免疫组化在肿瘤诊断的应用

免疫组化在肿瘤诊断中的应用,（一）对“未分化”恶性肿瘤的分类 如在HE(苏木精-伊红染色法)切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞起源的特征，不能分类，但临床上又必须根据肿瘤的种类作出治疗与预后判断，这种情况下可用到免疫组化。在进行免疫组化前病理医生应根据肿瘤发生部位、组织学的蛛丝马迹及临床特征正确地选择抗体。如发生于直肠的上皮样包含大细胞的未分化肿瘤，其鉴别诊断主要考虑为未分化癌、淋巴瘤、恶性黑色素瘤，可以使用表X-1列出的免疫组化抗体：,表X-1未分化癌、淋巴瘤和恶性黑色素瘤的免疫组化抗体 未分化癌 淋巴瘤 恶性黑色素瘤 细胞角蛋白（CK） + - -上皮细胞膜抗原（EMA） + - -波形蛋白（Vimentin） - +/- +HMB45 - - +S-100 - - +白细胞共同抗原（LCA） - + -,1角蛋白（Keratin）：一种中间丝蛋白，分为：（1）表皮角蛋白（Epidermal keratin，EK）鳞状上皮或高分化鳞癌标记；（2）细胞角蛋白（cytokeratin，CK）低分子角蛋白，对腺癌、移行细胞部及低分化鳞癌标记。一般用广谱型角蛋白抗体为好，常用。,2上皮膜抗原（Epithelial membrane antigen，EMA）：这亦是常用的上皮细胞标记抗体，细胞膜阳性，用Zankers、Bouin或B5固定液中固定为好。其在低分化和未分化上皮中表达好，但亦可在间变性大细胞淋巴瘤、恶性横纹肌样瘤中表达。,3波形蛋白（Vimentin，Vim）：是一种细胞中间丝蛋白抗体，在多数软组织肿瘤均可表达，但纤维细胞较明显，在一些上皮性肿瘤也有阳性反应。常用作间叶源与上皮源肿瘤的第一线鉴别抗体 4. S-100蛋白：是一种周围神经雪旺氏细胞特异标记抗体，后发现对脂细胞、朗格罕氏细胞、肌上皮细胞、黑色素细胞及其肿瘤均可阳性。,有时这些抗体用于这种目的诊断中并不完全理想，如分化差的癌可显示Vimentin或S-100蛋白，有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原，一些黑色素瘤表现出角蛋白，除黑色素瘤以外的一些肿瘤有时也可以表达HMB-45，这就强调了在肿瘤诊断中应使用一组抗体而不是单个抗体。,（二）、对不同器官与组织交界处肿瘤进一步分类在一些组织器官交界处，由于重叠的特征，难以仅凭组织学基础对肿瘤进行分类，其中有些特征（至少目前）在理论界较感兴趣（如胃肠道梭形细胞肉瘤是肌肉起源平滑肌肉瘤，还是神经起源神经鞘瘤，还是间质起源的胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor GIST），其鉴别见下表：X-2 平滑肌瘤、神经鞘瘤、GIST和Kaposi肉瘤鉴别的免疫组化抗体 Des MSA SMA CD34 CD31 S-100平滑肌瘤 + + + - - -神经鞘瘤 - - - - - +GIST - - - + - -Kaposi肉瘤 - - - + + -,1. 结蛋白（Desmin，Des）：平滑肌、横纹肌均可阳性。2. 肌特异性肌动蛋白(muscle-specific actin,MSA):平滑肌为阳性。3. 平滑肌肌动蛋白 (smooth muscle actin,SMA)：平滑肌为阳性。4. 第8因子，CD34：对血管内皮细胞肿瘤，胃肠道间质瘤标记较特异。 注：（1）国际上将百余种标记抗体统称为CD（Cluster Designation）系列。 （2）淋巴细胞标记与R-S细胞多数为膜阳性，而Ig与组织细胞标记为胞浆阳性。,（三）、对恶性间皮瘤的鉴别 病理医生常碰到的问题是发生于胸、腹膜的肿瘤是转移性腺癌或是其它浆膜腔肿瘤，还是恶性间皮瘤。可以鉴别腺癌与间皮瘤的一组抗体 可以鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体,X-3 鉴别腺癌与间皮瘤的抗体 腺癌 间皮瘤细胞角蛋白（cytokeratin CK） + +波形蛋白（Vimentin） +/- +/-癌胚抗原（CEA M7072） +/- -LeuM1 +/- - B72.3 +/- -Ber-Ep4 +/- -钙网膜蛋白（Calretinin） - +CK5 - +HBME-1 - +*血小板调节素（TM） - +*上皮膜抗原（EMA） + +分泌成分 + -人胎盘产乳素 + -Lewis blood group antigen + -*血小板调节素（Thrombomodulin TM）在内皮细胞、间皮细胞、巨噬细胞、室管膜细胞、缄默细胞阳性。*EMA间皮瘤以胞膜阳性为主，腺癌以胞浆阳性为主。,X-4 鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体 血管源性肉瘤 恶性（纤维型）间皮瘤 良性（局限纤维型）间皮瘤 CK - + - ACTIN +/- + - CD34 + - + 第八因子 + - -,（四）肿瘤细胞增殖活性与细胞凋亡标记抗体 瘤细胞增殖指数反应细胞增殖活性，是瘤细胞新生（恶性）状况的客观指标，与凋亡指数呈反比关系。常用抗体有：1增殖细胞核抗原（proliferative neuclear Antigen，PCNA），核阳性。 2Ki-67，Brdu抗体：原要求新鲜组织，新近有Ki-67石蜡切片标记抗体问世。,3细胞凋亡（Apoptosis）标记抗体：开始发现细胞凋亡发生于正常细胞受基因调控性自然性死亡。后发现肿瘤细胞亦可发生，而且某些药物放、化疗亦可诱发细胞凋亡，故成了研究肿瘤发生、发展、治疗的热点。其标记抗体有：（1）凋亡抑制基因蛋白抗体：Bcl-2、Bcl-XL、mtp53。（2）促凋亡基因蛋白抗体：Fas/FasL系统，wtp53、Bax、Bc