「动物保护法」中有关於实验动物之规范

1、動物保護法中有關於實驗動物之規範第三條本法用詞，定義如下 一、動物指犬、貓及其他人為飼養或管領之脊椎動物，包括經濟動物、實驗動物、寵物及其他動物。 二、經濟動物指為皮毛、肉用、乳用、役用或其他經濟目的而飼養或管領之動物。 三、實驗動物指為科學應用目的而飼養或管領之動物。 四、科學應用指為教學訓練、科學試驗、製造生物製劑、試驗商品、藥物、毒物及移植器官等目的所進行之應用行為。 第十二條對動物不得任意宰殺。但有下列情事之一者，不在此限：二、為科學應用目的。第十三條依前條第一項所定之事由宰殺動物時，應以使動物產生最少痛苦之人道方式為之，並遵行下列規定一、除主管機關公告之情況外，不得於公共場所或公眾得

2、出入之場所宰殺動物。中央主管機關得依實際需要，訂定以人道方式宰殺動物之準則。第三章動物之科學應用 第十五條使用動物進行科學應用，應儘量避免使用活體動物，有使用之必要時，應以最少數目為之，並以使動物產生最少痛苦及傷害之方式為之。 中央主管機關得依動物之種類，訂定實驗動物之來源、適用範圍及管理辦法。 第十六條進行動物科學應用之機構，應設置實驗動物照護及使用委員會或小組，以督導該機構進行實驗動物之科學應用。 實驗動物照護及使用委員會或小組之組成、任務及管理之辦法，由中央主管機關定之。 第十七條科學應用後，應立即檢視實驗動物之狀況，如其已失去部分肢體器官或仍持續承受痛苦，而足以影響其生存品質者，應立即

3、以產生最少痛苦之方式宰殺之。 實驗動物經科學應用後，除有科學應用上之需要，應待其完全恢復生理功能後，始得再進行科學應用。 第十八條高級中等以下學校不得進行主管教育行政機關所定課程綱要以外，足以使動物受傷害或死亡之教學訓練。 第五章行政監督 第二十三條直轄市、縣 (市) 主管機關應置專任動物保護檢查員，並得甄選義務動物保護員，協助動物保護檢查工作。 動物保護檢查員得出入動物比賽、宰殺、繁殖、買賣、寄養、展示及其他營業場所、訓練、動物科學應用等場所，稽查、取締違反本法規定之有關事項。 對於前項稽查、取締，不得規避、妨礙或拒絕。 第二十四條直轄市或縣 (市) 主管機關對於違反第十五條、第十六條第一項

4、、第十七條或第十八條規定之機構、學校，應先通知限期改善或為必要之處置。 第六章罰則 第二十九條有下列情事之一者，處新臺幣三萬元以上十五萬元以下罰鍰 一、違反第五條第三項規定，棄養動物，致有破壞生態之虞者。 二、違反第十五條第一項、第十七條或第十八條規定，未依第二十四條規定限期改善或為必要之處置。三、違反第十六條第一項規定，未成立實驗動物照護及使用委員會或小組。四、違反第二十條第二項規定，無成年人伴同或未採取適當防護措施，使具攻擊性寵物出入於公共場所或公眾得出入之場所。五、違反第二十三條第三項規定，規避、妨礙或拒絕動物保護檢查員依法執行職務。第三十條有下列情事之一者，處新臺幣一萬五千元以上七萬五

5、千元以下罰鍰 . . .第三十四條本法所定之罰鍰，由直轄市或縣 (市) 主管機關處罰之。 第三十五條依本法所處之罰鍰，經限期繳納，逾期仍不繳納者，移送法院強制執行。 以上簡要列出相關規定，詳細情形請參閱動物保護法。填寫動物實驗申請表注意事項：1. 申請表內容請以電腦打字，避免手寫。2. 第七項教育與訓練經歷：進行動物實驗之相關人員，請事先參加實驗動物管理與訓練相關課程。此欄填寫證照字號。3. 請寫出動物飼養場所（動物房舍）及實驗地點。4. 第十一項 使用動物需求數量之必要性：為何需要用到第八項所填寫的數量，例如 實驗组、對照组等。5. 實驗過程中及術後之動物疼痛評估：請參閱生科中心網站實驗動物

6、疼痛程度之評 估方法。 降低苦痛方式：方式選定可透過 (1)文獻資料閱讀或請參閱生科中心網站之 (2)實驗動物管理與使用指南第七章 麻醉、止痛、外科手術及安樂死內容等。 其他注意事將陸續整理。核准編號：IACUC 97-國立中興大學動物實驗申請表本表請留存於貴機構動物實驗管理小組備查，不需報送本會；惟如使用猿猴、犬、貓進行科學應用時，應提供審核通過之影本列為年度監督報告之附件。一、申請人及職稱（中、英文）： 副教授 (英文- , Associate Professor) 聯絡電話： ext. 二、單位名稱（中、英文）： (英文) 實驗地點： 三、計畫/課程/試驗名稱（中、英文）：（中文）（英文

