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文档简介

微生物SOP培训,庞聿婷 2014.3.10,一、血培养,最有价值的标本,菌血症/血流感染和脓毒血症的出现说明微生物在随血液散播全身。是感染的最严重表现之一。用于菌血症、感染性心内膜炎、化脓性血栓性静脉炎以及不明原因发热的诊断和鉴别诊断。一般来说,血中出现微生物是致病的。但个别情况例外:拔牙、其他牙科、外科涉及到含粘膜的操作、支气管镜检查、导尿术等操作,可引起一过性菌血症。,一、血培养,采血指征 1.发热(38)或低温(36) 6.皮肤、黏膜出血 2.寒战 7.昏迷 3.白细胞增多 8.多器官衰竭 4.粒细胞减少 9.血压降低 5.血小板减少 10.呼吸加快 另有书籍:T38,一、血培养,标本要求血液、脑脊髓液、关节液、胸腹腔积液等无菌部位的标本均可以注入血培养瓶进行培养。标本采集部位及消毒方法:a.成人可从肘静脉采血,新生儿可采脐带血或静脉血。b.注意严格消毒,75%的酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上,碘伏从穿刺点由内向外画圈进行消毒,晾干1-2min,75%酒精脱碘,采血前不要再触摸该点。 用75%的酒精消毒培养瓶口,晾干1min,进行采血。,一、血培养,一般情况下应在病人发热初期或发热高峰时采集,最好在抗菌药物应用之前,对已用药而因病情不允许停药的患者也应下次用药前采集,并以在发冷或发热前半小时为宜。 成人采集量为8 ml左右,儿童为5ml左右,如患者接受抗菌药物治疗达10-15天以上者,采血量则要10ml,一、血培养,尽量不要和其他检查同时抽血如果同时有其他检查,将血液最先注入血培养瓶以免污染床边接种,立即送检或室温(18-22)/37 存放,不可冷藏,24小时内送检。采集完成后应在血培养瓶上正确填写患者信息,一、血培养,在24 h 内采集2 3次。 采集1 次,检出率约80%; 采集2 次,检出率约90%; 采集3 次,则检出率达99% 故推荐在2 4 h 内抽3 次血培养。仅抽1 次血培养,除了检出率低(因菌血症常会暂时消失) 外,还会使检验人员很难评估被视为污染菌者是否与感染有关。如果抽血培养2 次或3 次,则能够得到肯定。,一、血培养,血培养的接收检查瓶子上的标签,与申请单上的标签及患者信息是否一致血培养瓶内的血液量必须足够,也不能超量。不合格血培养标本处理如培养瓶上标签与申请单上标签及患者信息不一致,立即与临床相关人员联系,报告拒收理由。如采血量不足,立即与临床人员联系,报告标本不合格理由,建议重新采血。,一、血培养,注意: 很多患者标本由于采集血量不足,采集血培 养套数不够,采集时间不合适,特别是24小 时内只采集一瓶血进行血培养,采血前或采 血时正用抗生素治疗,可能降低血培养的阳 性率,不符合采血的基本规程。,二、脑脊液,送检指征:成人:发热、头痛、恶心呕吐、颈强直 和反射增强等症状,怀疑为脑膜炎患者。儿童:儿童和新生儿的临床表现不明显,因此对于婴儿不明原因发热,应怀疑为脑膜炎患者,采集脑脊液送检。,二、脑脊液,采集时间:当怀疑患者脑膜炎时应立即采集脑脊液,并且尽量在应用抗生素之前采集。对已用抗微生物药物而不能终止的患者,应在血药浓度最低时或下次用药前采集。,二、脑脊液,采集方法及采集量:脑脊液通常是经腰椎穿刺采集(注意严格的无菌操作)标本量最好2ml,不得少于1ml。标本的运送:CSF采集后,置于无菌小瓶中,在室温下15分钟内送到实验室,绝不可冷藏,二、脑脊液,标本的验收:检查盛装脑脊液的容器标签与申请单是否相符,容器是否有渗漏、破裂或者明显的污染检查标本的量是否适量(不得少于1ml)标本的不合格处理:由于脑脊液的采集为侵入性操作获得的标本,不易重复取材送检,应及时与医师协商,标本可按常规处理,但报告单上须注明标本不合格,培养结果可能受影响。,二、脑脊液,CSF革兰氏染色可为细菌性脑膜炎做出快速诊断,但敏感性仅为4060%。CSF培养是确诊细菌性脑膜炎的“金标准”,但敏感性并不高,而在先期接受抗生素治疗者中敏感性更是低于50%,故培养阴性者不能排除诊断。CSF中长出任何菌都是致病菌。