MCAO模型

MCAO model,杨荣兵,MCAO是middle cerebral artery occlusion 的缩写形式，中文意思为中脑动脉栓塞。,简介,心脑血管疾病是危及人类健康的头号杀手。,制作模型目的,Leading Causes of Death for Asian or Pacific Islander(2002）,脑血管病包括缺血性和出血性脑血管病，其中缺血性脑血管病占80-85%。大脑中动脉是常见的出血或梗塞发生部位。制作模拟人脑缺血模型对脑缺血发病机制及药物筛选有重要意义。,制作模型目的,制作原理,大脑中动脉栓塞模型并不是把线栓插进大脑中动脉,而是经颈内动脉入颅并插入大脑前动脉,从而阻塞来自栓塞侧的大脑前动脉的血供,以及堵塞接受后交通动脉血供的的颈内动脉颅内段.供被线栓阻断. 大脑前动脉通过前交通动脉和对侧大脑前动脉相连通,颈内动脉通过后交通动脉和基底动脉相连接,从图中可以看出,大脑中动脉的血,MCAO model making,动物：大鼠器械：常规手术器械外，需要钓鱼线，直径0.22mm，一端用火焰灼成钝圆形，距钝圆段18mm做标记（插入深度）麻醉：10%水合氯醛（3ml/kg）,实验材料,常规麻醉固定大鼠，颈前皮肤消毒,实验过程,切开颈前皮肤，钝性分离皮下组织，分离颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉,结扎颈总动脉、颈外动脉，颈内动脉挂线、夹闭,切口、插线,结扎固定插入的鱼线,缝合,评分方法有很多种，这里介绍longa评分法 0分：正常，无神经功能缺损；1分：左侧前爪不能完全伸展，轻度神经功能缺损；2分：行走时，大鼠向左侧（瘫痪侧）转圈，中度神经功能缺损；3分：行走时，大鼠身体向左侧（瘫痪侧）倾倒。重度神经功能缺损；4分：不能自发行走，有意识丧失。 2h时评分比较明显，24h比较稳定，1-3分造模成功,神经行为学评分,神经功能的恢复血清总超氧化物歧化酶（SOD）活性丙二醛（MDA）含量梗死体积病理组织损伤及细胞超微结构改变的影响进行统计学分析基质金属蛋白酶类（MMPs）,可测指标,检 测 腹 动 脉血 血液 流变 学 动 态 变 化 ； 测 定 脑 组 织 白细 胞 介 素 一1( I L一1 ) 和 肿 瘤 坏 死 因 子 一( T NF ) 含 量 ； 观 察 脑 细 胞 的 病 理 形 态 学 变 化 并 进 行 细 胞 计 数 ； 检 测 细胞 凋 亡情 况,可测指标,TTC（2，3，5氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白,脑组织TTC染色,动物麻醉，灌注（心脏左心室穿针,剪开右心耳，TTC和WB可以不灌注，若灌注，用生理盐水），取脑。脑切片（切片前可将脑组织在负20度冻20min，方便切割）：一般切成56 片，每隔2mm 切一片。,脑片置TTC染液中，37度避光染色30min，间或翻转脑片，使染色均匀。拍照，软件计算梗死体积，统 计学分析不同组间的差异。,本次介绍只是比较通用的一些实验方法，实际实验设计中，可以根据实验需要进行综合运用，不断改进！,后记,注重准备MCAO模型的东西