7、）類別： （請就以下項目填寫：醫學研究類MED、藥物及疫苗類PHA、健康食品類HF、農業研究類AGR、教學訓練類TEA、其他類別OTH ）四、計畫主持人： 五、經費來源： （國科會、自費）六、執行期限： 年月日 至 年月日 (請填寫起訖年、月、日)七、負責進行動物實驗之相關人員資料： 姓名職稱参與實驗期限参與動物實驗之教育與訓練經歷(證照字號)（一）副教授3年獸醫師及89年實驗動物管理訓練合格(實動訓字：(89)00001號)（二）碩士班3年 實動訓字：(94)0009號八、實驗所需之動物：動物別/品系使用數量動物來源b動物飼養場所（一）Rats (SD strain) male rats 大

8、鼠40隻國家實驗動物中心系所實驗動物舍（二）Mice (ICR strain) male小鼠20隻樂斯科系所實驗動物舍註a：保育類野生動物請加註，並另依野生動物保育法相關規定辦理。註b：自野外捕捉之動物請加註，並另說明來源地區、隔離檢疫方式及隔離期間；取自民間市場者，必要時須比照辦理。飼養場所負責人： 及動物房舍之坪數 坪動物房舍地址：_ 系所 樓 室 型式：þ陸棲封閉型 陸棲開放型 水棲類 其他 九、如飼養場所不是動物中心時， 請說明飼養場所之設備與飼養管理措施。若是託養於所屬機構之外的場所，原則上須提供該場所經核准營業之證明文件。 本飼養場所具有冷氣空調及換氣之設備與日常飼養與清

9、潔管理。十、動物飼養： 由動物中心專人負責 þ 由實驗室人員負責 由託養場所負責如由實驗室人員負責， 請說明其對動物飼養之背景與訓練。實驗室人員為獸醫師且曾受過實驗動物疾病診斷技術訓練課程合格，並具相關飼養管理經驗，熟悉實驗動物之飼養管理、清潔消毒程序及相關之毒性試驗操作程序。十一、請簡述本研究之目的與本實驗使用之動物其需求數量之必要性。（一）研究之目的： 探討xxx萃取物抑制肝癌及基因毒理與動物毒理安全性評估。（二）使用動物需求數量之必要性：1. 誘發肝腫瘤動物模式之建立1.1. 依據衛生署提供之健康食品之低癌症發生功能評估方法草案之動物誘發性腫瘤試驗規範(2005)，化學物致腫瘤

10、過程之誘發期(initiation)、促發期(promotion)及腫瘤形成(progression)之階段性理論。本實驗另加上經由部分肝切除手術，投與致變異物後可增加正常細胞之致變異性(Bishayee and Chatterjee. 1995. Anticancer Res. 15:455- 461)。評估肝腫瘤大小、重量、肝細胞酵素、病理變化等指標。1.2. 依據Solt and Farber方法(New principle for the analysis of chemical carcinogenesis. Nature, 263: 701-703, 1976.)，以大鼠作為試驗動

11、物，腹腔注射2-diethylnitrosamine (DEN)誘發物(initiator)，添加促發物(promoter) 2-acetylaminofluorene (2-AAF)，同時經口投予xxx發酵萃取物餵飼大鼠連續8週，評估萃取物之降低大鼠肝腫瘤發生率。1.3. xxx萃取物供試樣品1種(低、中、高3種劑量組)、切肝對照組及陽性對照組，每組10隻SD male rats，5 groups (3 doses + 1 control + 1 positive control) x 10 rats/group = 50隻。2.毒理試驗係依據衛生署公告之健康食品及臨床前毒理安全性試驗，並符

12、合美國環境保護署(EPA)及OECD之毒理試驗規範進行評估。2.1. 動物活體微核測試方法，因1種供試樣品所提供時間不同，擬分三批不同時間進行對動物活體微核測試，分為低、中、高3種劑量組及對照組，每組6隻小鼠(ICR, male)，1 samples x 4 groups (3 doses + 1 control) x 6 male/group = 24隻。2.2. 口服急毒性：以胃管經口餵食xxx萃取物，觀察其大量食用之急性安全性。口服急毒性試驗分為對照組及xxx發酵萃取物共1個樣品組高劑量組(5 g/kg)，每組各20隻大鼠(雌雄各半)，1 samples x 2 groups ( 1 h

13、igh doses + 1 control) x 20 rats /group = 40隻。2.3. 28天餵食毒性試驗：以胃管經口餵食xxx萃取物共1個樣品，觀察其安全性。28天餵食試驗分為對照組、xxx發酵萃取物(低、中、高3種劑量組)，每組各20隻大鼠(雌雄各半)，4 groups (3 doses + 1 control) x 20 rats/group = 80隻。（三）已考量動物減量：þ是 否十二、請說明實驗中所進行之動物實驗內容、方法、劑量與步驟 (含動物保定、投藥、注射、麻醉、手術及術後照顧等)，並簡述使動物痛苦降至最低的方法。（一）若動物需長時間保定（超過四小時），

