镜检。蓝细菌形态观察准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。接种:在载玻片中央滴一滴无菌水,取少量含有蓝细菌寄生的藻类于无菌水中,用镊子的头端慢慢敲碎至无菌水开始呈至绿色,盖上盖玻片。镜检:直接镜检。啤酒酵母子囊孢子形态观察准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。取菌涂片:在载玻片中央滴一滴无菌水,用接种环从含有啤酒酵母菌的试管中取菌种涂于无菌水中。干燥固定:将已接种的载玻片放于酒精灯上方用文火干燥,待干燥后将载玻片穿于火焰中间固定。染色:向载玻片滴加复红染液,与酒精灯上方

4、加热,5-10分钟即可。脱色:用酸性酒精脱色30-60S,水洗。再染色:用美蓝染色5-10s,水洗,干燥。镜检霉菌形态观察准备玻片:取两块干净的载玻片烘干,放于桌面,往两块载玻片中央分别滴加一滴无菌水和棉蓝染液。取菌涂片:在滴无菌水的载玻片上取曲霉菌涂于载玻片中央,在滴棉蓝染液的载玻片上取青霉菌涂于载玻片中央。镜检:分别盖上盖玻片,直接镜检。微生物菌落特征观察观察培养基中不同菌落的特征3结果与分析放线菌形态观察基内菌丝气生菌丝40X显微镜观察蓝细菌形态观察异形细胞营养细胞40X显微镜观察啤酒酵母形态观察40X显微镜观察霉菌形态观察40X显微镜观察曲霉40X显微镜观察青霉微生物菌落特征比较菌种观

5、察特征多数放线菌有基内菌丝和气生菌丝的分化,气生菌丝成熟时分化成抱子放线菌丝并产生成串的干粉状孢子,使菌落干燥,不透明、表面呈致密的绒丝状,正反面颜色不一致,并常有辐射状褶状等细菌多数细菌的菌落一般呈现湿润、光滑、透明、较粘稠、质地均匀及颜色较一致等酵母菌酵母菌的细胞形态一般呈乳白色或红色,表面湿润粘稠,出芽形成的子细胞尚未和母细胞分开,又长出新芽,形成成串的细胞,呈假丝状等菌落质地比较疏松,外观干燥,不透明,呈现或紧或松的蛛网状、绒毛霉菌状或棉絮状,与培养基的连接紧密,不易挑取,菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色不一致等4.讨论与结论注意事项实验过程中要严格控制无菌操作,取菌过程中试管塞不能放在实验台上,整个过程要在酒精灯的火焰旁完成,接种环取菌前后都应该在火焰上灼烧灭菌。复红加热染色的时候不要让染料蒸干,边加热边滴加染料,脱色的时候用的是酸性酒精,不是平常用的酒精。结论不同菌有不同的形态,比如

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