RubellaIgM作业指导书

1、文件编号:LAB OP MY020第6页.共5页版木：A/0生效日期：2008-02-01XXXXXX医院检验科免疫室分析项目作业指导书E 170/e 601/e 411风疹IgM (Rubella IgM)L 分析原理采用U捕获法.整个过程1S分钟完成。1）第1步：10 UL标本自动用通用稀释液1： 20生物素标记抗人I説 抗体.钉（Ru）标记的重组风疹抗原形成夹心复合物，2）第2步：加入链穿亲和素包被的微純让上述形成的复介物通过生物素与链瑋亲和素间的反应结合到微粒上=3）第3步：反应泯和液吸到测址池中.微粒通过磁铁吸附到电极上未结合的物质被淸洗液洗去电极加电圧 后产生化学发光.通过光电侪增

2、管进行测定.仪器通过2点定标曲线以及试剂条码提供的母定标曲线计算出 结果.2. 标本要求血淸：按标准常规方法采集。血浆：肝素（锂、纳人EDTA-K：.枸椽酸钠抗凝均可。如用枸椽酸钠抗凝.结果应+10札标本在IS C -23 C可稳定1删在2 C -8C可稳定8周.20C可稳定6个月。只能冻融5次。含沉淀的标本使 用前需离心。不耍加热灭活标本。标本和质控液禁用烝氮钠防爛。标本.定标液和质控品在测定前的温度应与室 隘平衡：放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的彫响。3. 试剂.校准品.质控品和其他所需材料釆用罗氏原装配套试剂：试剂：M：链標亲和素包被的微粒（透明瓶盖1M. 6.5。粒子浓度0. 7

3、2Og/ml.生物素结合能力:470ng生物素 /呷粒子。含防腐剂。R：生物素标记抗人IgM抗体，RLP （灰盖.1瓶,9bK浓度大于0. 4mg/l磷酸缓冲液0. lmmol/1. pH7. 0 含防腐剂。R：钉（Ru）标记的莹组风疹抗原（黑盖人1瓶.9ml.浓度大于0. lmg/1.磷酸缓冲液0. Tl/1. pH7,0. 倉防腐剂。校准品：（试剂盒附帯）E 170/e 601/e 411风疹IgM (Rubella IgM)Cal 1阴性定标液(白盖) 2瓶,1. Oml/),人血清基质Cal 2阳性定标液(黑盖).2瓶.1. Oml/ffi,人血清歴质质控品:Elecsys Preci

4、Control Rubella IgM 货号 04618840190其他所需材料：常规实脸设备Elecsys E 170/E 411Elecsys 系统清洗液(SysClean)，货-)11930316122Elecsys E 170分析仪所需材料：Elecsys 系统缓冲液(ProCell M),货号01880310190Elecsys 检测池洗液(CleanCell M)，货 1880293190Elecsys 样品稀释液(Univecal Diluent).货11732277122Elecsys PC/CC杯,货 03023141001Elecsys 清洗液(Probe不ash M) 货

5、-J03005712190Elecsys 反应杯/加针头/废物袋(CUP/TIP) 货 12102137001Elecsys 系统淸洗适配器(SysClean Adapter M).货 *)03027651001Elecsys E 411 分析需材料：Elecsys 系统缓冲液(ProCell)货 11662988122Elecsys 测虽池淸洗液(CleanCell) 货 1662970122Elecsys 样品稀释液(Univecal. Diluent).货 11732277122Elecsys 系统清洗液(Sys初sh) 货-J11930316122Elecsys 适配器 (Adapte

6、r for SysClean).货 11933159001Elecsys 反賊杯(CUP) 货号 11706S02001Elecsys 加样头(TIP).货 117067990014. 仪器和校准使用仪器:罗氏公司生产Elecsys 2010 E 170 e601 e 111全自动电化学发光免疫自动分析仪E 170/e 601/e 411风疹IgM (Rubella IgM)仪器校准：每批试剂必效用新鲜试剂和枝准一次，另外.以下情况需要再次定标：枝准过期:批枝准稳定28天.盒校准7天。根据耍求进行标定：如质控结果超出范用时：更换某些试剂时根据规定进行多次标定。5. 操作步骤参见仪器标准操作规程