14、請說明所用之器械與方法：（二）若對動物投予試驗藥物，請簡述藥物名稱、投予路徑、劑量與頻率：1. 體微核測試法：配製xxx萃取物並依體重以胃管強迫餵飼小鼠，每隻單次經口餵食體積量為10 ml/kg，劑量最高為5 g/kg bw。觀察48或72小時，以2% isoflurane氣體麻醉，取週邊血液細胞，以acridine orange染色方法進行抹片製作樣本，觀察reticulocytes微核。2. 口服急毒性、28天餵食毒性試驗：取xxx萃取物經口餵食體積量為10 ml/kg，另以鼠粉狀飼料(LabDiet® 5001 Rodent diet, Purina Mills LLC, St

15、. Louis, Missouri, USA)為正常對照飼料。3. 試驗結束後以2% Isoflurane氣體麻醉後，小鼠自眼窩竇採血，大鼠則由腹部動脈採血，檢查血液學及血清生化、臟器重量及病理評估，並以CO2進行安樂死。（三）若實驗含外科程序，請簡述麻醉方法、劑量、投藥方式與手術後的照顧：1. 麻醉前處理：þ 動物禁食 動物不禁食 其他 2. 麻醉前給藥： 需 þ 不需 其他 3. 麻醉藥物商品名(學名)及劑量：2% isoflurane投藥方式：實驗動物用麻醉機器(型號: MSS 003, Benchtop Small Animal Anesthesia Unit, M

16、ade in England)4. 動物麻醉時間約 15 分鐘。實驗期間動物重複麻醉 次，間隔 日，動物需重複麻醉的原因 5. 麻醉中(麻醉後)給予 輸液支持þ 保溫 þ 氧氣 其他 6. 其他手術或實驗內容：切除大鼠肝臟右葉。7. 手術後的照顧：保溫，傷口若有污染，視情況施以優點軟膏治療。（四）簡述如何使動物之苦痛降至最低（例如：使用鎮靜或止痛等藥物）：1.說明如何進行實驗過程中及術後之動物疼痛評估： 1. 大鼠以2% Isofluance氣體麻醉後，進行部分肝切除手術，可減輕傷口疼痛。以0號不可吸收線縫合傷口，於術後以碘酒消毒，並觀察及記錄創口癒合情形。2. 記錄大鼠體

17、重與飲食消耗量的增減，觀察毛髮清潔度和臨床呼吸、流涎及行為的正常與否。若因毒性作用，體重減少原體重的25%以上，7天內攝食低於正常量的40%，或食慾不振超過72小時，達到嚴重疼痛指標，以CO2安樂死，減輕痛苦。 評估方法請參閱網站：生科中心/動物實驗安全/實驗動物疼痛程度之評估方法 .tw/%7ENCHU-C/animal.htm ）2.降低苦痛方式：（1）止痛劑：不使用þ 使用，商品名(學名)： carprofen 2.2 mg/kg ，投藥方式：S.C.（2）抗生素：þ不使用使用，商品名(學名)： ，投藥方式： （3） 其他處理： 十

18、三、請說明實驗結束後動物之處置方式（含復原處置、安樂死及屍體處理方法）。（一）實驗結束後： 動物未存活（請說明原因）： þ 予以安樂死，安樂死方法： CO2 動物仍存活可繼續飼養之狀況，後續處理方式（適用於非傳染性疾病，或未 影響動物生活品質之實驗）： （二）屍體處理方法：þ 委託本校獸醫教學醫院焚化， 其他 十四、有無進行危險性實驗，如生物危險實驗（含感染性物質、致癌藥物）、放射線實驗及化學危險（含毒物）實驗？ þ 無 有 ，如有（一）實驗之危險性屬於 生物危險 放射線 毒性化學危險（二）如屬生物危險實驗，請陳述是否經本校生物安全委員會認可尚未申請。 已申請，審

19、核中。 通過認可，案號： 1、進行危險物品實驗施用之方法、途徑及場所。2、針對實驗人員、實驗動物以及周邊人畜環境所採行之保護措施。3、實驗廢棄物與屍體之處理方式。 （三）如屬放射性實驗，請說明放射性物質實驗是否經本校輻射防護委員會或行政院原子能委員會認可 尚未申請 已申請，審核中 通過認可放射性物質執照證號 ；操作人員操作證號 放射性物質核種名稱： 1、進行危險物品實驗施用之方法、途徑及場所。2、針對實驗人員、實驗動物以及周邊人畜環境所採行之保護措施。3、實驗廢棄物與屍體之處理方式。4、實驗結束後實驗場所之清理。（四）如屬化學危險（含毒物）實驗，請說明毒性化學物質是否經行政院環境保護署認可使用危險物質之認可證件名稱與證號 使用危險物質人員之認可證件名稱與證號 2-acetylaminofluorene (2-AAF, CASRN: 53-96-3)及2-diethylnitrosamine (DEN