生物制剂项目方案.doc

生物制剂项目方案一、生物制剂提出的背景近年来，大量使用化学肥料、化学农药和激素类饲料添加剂，进行大面积单品种种植和大规模单畜种养殖，投入农用机械、电力等动力和能源，获得了农牧业的高速发展，基本满足了人口的迅速膨胀对粮食、农畜产品的需求。但大量使用化学肥料、农药已使土壤生态环境、土壤理化性状及土壤微生物区系受到不同程度的破坏，尤其是过多施用单质化学肥料，已使土壤中营养元素比例严重失调，肥力供给能力下降，土壤板结加剧，根际土壤微生物优势种群大量减少，并在一定程度上对农产品品质造成了污染，使农产品难以达到绿色食品的标准。大量使用激素和抗菌素类饲料添加剂，畜产品品质下降，导致耐药菌株的产生，通过食物链进而严重威胁到人类健康。随着微生物领域科学技术的进步，各国科学家普遍认为，开发农用微生物制剂是减少或取代化肥、化学农药和激素抗菌素类饲料添加剂的有效途径。生物制剂就是针对上述弊端及其国内农业生产现状，适应现代“绿色农业”和“生态农业”的发展趋势，减少化学生产资料的投入，而采用高科技生物工程技术研究开发系列微生物肥料、微生物农药、土壤修复剂、微生物饲料添加剂和水产养殖微生物制剂等农业生产资料。这也是顺应当今农业生产资料的发展方向，与国际农业接轨的必由之路。二、项目技术（工艺）方案1. 发酵工艺流程发酵工艺流程主要以液体深层发酵制备浓缩液或粉剂为主，工艺主要环节为：原菌种活化菌种扩大培养种子罐培养发酵罐培养添加吸附载体或浓缩压滤干燥粉碎粉剂质量检测包装产品检测2菌种生产操作规程 仪器设备和试剂：无菌室或超净工作台、灭菌锅、试管、克氏瓶、冰箱、显微镜。NaOH、HCl、NaCl、牛肉膏、蛋白胨和琼脂等 培养基制备：按如下配方制备培养基：牛肉膏0.3%，蛋白胨0.5%，NaCl 0.5%，琼脂2%。将琼脂加热溶化后用NaOH或HCl调PH值至7.0-7.5，然后分装克氏瓶或试管，置于灭菌锅内，在0.11MPa压力下灭菌30min，冷却后制成斜面备用。 菌种活化与扩大培养：用培养基在无菌条件下从原菌种斜面上挑取少许菌苔，放置试管斜面内进行划线，然后置28-30温箱内培养24h，经检查无杂菌、菌体生长整齐，再置28-30温箱内培养24-28h，肉眼观察，菌苔丰满，涂片、染色检查无杂菌，芽孢大小一致的，可放冰箱中存放备用(4左右为宜)。3种子罐培养 培养基：种子罐培养基配方：豆饼粉0.5%、鱼粉0.3%、玉米粉0.5%、葡萄糖0.3%，豆油0.2%-0.3%(或泡敌0.3%)。 空发酵罐灭菌：发酵罐在应用前清洗干净，排除污物，并在0.14MPa压力下，灭菌30min。 种子罐装料：参考1的配方比例装料，投料量不得超过罐容积70%。 种子罐灭菌：装好料后，在0.11MPa压力下灭菌30min，冷却至30后即可接种。 悬浮液制备：在无菌条件下将每个克氏瓶斜面菌种加100ml无菌水，把菌苔刮下制成孢子悬浮液，含菌量为10亿个菌体/ml，并在80恒温水锅中处理20min。 接种：将制好的孢子悬浮液，在无菌条件下接种后，按1%的比例接种于冷却至30的种子罐内进行培养。 种子罐培养条件控制：接种后在温度为28-30，压力0.05MPa通气量1:1(每min体积比)和220转/min搅拌条件下，培养8-10h。4发酵罐发酵 发酵罐培养基：配方：豆饼粉2%，鱼粉0.5%，玉米浆1.8%，淀粉0.4%，硫酸镁0.06%，碳酸钙0.5%，磷酸二氢钾0.03%，豆油0.1%或泡敌0.05%，用NaOH或HCl调PH值7.07.5左右，装置为罐容积的70%。 发酵培养条件：搅拌速度180-200转/min，罐压0.05MPa；通气量：移种后4h内通气量有1：0.7-0.8(每分钟进出体积之比)，以后逐淅增大至1:1。一般发酵培养周期为12-18小时，在芽孢70%形成,个别芽孢开始脱落时，即可放罐。5放罐指标芽孢含量70%杂菌污染 0.3%含菌量40亿个菌体6后处理操作规程 仪器设备：搅拌机、板框、干燥机(装置)、超细度粉碎机等。 吸附剂：一般采用的粒度为0.09mm的轻质碳酸钙为吸附填加剂，加入量按下列公式计算： 发酵液体积发酵液含菌量吸附剂的量- 80%1/2固体投料量300亿/g 压滤：按2规定加入吸附剂后， 机械搅拌3-6h，使菌孢全部被吸附，然后再用板框压滤。 干燥：将板框压滤后的滤饼捣碎后。置于烘干机或烘干装置内进行烘干。烘干时的温度。不超过65，要不断翻动，使受热均匀。当含水率5%时，即可进行粉碎、包装。 粉碎：利用高细度粉碎机粉碎，100%通过0.09mm孔径筛。8成品检验7.检验标准 具体方法见粉剂标准；含水率用干燥失重法(重量法)测定，含水率5%为合格，细度采用湿筛法测定，100%通过0.09mm筛为合格，具体方法按HG2-896标准的湿筛法测定。8包装用编制袋（内有塑料袋）25kg包装，于干燥通风处贮存，保存期为3年。三、生物制剂的优点生物制剂正是当代可持续农业、有机农业、生态农业发展的新兴产业。生物制剂有以下优点： （1）高效的多功能性：具有促进作物生长、提高农产品产量、改进品质、提高抗逆性等功效。（2）广泛的适应性：受地域和环境条件影响较小。（3）极大的亲和性：在植物体表、体内定植转移。（4）高度的安全性：对植物、动物、环境等无毒、无污染、无残留。（5）土壤修复性：改善土壤及环境，培肥土壤、增加土壤有益微生物的数量、改良盐