7、。6. 质莹控制用质控品1和质控品2.至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用丁各实验室的具体耍求。检测 值应落在确定的范用内.如出现质控值落在范用以外.应采取校正措施。7. 计算方法仪器会自动根据Cal 1和Cal 2的测定值计篦Cut-off值。每一个标本的结果以有反賊性或无反应性以及Cutoff 指数形式（标本信号/ Cutoff）报育8. 结果解释阴性0.8 C0I灰区0.8 COI- 1.0 COI阳性2 1.0 C0I9. 分析性能检测范围:0.17-500 IU/mL楮密度：以下列出J此试剂盒在Elecsys仪器上的表现。每个实验室结果会不同。垂复性测定采用的是美国

8、临床化学实验室 标准委员会修订S5EP5-A标准方法进行评估使用fElecsys试剂及人血淸池.质控进行测定：连续测定10天每 灭测定6次n=60次：E170的批内垂復性共测定了21次。结果如下：E 170/e 601/e 411风疹IgM (Rubella IgM)SampleMean COISD COICV%Mean COISD COICV%HSC nogativo0.1980.0052.40.200.0063.0HS. weakly positive1.290016121310.0241.9HS, positive3.570.0371.06.690.2714.1PCd Rubella I

9、gM 101750 003180 200.00841PC Rubella IgM 21.980.0361.81.950.0804.1Elecsys 2010 and cobas e 411 analyzersRepeatability。 Intermediate precisionMODULAR ANALYTICS E*I7O, cobas e 601 and cobas e 602 analyzersRep eatabilityIntermediate precisionSampleMeanCOISDCOICV %MeanCOISDCOICVHS. negative0.1840.0041.9

10、0.1830.0179.5HS weakly positive1.060.0111.01000.0272.7HS. positive4120 049123.960.1082.7PC Rubella IgM 10.2110.0031.60.1800.02010.9PC Rubella IgM 21.520.033221.590.0533.410. 干扰因素该方法不受黄追（胆红25mg/dl） X溶血（血红蛋白24g/dl）、fulfil （脂1500mg/dl）生物50ng/al 零干扰.接受高剂址生物素5mg/天治疗的病人.至少翌等最后一次摄入生物索8小时后才能采血。不受类风 湿因子（lSOO

11、Bml）和透析的干扰。杲常病人应结合病史.临床其他检査结果综合起来进行诊断。11. 临床意义风疹病毒定徳国麻疹的病原体.徳国麻疹是一种通常发生在儿童时期的普通轻微皮疹。但是.孕妇特别是妊 娠早期的鼓初三个月的感染风疹则绘一种严垂疾病.风疹病毒可以通过胎盘.导致胎儿死亡或严垂残障.通常称 Z为先天性风疹综合征（CRS）.可引起失明.耳遵.先天性心脏精和智力发育迟缓：风疹特异性抗体检测可判定 个体免疫状态.有助于诊断急性风疹感染。12够考文献1）Pustowoil B. Liebert UG. Predictive Value of Serological Tests in Rubella Vir

12、us Infection during Pregnancy. Intervirology 1998:41:170-177.2）Cooper LZ. Alford CA. Rubella, in Infectious Diseases of the Fetus & Newborn Infant.: 5th Ed 2001, pp 3478& ed Remington JS & Klein JO. Philadelphia: W.B. Saunders.3）Baiiatvala JE. Brown DWG. Rubella. Lancet 2004:363:1127-1137.4）Best JM.

13、 Banatvala JE. Rubella Principles and Practice of Clinical Virology. 4th edition, ed byZuckerman AJ. Banatvala JE and Pattison JR 2000:387-418, John Wiley & Sons. Ltd.E 170/e 601/e 411风疹IgM (Rubella IgM)5) Pustowoit B. Grangeot-Keros L. Hobman TC. Hofmann J. Evaluation of recombinant rubella-like pa

14、rticles in a commercial immunoassay for the detection of anti-rubella IgM. Clin Diagn Virol 1996:5:13-20.6) Enders G. Knotek F, Pacher U Comparison of vaiious serological methods and diagnostic kits for the detection of acute recent and previous Rubella infection, vaccination and congenital iniections J Med Virol 1985:16:219-232.7) Detection and Quantification of Rubella IgG Antibody: Evaluation and Pertormance Criteria for Multiple Component Test Products. Specimen Handling. and Use of Test Products in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. NCCLS Publication: 1997;Vol