微生物标本正确采集及运送ppt课件

1、1,微生物标本正确采集及运送,2,标本采集的意义,明确诊断真正致病菌 病情追踪 指导制定治疗措施 抗生素选择 抗生素更换 预后推测 减少细菌耐药性,3,结果无意义,规范化采集,不符合要求,提供重要临床感染信息,处理失当造成 污染,误导临床,标本,4,检验前误差,检验前误差： 病人准备、标本采集、标本储存及运送不规范,Clin Chem. 2007 Jul;53(7):1338-42. Epub 2007 May 24 Clin Chem Lab Med. 2006;44(6):750-9,检验前误差是导致检验结果失真的最主要原因之一,5,细菌诊断标本采集原则,用抗菌素前采集，不同时期、不同标本

2、 采样时严格执行无菌操作，避免污染 采集真正病灶处且足量标本避免假阴性 标本需新鲜，不可添加防腐剂 立即送检愈新鲜标本愈容易分离病原菌,6,痰液标本采集,采集时间：晨痰，因晨痰量多，且含菌量也多 先以冷开水漱口刷牙，有假牙者应取下假牙 做深呼吸数次后收腹用力深咳 将痰吐到宽口无菌加盖容器 2小时内送达检验室（未能及时送检于4保存）（苛养菌如肺炎链球菌减少，正常菌过度生长） 年老体弱、无力咳痰、下呼吸道分泌物不多时,怎办？,7,痰标本采集,耐心宣讲，取得患者合作 翻身叩背，附着痰液松动易于排出 雾化吸入生理盐水或高渗盐水，使痰液稀薄，痰液增多，而易于排出,8,标本质量,带血痰,唾液,脓痰,白色粘

3、液痰,黄色粘液样痰,唾液痰,9,10,粘液丝,11,卫生部医政司全国临床检验操作规程,鳞状上皮细胞SBC25 白细胞WBC25 /每低倍视野为合格痰 =接受培养,12,卫生部医政司全国临床检验操作规程,鳞状上皮细胞SBC25 白细胞WBC25 /每低倍视野 鳞状上皮细胞SBC10-25 白细胞WBC25 /每低倍视野,13,卫生部医政司全国临床检验操作规程,白细胞吞噬革兰阴性杆菌 / 革兰阳性球菌 未见白细胞吞噬,14,15,血液标本采集,采集时机 消毒规范 双侧双瓶,16,最佳采血时机-1,研究指出： 在使用抗生素前采血，阳性率是用药后采血的2.2倍！,17,最佳采血时机-2,18,病人准备

4、：正确消毒方式,培养瓶消毒：以75%酒精消毒瓶口 皮肤消毒： 采血点由内往外，以75%酒精用力涂抹皮肤 内往外划圈用力涂抹皮肤，待干燥以达杀菌效果 （等待时间：碘伏约1-3分钟，碘酊约30秒） 75%酒精由内往外去除碘液，避免污染,19,血培养采集,绿色盖子：含活性炭需氧 橘色盖子：含活性炭厌氧 紫色盖子：普通厌氧 蓝色盖子：普通需氧 黄色盖子：普通小儿瓶,20,血培养采集,双侧双瓶,为何？,提高阳性率,判断污染与否,21,影响血培养阳性率因素,22,血培养的组合与检出率,J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548,23,致病菌和污染菌的鉴别,真正菌血症： 分离有

5、毒力的菌株 肺炎链球菌 克雷伯菌属 假单胞菌属 金黄色葡萄球菌 肠杆菌科 念珠菌属 存在危险因素 免疫抑制 假体手术 留置导管 多部位分离相同菌株,污染菌 培养时间长 后续培养没有可重复性 分离多种微生物 临床情况不提示存在感染 分离皮肤定植菌 凝固酶阴性葡萄球菌： 类白喉杆菌 杆菌属,24,3天阴性的血培养-需重送检,有临床意义的分离菌： 在2天内被检出占94%，在3天内被检出占97%,J Clin Microbiol. 2005; 43:2506-2509,97,25,做厌氧血培养的价值？,只做需氧瓶不做厌氧瓶培养 19%-29%的菌株不能发现 5%的血培养延迟1天报告阳性结果 采集厌氧瓶

