斑叶露兜树茎腐病病原菌的鉴定及其在植株体内的分布.doc

1 建议 1 前言说明研究的重要性 前人有研究吗 知道是什么菌 提高菌鉴定意义的说明 2 讨论中 要把研究的意义说出来 比如 明确了菌源 未见报道 为防治提供依据 3 我给你查了世界文献 不多 你看了后 说明几个问题 叶露兜树茎腐病有人鉴定过吗 Fusarium verticillioides 还可以发生在什么上面 前人都对这个研究作了什么 我们的研究要干什么 4 题目 斑叶露兜树茎腐病的发生特性及其病原菌分子鉴定 Comment MS1 已改学名 Comment MS2 英文中文化 建议 重写 2 斑叶露兜树茎腐病病原菌的鉴定及其在植株体内 的分布 肖荣凤 林抗美 郑雪芳 蓝江林 刘 波 福建省农业科学院农业生物资源研究所 福建 福州 350003 摘要摘要 本研究分离与鉴定了引起斑叶露兜树茎腐病的病原菌并分析了病菌在该植株体内的分布特性 本研究采用常 规病原菌分离方法 Booth 镰刀菌鉴定方法及菌株的 rDNA ITS 序列分析 确定从福建建新采集的斑叶露兜树茎腐病的病原 菌为串珠镰刀菌明确了从福建建新采集的斑叶露兜树茎腐病的病原菌为串珠镰刀菌 Fusarium verticillioideSverticillioides 菌株的核苷酸序列在 GENBANK 中的登录号为 EU717682 串珠镰刀该菌在斑叶露兜树 植株体内的数量分布的研究结果表明 含菌量因植株部位和病情不同而有明显差异 就分离的部位而言 茎部的含菌量最 大 其次为根部 而叶部的含菌量最少 就病情而言 病株的含菌量是无症株的 23 倍 关键词关键词 斑叶露兜树 串珠镰刀菌 ITS 序列分析 体内分布 中图分类号 中图分类号 文献标识码 文献标识码 A 文章编号 文章编号 Identification of Fusarium verticillioides causing root rot of Veitch s Screw Pine and distribution of the pathogens inside the plants XIAO Rong feng Lin Kang mei Zheng Xue fang LAN Jiang lin and LIU Bo Agricultural Bioresource Research Institute Fujian Academy of Agricultural Sciences Fuzhou 350003 China Abstract The objectives of this study were to isolate and identify pathogen which caused root rot on the plant of Pandanus veitchii Dall and to determine the distributions of this isolate inside the plant caused the symptoms vascular wilt yellows root rot and damping off on Pandanus veitchii Hort The result showed that the pathogen was Fusarium verticillioides which was isolated from the plant of P veitchii in Jianxin Fujian province PR China and identified by using Booth s method and the sequence of its rDNA ITS The resulted showed that the pathogen was identified as F moniliforme GenBank accession number for the isolation nucleotide sequence was EU717682 Meanwhile the distributions of F verticillioidesthe pathogens were detected inside the symptomatic and asymptomatic P veitchii plants to and find found that the amount of the pathogen was higher in