降钙素原综述

降钙素原综述降钙素原综述 1 1 临床背景资料临床背景资料 降钙素原 procalcitonin PCT 是降钙素的前肽 一种无激素活性的糖蛋白 由 116 个氨 基酸组成 生理情况下 甲状腺 C 细胞可产生极少量的 PCT 健康人血清中 PCT 水平通常测不到 但在细菌感染时 除甲状腺外 肝脏的巨噬细胞和单核细胞 肺 肠道组织的淋巴细胞及内分泌 细胞都能合成分泌 PCT 此时血清 PCT 水平会明显升高 且随感染进展或控制而持续在高水平或 逐渐下降 生成 PCT 和降钙素的过程开始于转录 141 个氨基酸组成的多肽 前降钙素原 它由一个信号 序列 PCT 的 N 端 降钙素序列 PCT 的 C 端组成 当信号序列介导前降钙素原被内质网摄取后 信号序列被降解 剩余的蛋白质即为 PCT 若蛋白质溶解 降钙素即从 PCT 中分离 但在内毒素 或某些细胞因子的干预下 这一蛋白质溶解过程可被抑制 此时 PCT 及其片段被释放进入循环 有学者认为脂多糖和其他多种炎性因子诱导 PCT 的产生 其升高程度可显示炎性反应程度 Oberhofer 等 1 认为与其他细胞因子相比 脂多糖短时间内诱导大量 PCT 生成 提示脂多糖可能 直接促进 PCT mRNA 的表达和蛋白质翻译 并对健康志愿者静脉注射一定量内毒素后进行连续观 察 注射 2h 后可在血浆中检出 PCT 6 8hPCT 迅速上升 12 24h 缓慢达平台期 2 3d 降至正常 范围 Dandona 等 2 认为细菌内毒素是诱导 PCT 产生的最主要刺激因子 健康人注射少量的细菌 内毒素就能刺激 PCT 的合成 除内毒素外 外毒素及某些细胞因子也可诱导 PCT 产生 血浆中的 PCT 非常稳定 收集标本 24h 后 PCT 浓度在室温下约下降 12 4 时下降 6 PCT 被特异性的蛋白酶降解 其在循环中的半衰期是 25 30h 肾功能异常患者中 PCT 的清除半衰期 无显著延长 2 2 功能功能 许多研究机构都试图揭示 PCT 的生物学作用 但除了明确其对血浆钙水平起作用外 其他作 用均未能明确 目前认为 PCT 是一种非固醇类抗炎物质 在调控细胞因子网络中发挥着重要作用 在全身严重细菌感染和脓毒症时异常升高 也有人认为 PCT 是一种次级炎性介质 放大并加重感 染的炎性反应 但不是启动因素 孙万权等 3 报道细菌感染时 PCT 浓度升高 而在手术创伤 病 毒感染 局部炎症时保持低水平 这种变化迅速而且稳定 是 PCT 有别于其他指标的特征之一 精品文档 2欢迎下载2欢迎下载 是区别病毒感染和细菌感染的敏感指标 许多学者研究也发现 全身性细菌 真菌和寄生虫感染 时 PCT 水平异常增高 增高的程度与感染的严重程度及预后相关 在全身性细菌感染和脓毒症 鉴别诊断 预后判断 疗效观察等方面有很高的临床价值 PCT 浓度的升高不受机体免疫抑制状 态的影响 当机体处于严重的细菌感染时 即使患者处于免疫抑制状态或尚无明显的临床表现 血浆中 PCT 浓度也可明显升高 其升高程度与感染的严重度呈正相关 Monneret 等 4 发现 血 清 PCT 和降钙素相关肽可以抑制细菌脂多糖诱导的人循环血细胞的肿瘤坏死因子产生 由此认为 PCT 具有抗炎作用 但是 Nylen 5 采用叙利亚仓鼠大肠杆菌脓毒症动物模型发现 PCT 可以增加 动物模型的死亡率 PCT 中和抗体则可降低动物的病死率 他们认为 PCT 不仅是重要的炎性标 志物 而且参与了炎性反应 3 3 临床意义临床意义 1 鉴别诊断细菌性与非细菌性炎性反应 国内外大量的临床研究表明 在细菌引起的全身性炎性反应时 血清 PCT 浓度会出现明显增 高 但在病毒感染 自身免疫性疾病 器官移植排斥反应等炎性反应时 血清 PCT 浓度仅维持低 水平 提示血清 PCT 浓度可以鉴别诊断细菌性或非细菌性炎症 2 判断脓毒症和全身炎性反应的严重程度 脓毒症是重症监护室最常见的严重疾病之一 是引起全身炎性反应综合征 多器官功能障碍 综合征的常见原因 也是致残 致死率非常高的疾病之一 所以对脓毒症及早确诊 让患者及时 得到治疗是重症监护室医生的主要任务 吴丽娟等 6 对 35 例入住重症监护室的患者研究发现 脓毒症患者血清 PCT 值明显高于非脓毒症患者 认为 PCT 优于目前临床上应用的炎性反应指标 可作为早期鉴别全身感染 尤其是细菌感染的快捷 敏感 准确的检测手段 何建平等 7 对新生 儿重症感染研究发现 PCT 浓度 0 9 g L 时 诊断严重细菌感染的敏感度和阴性预测值均为 100 但特异性为 86 阳性预测值为 88 3 早期诊断严重细菌感染及评价病情活动情况 严重细菌感染时血清 PCT 浓度不仅明显升高 并且与严重程度密切相关 PCT 对诊断感染有 指导意义 尤其对重症感染诊断价值更高 PCT 取 1 g L 为临界值时 其诊断重症感染的敏感 度达 96 4 特异度 95 8 取 1 5 g L 为临界值时 虽敏感度降为 92 9 但其特异度达 100 8 精品文档 3欢迎下载3欢迎下载 4 指导应用抗生素 临床上 大夫往往需要凭经验和一般的实验室检查来选择抗生素 由于细菌培养及药敏实验 所需时间较长 不能及时为大夫提供选择抗生素的依据 所以临床上抗生素不合理使用日趋严重 