6、同时增加采血量 每增加1 ml血液阳性率增加3% Clin Infect Dis, 1999,29:1309-1311 中华检验医学杂志，2000，23：285 Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217-219,26,采集方式 严格无菌皮肤消毒 穿刺针穿刺抽取 无菌试管或针筒直接送检(亦可直接打入血瓶内送检-同时具增菌功能，缩短TAT) 即时送检、不能冷藏 做厌氧培养输送过程严禁接触环境氧,无菌体液采集,27,脑脊液采集,采集方式： 碘酒、酒精消毒皮肤L3，L4间穿刺入蜘蛛膜 穿刺后分装3-5 ml至无菌试管 检测细菌、病毒 1 ml 检测真菌

7、、抗酸菌 2 ml 注意事项： 迅速送至实验室 细菌培养保存于35温箱或室温，因嗜血杆菌及奈瑟氏菌对温度敏感 检测病毒、真菌、分支杆菌4保存,L3 L4 L5,28,尿液,清洁中段尿（自然排尿） 直接导尿可能下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染 常规法消毒尿道外围 以无菌方式将导管插入膀胱 耻骨上膀胱穿刺法 (厌氧检查适用) 导管消毒后以空针抽取5-10ml尿液 有尿路感染症状但中段尿培养菌数很少 小儿收集包 留置尿导管收集法 O 穿刺导尿管吸取尿液 X 尿液收集袋中采集,29,女性 肥皂清洗尿道外围 以无菌纱布擦拭 用手分开大阴唇 先排出前段尿液，再以无菌宽口容器收集中段尿液,男性 肥皂清洗尿道

8、外围 以无菌纱布擦拭 扶起茎阴翻上包皮 先排出前段尿液，再以无 宽口容器收集中段尿液,最好留取早晨清洁中段尿标本,自然排尿-中段尿,30,尿标本采集注意事项,留取尿培养标本时需以无菌操作 注明是否使用抗生素 女患者月经期不宜留取尿标本 会阴部分泌物过多，应先清洁冲洗再收集 4-8保存不可超过24小时 标本如不能立即送检，应存放于冰箱,31,生殖泌尿道标本,依不同感染种类和病变特征采集不同标本 尿道标本，用生理盐水局部清洗，无菌棉拭子插入尿道口1-2 cm停留十余秒，轻轻旋转拭子 外阴部糜烂、溃疡，生理盐水清洗后取病灶边缘分泌物 阴道和宫颈口分泌物须在窥阴器下用长拭子采集 子宫内分泌物用无菌导管

9、外套一层保护膜，插入子宫后再刺穿该膜予负压吸引，可减少阴道菌群污染 女性盆腔脓肿，应局部消毒阴道由子宫陷凹处进针抽取,32,生殖泌尿道标本,2支无菌棉花拭子分2次收集，其中一支直接涂片 发育期或成年妇女抹片：尿道口、子宫颈或直肠 年幼女童：外阴部位取标本 男性：前列腺液需进行前列腺按摩获取 怀疑急性淋病：尿道分泌物 怀疑慢性淋病：前列腺或精囊 注意事项： 淋菌等病原菌检测需避免正常菌污染，取时尽量小心 淋菌低温会死亡，采取后请勿延误，速送细菌室培养,33,伤口、脓疡、脓,以70% 酒精消毒采检表面 开放式伤口：以棉棒采取深部标本 封闭式伤口：以空针抽取（约1ml） 如需厌氧培养，避免接触空气并

10、及时送检，最好床边接种，可直接打入厌氧血瓶（增菌效果佳）,34,粪便,自然排便 挑取带脓或血部分（ 2g） 液状粪便取絮状物（ 2ml） 置于无菌容器或置于保存液或增菌液送检 直肠拭子 肥皂、水和70%的酒精清洁肛门周围 棉棒插入括约肌约 4-5cm（幼儿约2-3cm） 轻轻的旋转数圈后送检,35,注意事项,注意事项： 调取粪便的粘液、组织、脓或血液部分 送检前与微生物科联络，注明培养项目。沙门和志贺菌、致病性大肠杆菌、弧菌、念珠菌、菌群失调（难辨梭菌） 怀疑沙门菌感染应在发病2周后采集标本,36,标本运送、储存温度,37,标本送检时间限制,15 分钟,导管 CSF 眼结膜/角结膜检体 体液 胃液 羊水 鼻咽 组织,38,标本送检时间限制,2小时