the base stem than that in the root and least in the leaves The amount of the pathogen in the symptomatic plant was 23 times higher than that in the asymptomatic plant And the amount of the pathogen was 23 times higher in symptomatic plants than asymptomatic ones It was the key for environment aeration within the plants to prevent the disease 收稿日期 基金项目 国家 863 计划项目 2006AA10A211 通讯作者 Author for correspondence E mail fzliubo 3 Keywords Pandanus veitchii Dall Fusarium verticillioidesFusarium moniliforme rDNA ITS Identification Distribution 斑叶露兜树 Pandanus veitchii Dall 原产中南太平洋的波里尼西亚及其诸岛屿 现已成为世界流 行的室内常绿观叶植物之一 斑叶露兜树叶形 叶色具有较高观赏价值 具簇生圆柱状肉质根和短的根 状根 叶基生 条形至长披针形 全缘或稍波状 适宜于室内装饰 近年来我国也有广泛的引种栽培 在福州建新花卉基地发现部分观赏盆景斑叶露兜树出现茎腐病 表现为植株的茎部受害严重 且叶片也 被不同程度的侵染 目前还未有关斑叶露兜树茎腐病相关病原菌的研究报道 鉴于该作物的经济与观 赏价值 茎腐病所造成的严重为害以及该病害的相关病原菌未见报道 因此 为了弄清该病原菌具有重 要的理论意义 并并为可为该病害的有效防治提供理论依据 本文从采集了花卉基地采集了无症株及 田间自然感病的植株及无症株进行病原菌分离 对其病原菌进行了鉴定 同时研究了病原菌在无症株与 病株植株体内的分布情况 现将研究结果报道如下 1 材料与方法 1 1 植株症状观察 试验于 2003 年在福州建新花卉基地进行 观察到部份斑叶露兜树盆景植株的茎基部出现茎腐状 因 此 拟采集无症株与病株各 3 株进行试验室的病害症状观察与病原鉴定株进行进一步的病害症状观察与 病原鉴定 1 2 病原菌的分离与形态鉴定 采用常规的组织分离法进行病菌的分离 方中达 1998 切取病株根茎处变色木质部 将新鲜病组 织切成 0 5 0 3 cm 大小的薄片 经 75 酒精处理 2 s 再用 0 1 升汞处理 2 3 min 取出用无菌水清洗 3 遍 置于马铃薯蔗糖琼脂培养基 PSA 上培养 每皿放 5 片病组织 共分离 15 个样本 25 1 5 培养 3 次重复 随机挑选 10 个有代表性组织块上的分离物进行单孢分离 分离纯化培养后采用 80 甘油冷冻 保存 病原鉴定依据 Booth 1971 的鉴定方法 单孢分离纯培养物 接在 PSA 培养基上 25 培养 4 d 测定单孢菌落的生长速度 取培养 15 d 的培养物进行孢子形态及产孢细胞观察 测量各类型分生孢子 长度与宽度 1 3病原菌的致病性检测 根据 Koch 氏法则进行分离物的回接测定 将 1 2 中的病原分离物扩大培养后中的单孢纯化保存的分 离物扩大培养后 配成浓度为 1 0 106 cfu mL 孢子悬浮液 采用浸根接种叶长约为 15 cm 的盆栽苗 由于 该植株根茎部组织较硬 采用的浸根时间为 5 h 以清水处理的做对照 各处理 10 株 观察植株的发病 情况并重新分离发病株的病原物 1 4 病原菌的分子鉴定 1 4 1 rDNA ITS区扩增 采用CTAB法提取菌株DNA 引物设计合成参考杨红等 2002 方法 正向引物 5 CTTGCGTTGATTACGTCCC 3 反向引物 5 TCCTCCGCTTATTGATATGC 3 PCR反应的总体积为 25 L 含有1个单位的Taq酶 10 buffer 2 5 L dNTP 0 2 L 10 umol L的正向引物和反向引物各1 L DNA模板25 ng PCR扩增程序 94 预变性10 min 94 变性1 min 55 退火1 min 72 延伸2 min 共25个循环 最后72 延伸10 min PCR产物经琼脂糖凝胶电泳 切胶回收 1 4 2 PCR 产物的直接比对分析测序 