006--洁净室(区)沉降菌的测规程.doc

山东XX制药有限公司 Shandong Keyuan Pharmaceutical Co., Ltd标题Title洁净室（区）沉降菌监测操作规程文件编号：SOP-ZL-006Document No.Page 2 of 7起草人：Written by日期：Date 部门：质量管理部Dept.生效日期：Effective Date审核人:Reviewed by日期：Date 部门：质量管理部Dept.替代版本：04Replaced Version批准人:Approved by日期：Date 部门：分管副总Dept.版 本 号：05Version No.分发部门：质量管理部 Distribution1 目的确定医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法和标准。2 范围适用于不同洁净室（区）（包括洁净工作台）的沉降菌的测定和环境验证。3 责任QC微生物室负责洁净室（区）沉降菌的监测。4 内容4.1 参考标准中华人民共和国国家标准GB/T16294-19962010医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法。中华人民共和国卫生部发布的药品生产质量管理规范（2010年修订）。4.2 监测程序4.2.1 设备高压消毒锅恒温培养箱培养皿：一般采用90mm15mm的硼硅酸玻璃培养皿。4.2.2 培养基及平皿制备4.2.2.1 一般采用普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基4.2.2.2 制备过程如下：u 将培养皿与用三角瓶装好的培养基在高压消毒锅内置于121湿热灭菌20分钟或180干热灭菌2小时；u 将培养基加热溶化，冷至45时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。u 待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于3035恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用。u 制备好的培养基平皿倒置在28的环境中存放，注意避免污染。4.2.3 采样点和监测频次保密文件山东科源制药有限公司 Shandong Keyuan Pharmaceutical Co., Ltd标题Title洁净室（区）沉降菌监测操作规程文件编号：S0P-ZL-006Document No.版本号Version No.：05Page 7 of 94.2.3.1 采样点的布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于集中，按照洁净区的面积大小，而制定最少采样点数目（附件），在满足最少采样点数的同时，还宜满足最少培养皿数和采样点布置（附件）。4.2.3.2 工作区采样点的位置离地0.8米1.5米左右（略高于工作面）。并在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。4.2.3.3 监测频次：每月一次，特殊情况及时监测。4.2.4 测试规则4.2.4.1 沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温湿度必须达到规定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。4.2.4.2 测试前被测试洁净室（区）已经过消毒。4.2.4.3 测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。4.2.4.4 测试时间：u 对单向流（如A100级净化房间及层流工作台），测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。u 对非单向流，如10,000B级、100,000C级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟后开始。4.3 测试步骤4.3.1 采样将已制备好的培养皿按要求放置，使培养基表面暴露0.5小时。4.3.2 培养全部采样结束后将培养皿倒置于恒温培养箱中，在3035培养，时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验，每批可选定3只培养皿作对照培养。4.3.3 菌落计数用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，并用510倍放大镜检查，有否遗漏。4.3.4 注意事项测试时应注意如下事项：u 防止人为对样本的污染。u 对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。u 般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，应注意培养皿边缘生长的菌落，并注意菌落与培养基沉淀物的区别。u 采样时应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。4.3.5 结果计算用计数方法得出各个培养皿的菌落数，按下式计算：平均菌落数MM1M2-Mnn式中：M11号培养皿菌落数M22号培养皿菌落数 Mnn号培养皿菌落数 n培养皿总数4.3.6 结果评定4.3.6.1 洁净度级别沉降菌最大允许值（菌数/皿）静 态静 态*A级1C级1000033D级1000001010“*”动态标准根据产品及验证情况修订。4.3.6.2 用平均菌落数判断洁净室（区）空气中的微生物。u 洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。u 若某洁净室（区）内的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区预先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。4.3.7 警戒限度和纠偏限度洁净度级别沉降菌警戒限度（菌数/皿）动 态A级1C级2D级5洁净度级别沉降菌纠偏限度（菌数/皿）动 态A级1C级2.5D级84.3.8 异常情况的处理4.3.8.1 当连续三次样品测试结果超过警戒警戒标准或单个样品的结果特别高时调查原因，必要时采取相应纠偏措施。4.3.8.2 当空调系统维修（如更换高效过滤器）或停用超过30天时，重新启用空调系统后应及时对洁净室（区）进行环境监测。5 修订记录版本号主要变更内容描述变更原因生效日期备注新建文件 2004.03.0101增加文件版号文件版本升级2006.01.0102变更登记号文件版本升级2009.10.2603洁净区更改洁净级别客户审计2010.08.0104增加异常情况处理的描述客户审计2012.06.2005增加了警戒限度和纠偏限度，升级洁净区级别，同时调整文件格式文件版本升级6 附录附件1 沉降菌监测的最少采样点数目附件2 沉降菌监测的最少培养皿数附件3 沉降菌监测的采样点布置附件4 房间编号一览表SOP-ZL-006-FJ1 洁净室（区）沉降菌监测记录附件1 沉降菌监测的最少采样点数目 面 积m2洁 净 度 级 别A级C级D级1010 2020 4040 100100 200200 400400 10001000 20002000234816408016040080022241020401002002 22236133263注：对于单向流洁净室，是指送风面积。对于非单向流洁净室是指房间面积。附件2 沉降菌监测的最少培养皿数洁净度级别所需90mm培养皿数（以沉降0.5小时计）100A级1C级100000D级1422附件3 沉降菌监测的采样点布置. . . . . . .“ .”为采样点采样点布置 “.” 为采样点山东科源制药有限公司 Shandong Keyuan Pharmaceutical Co., Ltd标题Title洁净室（区）沉降菌监测操作规程文件编号：S0P-ZL-006Document No.版本号Version No.：04Page 9 of 7附件4 房间编号一览表盐酸二甲双胍洁净区女二更 101男二更 102气闸室（人） 103洗衣间 104走廊 105结晶离心室 106洁具间 107干燥间 108待检室 109粉碎间 110容器清洗间 111包材间 112气闸室（包材） 113内包间 114气闸室（成品） 115格列齐特洁净区二楼楼梯间（二楼）201走廊 202洁具间 203干燥间 204结晶离心室 205粉碎间 206容器清洗间 207格列齐特洁净区一楼女二更 208男二更 209手消毒室 210气闸室（人） 211走廊 212洗衣间 213容器清洗间 214洁具间 215包材间 216内包间 217成品暂存间 218异氟烷洁净区女一更 301手清洁间（女） 302女二更 303男一更 304手清洁间（男） 305男二更 306气闸室（人） 307洗衣间 308走廊 309洁具室 310容器清洗间 311气闸室（包材） 312瓶暂存间 313瓶洗间 314烘瓶室 315灌装间 316待检室 317气闸室（成品） 318综合洁净区女二更 401男二更 402气闸室（人） 403洗衣间 404走廊 405洁具间 406结晶离心室（北） 407干燥间 408结晶离心室（南） 409粉碎间 410混料间 411待检室 412容器清洗间 413包材间 414气闸室（包材） 415内包间 416成品暂