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文档简介

1、植物组织培育Plant tissue culture是指在无菌条件下,体的植物器官根、茎、叶、花等、组织如构成层、花药组织、胚乳、皮层等、细胞体细胞和生殖细胞,以及原生质体,培育在人工配制的培育基上,给予适当的培育条件,使其长成完好的植株,统称为植物组织培育。 组织培育育苗组织培育育苗获取获取外植体外植体无菌接种无菌接种诱导愈伤组织诱导愈伤组织的构成的构成试管苗的构成试管苗的构成扩展培育扩展培育移栽移栽脱分化脱分化再分化再分化培育基培育基配制配制组织培育步骤组织培育步骤 脱毒脱毒 植物组织培育的过程可概括为: 脱分化 茎尖、茎段、胚及子房等器官做外植体可不经脱分化直接构成试管苗。 细胞全能性:

2、原理指细胞经分裂和分化后仍具有构成完好有机体的潜能或特性。 脱分化:由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进展培育,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫再分化。根、茎、叶 或 胚状体再分化外植体愈伤组织完好植物1先在烧杯中放入一些蒸馏水。2分别取母液10ml倒入。3普通称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。4加蒸馏水用量筒定溶至1L。5用微量可调移液器汲取各种激素,减少误差。6用精细试纸或酸度计调整PH至5.75.8。7称取5g左右琼脂粉,倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化。8略微冷却后,分装入培育容器中。无盖的培育容器要用封口膜或

3、牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧。9放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右。10灭菌后从灭菌锅中取出培育基,平放在超净任务台上令其冷却凝固。培育基的配置微量可调移液器 灭菌是组织培育重要的任务之一。 培育基用湿热灭菌 高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之添加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。灭菌 高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器7接种1将初步洗涤及切割的资料放入烧杯,用消毒剂灭菌,再用无菌水冲洗,最后沥去水分,取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。2资料吸干后,一手拿镊子

4、、一手拿剪刀或解剖刀,对资料进展适当的切割。在接种过程中要经常灼烧接种器械,防止交叉污染。3用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培育基上。无菌操作室无菌操作室培育1固体培育法 用琼脂固化培育基来培育植物资料的方法。是如今最常用的方法。虽然该方法设备简单,易行,但营养分布不均,生长速度不平衡,并常有褐化中毒景象发生。 2液体培育法 用不加固化剂的液体培育基培育植物资料的方法。由于液体中氧气含量较少,通常需求经过搅动或振动培育液的方法以确保氧气的供应。这种定期浸没的方法,既能使培育基均一,又能保证氧气的供应。需求一定的营养物质、植物生长调理剂、光照等条件营养物质:水、糖类、维生素类、氨基

5、酸类、大量元素化合物、微量元素化合物移栽和幼苗的管理试管苗移栽是组织培育过程的重要环节 通常采取的措施有:对外界要添加湿度、减弱光照;对试管内要通透气体、增施二氧化碳肥料、逐渐降低空气湿度等。移植 从试管中取出发根的小苗,用自来水洗掉根部粘着的培育基。移植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔,然后将小苗插入,栽后把苗周围基质压实。栽前基质要浇透水。栽后轻浇薄水。管理1坚持小苗的水分供需平衡。2防止菌类繁殖。由于试管苗原来的环境是无菌的,移出来以后难以坚持完全无菌,因此对基质进展高压灭菌。3一定的温、光条件。试管苗移栽以后要坚持一定的温光条件,适宜的生根温度是18204坚持基质适当的通气性。要选择适当的颗粒状基质,保证良好的通气作用。组织培育幼苗的优缺陷1、在不受植物体其它部分干扰下研讨被培育部分的生长和分化的规律2、利用各种培育条件影响它们的生长和分化,以处理实际上和消费上的问题3、有力地推进了生物科学中各学科的开展和相互浸透4、促进了营养生理、细胞生理和代谢、生物合成、基因转移、基因重组的研讨。优点缺陷1、消费本钱高2、组培苗炼苗难,移栽成活率低组织培育的运用(一)无性系的快速繁衍:兰花、甘蔗和名贵种类的无性繁衍;(二)培育无病毒种苗:马铃薯、香蕉、苹果、甘蔗、葡萄、桉树、毛白杨、草莓、甜瓜、

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