将回收的目的片断送交上海生工生物工程技术服务有限公司 序列结果通过国际互联网 http www ncbi nlm nih gov 进行核酸同源性检索 检索程序主要采用Blast 即核酸序列对核酸序列数据 库的检索 通过DNAStar软件中Clustal W方法及MEGA3 1软件进行序列分析 1 5 病原菌在斑叶露兜树植株体内的分布串珠镰刀菌在斑叶露兜树植株体内的分布 根据症状观察与分离物形态鉴定结果 在福州建新采集斑叶露兜树无症株取 1 1 中采集的斑叶露兜树 Comment MS3 这部分试验设计存 在缺陷 病原菌没有经过标记 因此 无法确定数量 4 无症株 AS 与田间自然感病植株 S 分段取样 方法 选无症株与病株各 1 株 且各取 6 个样品 分 别为根部 1 正常根 根部 2 有褐变根 茎部 1 茎基部无病症处 茎部 2 茎上部有病症处 健康 株无病症 如图 2 3 叶部 1 心叶 3 片 叶部 2 老叶 1 片 根部 1 根部 2 茎部 1 茎部 2 各截 取 5 cm 称重 叶部 1 叶部 2 称重 用清水冲洗 升汞消毒 无菌水漂洗后 加入无菌水 100 mL 用匀浆器制成匀浆 梯度稀释涂平板 各吸取 0 2 mL 至含终浓度为 200 u mL 链霉素的 PSDA 平板上 均匀涂布 在 25 的培养箱中培养 3 d 每个稀释度 3 次重复 采用平板菌落计数法统计镰刀菌单菌落数采用平板菌落计数法统计优势种群的单 菌落数 计算各样品组织每克鲜重的含菌量 分析无症株 AS 与病株 S 植株体内的尖孢镰刀菌的分 布状况植株体内的串珠镰刀菌的分布状况 2 结果与分析 2 1 病原菌的分离与形态鉴定 2 1 1 田间症状 斑叶露兜树植株 图 1 的根茎叶均可受到不同程度的感染 根部主要表现为变色腐烂 茎基部则变 色凹陷 严重时病斑上出现白色的菌丝体 图 2 箭头所示 病茎纵切面组织呈现褐色 图 3 S 而健茎 颜色正常 图 3 AS 发病初期叶片出现零星褐色病斑 后期叶片枯萎 图图 1 斑叶露兜树植株斑叶露兜树植株 Fig 1 Veitch s Screw Pine 图图 2 病茎病茎 S 与健茎与健茎 AS 茎茎 1 和茎和茎 2 Fig 2 Symptomatic stem S and asymptomatic stem AS stem 1 and stem 2 图图 3 病茎病茎 S 与健茎与健茎 AS 纵切面纵切面 Fig 3 Vertical section for symptomatic stem S and asymptomatic stem S 2 1 2 病原菌的形态鉴定 供试验的15个组织样本中 有13个样本中出现白色的分离物 经单孢分离保存的菌株10株 编号为 Fm B 1 1 030221 01至Fm B 1 1 030221 10 通过平板培养与显微观察结果表明 10个分离物具有相同的 特征 在PSA培养基上生长4 d的菌落平均直径为45 42 47 mm 菌丝白色至淡紫色 稀疏棉絮状 图4 小型分生孢子数量多 呈椭圆形或卵圆形 大小17 9 12 5 23 6 2 6 2 2 3 0 m 在产孢细胞 中串生 大型分生孢子镰刀型 细长 顶端逐尖 3个隔膜的居多 大小为26 6 20 5 33 5 2 8 2 5 3 8 m 图5 产孢细胞单瓶梗 分枝或不分枝 图6 依据Booth 1971 的鉴定方法 串珠镰刀菌在 PSA培养基上生长4 d的菌落直径大于25 mm 小型分生孢子多且串状着生 大型分生孢子镰刀状 较细 具3 5个隔膜 产孢细胞单瓶梗状 因此 初步确定侵害该植株的病原菌为串珠镰刀菌 F verticillioides S SASAS 茎 1 Stem 1 茎 2 Stem 2 S S ASAS 5 图图 4 菌株在菌株在 PSA 培养基上菌落形态培养基上菌落形态 Fig 4 The colony of isolation on PSA mediuma 图图 5 菌株的分生孢子形态菌株的分生孢子形态 小型分生了孢子 实线箭头所示 小型分生了孢子 实线箭头所示 大型分生了孢子 实线箭头所示大型分生了孢子 实线箭头所示 Fig 5 The conidiophores of isolation microconidia real line arrow macroconidia broken line arrow 图图 6 菌株的产孢细胞 实线箭头所示 菌株的产孢细胞 实线箭头所示 Fig 6 Conidiogenous cells of isolation real