做脑脊液培养时,建议同时做血培养。,三、穿刺液,穿刺液(胸水、腹水、关节液等)。需用药之前或用药之后1-2 天采集标本。对已用抗微生物药物而不能终止的患者,应在血药浓度最低时或下次用药前采集。 标本应严格无菌穿刺,标本量为1-5ml,置于无菌小瓶中常温下15min内送到实验室,以提高检出率。若不能及时送检,室温保存不能超过24小时。,三、穿刺液,标本的验收:检查盛装的容器是否有渗漏、破裂或明显污染检查盛装的容器标签与申请单是否相符检查标本量是否适量(不能少于1ml)检查送检时间是否符合要求,三、穿刺液,标本的拒收及处理:当送检标本有不合格项时,应拒收标本。并且与临床医师沟通,要求重新取材送检并说明拒收原因。如果不合格标本为不易重复取材送检,应及时与医师协商,标本可按常规处理,但报告单上须注明标本不合格,培养结果可能受影响。,四、尿液,清洁中段尿液1.时间:清晨第一次尿液为最佳。如医生或病人要求留取随机尿液也可以。每天检查一次即可。2.留取标本前用肥皂水清洗外阴及尿道口周围,再用清水冲洗尿道口周围3.留取中段尿10-20ml直接排入无菌杯中。无菌尿杯的要求:一次性 干燥 不渗漏 不吸水 无防腐剂的广口带盖的杯子。4.标本应于1小时内送检。5.一般连续送检3天,每天一次。,四、尿液,在抗微生物药物应用前采集标本;对已用抗微生物药物而不能终止的患者,应在血药浓度最低时或下次用药前采集。女性须避开经期。标本采集量:成人最好采集10-15ml,婴幼儿不得少于1ml。尿量不足,培养结果可能不可靠。尿液尽量能在膀胱中保留6h以上留取。,四、尿液,验收同穿刺液的验收方法不合格标本处理:对于标本有不合格项的,及时与临床医师或者是患者本人及家属联系说明原因,要求重新留取送检标本。,五、呼吸道标本,自然咳痰:最好为清晨第一口痰,先用温开水漱口或刷牙,用力咳出呼吸道深部痰,直接吐在清洁、无菌、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖容器内,标本量不少于1 ml。导痰:当患者无痰或者痰量较少时,可用超声雾化吸入3-5的高渗盐水导痰。经鼻腔或口腔吸痰:对咳痰乏力或者昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口腔吸痰。,五、呼吸道标本,经人工气道吸痰:对于气管切开或插管的病人,可用吸痰管经人工气道吸痰。经支气管镜采样:用防污染支气管镜专用吸痰管直接采集下呼吸道标本。咽拭子:用无菌棉拭子轻轻擦拭患者鼻咽部粘膜,留取标本置无菌试管内送检。,五、呼吸道标本,标本应于2小时内送检,不能及时送检的标本可4冷藏保存,冷藏时间不能超过24小时。建议尽快送检,冷藏对结果有影响。一般连续送检3天,每天一次抗酸染色(即找结核菌)标本也建议留晨起痰或随机痰。,六、粪便,1.建议将粪便直接排泄在便盆、塑料巾上。不能排泄在抽水马桶自来水中,因为这样留取的标本会被尿液、消毒剂、自来水等污染2.采集有脓、有血或是有粘液的部分。水样标本可取絮状部分送检。外观无异样的标本(黄色成形软便)不建议进行细菌学检查。,六、粪便,3.收集约10-20g(蚕豆大小),水样标本1-2ml,置于清洁干燥容器4.立即送检,或于1小时内保温送检。不能及时送检的标本可4 冷藏保存,冷藏时间不能超过24小时。建议立即送检,冷藏对结果有影响。,七、皮肤和软组织(伤口),如不怀疑感染不建议做细菌培养送检感染的组织或者体液(尽量避免拭子)采集前严格消毒,对于大多数开放性伤口应该先前清创、皮肤消毒,注意严格无菌操作。烧伤伤口清创后采集渗出液。若标本量少用拭子采集前应先沾取无菌生理盐水,七、皮肤和软组织(伤口),未破裂脓肿不能用拭子,消毒后用注射器将脓肿内容物吸出然后切开脓肿引流,取部分脓肿壁送检。如有需要也可将注射器中脓肿内容物送检。5.不要仅送检脓液,应在病灶及基底部边缘采集标本,最好是组织标本注:由于实验室条件有限,厌氧培养不能开展,八、标本接种,临床标本对于培养基的选择1.痰标本血培养基麦康凯/巧克力2.尿标本血培养基(密涂)/麦康凯3.便标本伊红美蓝

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