细菌耐药性越来越严重已成为医学界的一大难题 Christ Crain 等 9 对 302 例疑诊为社区获得 性肺炎患者研究发现 PCT 浓度 0 1 g L 显著减少治疗 0 25 g L 减少治疗 0 25 g L 加强治疗 0 5 g L 显著加强治疗 结果提示 PCT 组的患者抗生素暴露率 抗生素处方 抗生素使用时间均明显少于对照组 而两组间的最终临床结果无明显差异 4 4 CRPCRP 的测定的测定 目前 检测 PCT 的实验室方法有很多 不仅可以定性 亦可以定量 常用的方法有如下几种 1 放射免疫学分析法 利用人工合成的多克隆抗体特异地识别和连接合成氨基酸降钙素原 该方法能检测正常人的 血清 PCT 可靠敏感度为 4pm mL 检测的是游离 PCT 结合型 PCT 和降钙素基因相关肽前体的混 合物 而不能区分上述三种物质 该法检测耗时长 19 22h 而且有放射性元素的污染使用受到 限制 2 双抗夹心免疫化学发光法 ILMA 运用双单克隆抗体 其中一个抗体为降钙素抗体 另一个为抗钙素抗体 分别结合到 PCT 分 子的降钙素和抗钙素部位 可排除交叉反应 其中一个抗体是光标记的 另一个未标记的抗体固 定在试管的内壁 反应过程中两个抗体与 PCT 分子结合而形成三明治复合体 发光部位于反应管 的表面 该法操作简便 特异性强 敏感性高 测定的低限值为 0 1ng mL 2h 可以出结果 3 胶体金比色法 B R A H M SPCT Q 半定量快速实验 采用胶体金技术 包括胶体金标记的抗抗钙素的单克隆抗体和用作包被的抗降钙素多克隆抗 体 当标本 血清或血浆 加人标本孔 金标单克隆抗体与标本中的 PCT 结合 形成金标记的抗原 抗体复合物 该复合物在反应膜上移动 与固定在膜上的抗降钙素抗体结合形成更大的复合物 当 PCT 浓度超过 0 5ng mL 该复合物显示红色 红色的深浅与 PCT 的浓度成正比 与标准比色 板比较即可得出 PCT 的浓度范围 结果分为四级 正常0 5ng mL 明显升 精品文档 4欢迎下载4欢迎下载 高 2ng mL 显著升高 10ng mL 该法具有快速简便 易观察的特点 4 透射免疫浊度法 样品中的 PCT 与试剂中的 PCT 单克隆抗体发生抗原 抗体反应 使反应液浊度增加 并在一 定范围内反应液浊度与所加人抗原的量呈线性关系 可使用生化分析仪或其它光学检测仪器在 600nm 波长处测定反应液吸光度值 反应液吸光度值与所测 PCT 浓度成正比 该测定方法简便 快速 可自动化 适合于批量检测 2005 年国内已有研制开发的 PCT 免疫比浊试剂盒供应 为 PCT 的广泛应用提供了方便条件 虽然免疫透射比浊的方法学及临床应用尚需做进一步的验证 但其应用前景非常看好 精品文档 1欢迎下载1欢迎下载 文献资料文献资料 1 Oberhofer M Stonauns I Russwurm S etal Procalcitoninexpression in human peripheral blood mononuclear cells and its modulation by lipopolysaccharides and sepsisrelated cytokines in vitro J J Lab clin Med 1999 134 1 49 55 2 Dandona P Nix D Wilson MF etal Procalciton in increase after endotoxin injection in nomal subjects J J Clin Endocrinol Metab 1994 79 6 1605 1608 3 孙万权 庄荣 魏大臻 等 降钙素原与C 反应蛋白联合测定对严重多发伤患者早期细菌感染的 诊断价值 J 重庆医学 2009 38 16 2018 2019 4 Monneret G Pachot A Laroche B etal Procalciton in and calcitonin gene related peptide decrease LPS induced TNF production by human circulatingblood cells J Cytokine 2000 12 6 762 764 5 Nylen ES Whang KT Snider RHJr etal Mortality is increased by procalcitonin and decreased by an antiserum reactive to procalcitonin in experimental sepsis J Crit Care Med 1998 26 6 1001 1006 6 吴丽娟 鲁涛 尹培刚 等 脓毒血症患者血浆降钙素原的变化及意义 J 中日友好医院 学报 2004 18 2 73 76 7 何建平 申昆玲 林影 等 降钙素原对新生儿重症感染的诊断价值 J 首都医科大学 学报 2005 26 5 545 548 8 徐祥 耿波 降钙素原的测定及其临床意义 J 临床检验杂志 2000 18 5 315 9 Christ Crain M Stolz D Bingisser R