line arrow 2 2病原菌的致病性检测 接种病原分离物的植株从25 d开始均出现不同程度的症状 症状表现为边缘叶片出现轻微的黄化萎蔫 根部褐变 茎部纵切可见维管束组织变褐色 而清水处理植株生长正常 对接种发病的根茎部病组织进 行分离鉴定 获得了与接种前相同的微生物 证实了该病原菌对斑叶露兜树植株的致病性 2 3 病原菌的分子鉴定 利用引物P1 ITS4 对供试菌株Fm B 1 1 030221 01的rDNA ITS区进行扩增 扩增图谱见图7 从扩增 图谱可见 供试菌株扩增出单一条带 大小为700 bp左右 经测序表明 菌株的ITS长度为716 bp 序列 已登录GENBANKGenBank 序列号为EU717682 序列结果通过国际互联网 http www ncbi nlm nih gov 用Blast进行同源性搜索 得到的同源序列全部是镰刀菌属不同的物种 并选择作物上主要镰刀菌属各2个 菌株进行rDNAITS序列共同比对 利用Clustal W软件将序列匹配排列 用MEGA3 1软件采用近邻归群 法 Neighbor Joining N J 构建系统发育树 从系统树可以看出 图8 供试验菌株与 GENBANKGenBank中的2株串珠镰刀菌 F verticillioides AB237662及AF455422的同源性为99 与2株 类尖孢镰刀菌 F oxysporum AY18989EY DQ452450的同源性为92 而与2株茄病镰刀菌 F solani 的同源性仅为83 根据Taylor 2000 等概述的用PSR Phylogenetic Species Recognition 作为鉴定真菌种的 标准和Renske Landeweert 2003 的丝状真菌分子分类原则 即通过菌株的即对菌株的ITS区域比对 丝 状真菌在种间 种内遗传距离上有差异 序列相似性 99 鉴别为相同种 因此 供试菌株的鉴定结 果应为串株镰刀菌串珠镰刀菌 F verticillioides 该结果与传统形态鉴定结果相一致 6 AB237662 AF455422 Fm B 1 1 030221 AY188919 DQ452450 AM412635 DQ094733 100 100 100 99 92 83 100 80 95 90 85 图图 7 rDNA ITS 区段区段 PCR 扩增凝胶电泳图扩增凝胶电泳图 M mark 1 供试菌株供试菌株 Fig 7 The electrophoresis of ITS PCR M mark 1 tested isolation 图图 8 分离菌株及来自分离菌株及来自 GenBankGenBank 的镰刀菌属不同种的的镰刀菌属不同种的 rDNA ITS 序列构建的序列构建的 N J 系统发系统发 育树育树 Fig 8 The N J phylogenetic tree based on ITS sequences of Fusarium strains download from GenbankGenBank 2 4 串珠镰刀菌在斑叶露兜树植株体内的分布 试验结果见图试验结果见表 1 串珠镰刀菌在斑叶露兜树植株体内的数量分布因植株部位和病情不同 而有明显差异 就分离的部位而言 茎部的含菌量最大 其次为根部 而叶部的含菌量最少 在病株中 茎部中出现茎腐症状的茎 2 部位大约是未出现症状的茎 1 部位 图 2 所示 的含菌量的 12 倍 分别为 1 47 105 cfu g 1鲜重和 1 23 104 cfu g 1鲜重 根部中的有褐变的根 2 部位的含菌量为 3 328 103 cfu g 1 比正常的根 1 部位的含菌量高出近 6 倍 但所取的叶 1 与叶 2 两个部位的含菌量无明显差异 在 33 47 cfu g 1之间 在健株中 茎 1 与茎 2 部位间无明显差异 含菌量均为含菌量在为 3 215 3 19 103 cfu g 1cfu g 1之间 叶 1 与叶 2 两个部位的含菌量也无明显差异 在 42 44 cfu g 1之间 但根部中的有褐变的 根 2 部位的含菌量为 6 33 28 103 103 cfu g 1 比正常的根 1 部位的含菌量高出近 18 倍 就病株与无症株 间的平均含菌量比较而言 前者是后者的 23 倍 表 1 不同发病级别斑叶露兜树植株内串珠镰刀菌的分布状况 Tab 1 Distributions of F verticillioides inside Veitch s Screw Pine plants 含菌量 cfu g 1 鲜重 The amount of F verticillioides cfu g 1 取样部位 Site of samples无症株 Asymptomatic plant 病株 Symptomatic plant 根部 1 Root 13 50 105 47 102 根部 2 Root 26 29 1023 28 103 茎部 1 Stem 13 15 1031 23 104 茎部 2 Stem 23 19 1031 47 105 叶部 1 Leaf 14 40 103 30 10 叶部 2 Leaf 24 20 104 70 10 含菌量 cfu g 鲜重 The amount of cfu g 无症株 Asymptomatic plant病株 Symptomatic plant 根部 1 Root 1350 10547 根部 2 Root 26293284 茎部 1 Stem 1315312307 700 bp Comment MS4 这是结果的复述 不是讨论 7 茎部 2 Stem 23194146666 叶部 1 Leaf 14433 叶部 2 Leaf 24247 3 讨论 斑叶露兜树茎腐病的相关病原菌未见报道 本文利用常规鉴定与分子鉴定相结合的方法 明确其病 原菌为串珠镰刀菌 F moniliforme 有性态为 Gibberella fujikuroi 串珠镰刀菌能够侵染十几个科的植物 是世界范围内危害较严重的动植物病原真菌之一 李明等 2000 斑叶露兜树具有较高的经济与观赏 价值且已发现串珠镰刀菌能在该植株上造成严重为害 因此 明确其病原菌具有重要的理论意义 也为 该病害的防治提供依据 在实际生产中发挥控制病害发生和减少经济损失的作用 同时 本文也对串珠镰刀菌在斑叶露兜树的侵染位点与分布状况进行了研究 类似的研究在瓜类与 茄科作物上的尖孢镰刀菌方面研究较多 Beckman 1987 王建明 等 1993 黄素芳 等 2004 林抗美 等 2004 而在串珠镰刀菌方面未见报道 据报道 病原菌的侵染过程 占领空间 吸收营养 生长发 育 产生繁殖体扩张发展的功能过程 不但体现了病原菌与寄主 环境条件的相互作用 而且与病害 流行过程是紧密关联 互为里表 王子迎 2000 因此 研究串珠镰刀菌在斑叶露兜树植株体内的侵 入 侵染扩展与分布能为生产中的病害防治提供重要的依据 本研究的结果表明 串珠镰刀菌在该植株 体内的数量分布因植株部位和病情不同而有明显差异 就不同部位分离结果而言 串珠镰刀菌侵染斑叶 露兜树很可能是从植株根部侵入 侵入后导致根和茎基部维管束变褐色 并引近土面部位茎腐 通过对 根部及茎部无症状部位与有明显症状部位的分析发现 有明显症状的部位含菌量比无症状部位高出 6 倍 以上 说明串珠镰刀菌侵染植株造成的主要症状为根 茎褐变腐烂 就病株与无症株间的平均含菌量比 较而言 前者是后者的 23 倍 说明引起植株表现病症需要累积一定的含菌量 针对串珠镰刀菌侵染斑叶 露兜树的特性 结合其的生长方式一般以盆景或在观赏场所种植 其生长特性为喜阴植物 适宜生长温 度为 18 32 增加了病原菌的侵害机会 因此 需对育苗或移植的土壤进行适当的消毒处理 并保证 其生境通风良好 斑叶露兜树为常绿观赏植物 在公园 居住区 厂区 医院和其他公共场所阴性环境的美化绿化上 有着其他植物难以替代的重要作用 因其为喜阴植物 所以易受病原菌的侵染 有报道其在高温高湿 通风透气不良的情况下 易发生叶斑病 胡一民 2003 而关于斑叶露兜树茎腐病的病原菌的研究未 见报道 本研究中从福建建新花卉基地采集的斑叶露兜树病株的根茎叶均可受到不同程度的感染 根部 主要为变色腐烂 土表上部茎则变色且凹陷 严重时病斑上出现白色的菌丝体 受害的叶片开始出现零 星褐色病斑 发病后期叶片枯萎 采用常规病原菌分离方法 Booth 镰刀菌鉴定方法及菌株的 rDNA ITS 序列分析比对 确定斑叶露兜树茎腐病的病原菌为串珠镰刀菌 F verticillioidesF moniliforme 有性态为 Gibberella fujikuroi 串珠镰刀菌能够侵染十几个科的植物 是世界范围内危害较严重的动植物病原真 菌之一 李明等 2000 有关尖孢镰刀菌在植株体内的扩展动态或分布已有较多的研究报道 Beckman 1987 王建明 等 1993 黄素芳 等 2004 林抗美 等 2004 而关于串珠镰刀菌在植株体内的侵染与分布还未见相关报 道 因此研究串珠镰刀菌的侵入 侵染扩展与分布具有重要的理论意义 能为生产中的病害防治提供重 要的理论依据 通过体内病原菌单菌落分析 串珠镰刀菌在斑叶露兜树植株体内的数量分布的研究结果 表明 含菌量因植株部位和病情不同而有明显差异 就分离的部位而言 茎部的含菌量最大 且近地面 处的茎部易形成茎腐 其次为根部 叶部的含菌量最少 在叶片上易造成零星褐色病斑 串珠镰刀菌侵 染斑叶露兜树很可能是从植株根部侵入 侵入后导致根和茎基部维管束变褐色 并引近土面部位茎腐 通过对根部及茎部无症状部位与有明显症状部位的分析发现 有明显症状的部位含菌量比无症状部位高 8 出 6 倍以上 说明串珠镰刀菌侵染植株造成的主要症状为根褐变及茎褐变腐烂 就病株与无症株间的平 均含菌量比较而言 前者是后者的 23 倍 说明引起植株表现病症需要累积一定的含菌量 针对串珠镰刀 菌侵染斑叶露兜树的特性 结合其的生长方式一般以盆景或在观赏场所种植 其生长特性为喜阴植物 适宜生长温度为 18 32 增加了病原菌的侵害机会 因此 需对育苗或移植的土壤进行适当的消毒处 理 并保证其生境通风良好 References Beckman C H 1987 The Nature of Wilt Disease of Plant American Phytopathological Society St Paul MN Booth C 1971 The Genus Fusarium Commonwealth Mycological Institute Kew England Fang Zhong da 1998 Methology for Plant Pathology Beijing China Agricultural Press in Chinese 方中达 1998 植病研究方法 北京 中国农业出版社 Hu Yi ming Pandanus veitchi 2003 Flowers Trees Potted Landscape huahui yuanyi 1 20 21 胡一民 2003 斑叶露兜树 花木盆景 花卉园艺 1 20 21 in Chinese Huang Su fang Zhu Yu jing Xiao Rong feng Liu Bo Su Ming xing Zhou Han tao 2004 Identification of capsicum wilt pathogen and its dDdistribution inside the plants Journal of Xiamen University Natural Science 43 Supplement 71 73 in Chinese 黄素芳 朱育菁 肖荣凤 刘波 苏明星 周涵韬 2004 辣椒枯萎病原菌分离鉴定及其在植株体内的分布 厦门大学学报 自然科学版 43 增刊 71 73 Li Ming Qian Yue zhen Yang Xue jign Wang Ke rong 2000 Vegetative compatibility of Fusarium moniliforme Journal of Nanjing Agricultural University 23 2 3l 34 in Chinese 李 明 钱月珍 杨雪静 王克荣 2000 串珠镰刀菌的营养体亲和性研究 南京农业大学学报 23 2 31 34 49 Lin Kang mei Xiao Rong feng Liu Bo Shi Huai Xie Guan lin 2004 Distribution of Fusarium Pathogen Inside the Tissue tissue of the melon and Its its Microbiological microbiological characteristics Journal of Xiamen University Natural Science 43 Supplement 63 66 in Chinese 林抗美 肖荣凤 刘 波 史 怀 谢关林 2004 甜瓜枯萎病原菌的微生物学特性及其在植株体内分布 厦门大学学报 自然科学版 43 增刊 63 66 Renske L Paula L Thomw K Molecular Identification of Ectomycorrhizal Mycelium in Soil Horizons J Applied and Environmental Microbiology 2003 69 1 327 333 Taylor JW Jacobson DJ Kroken S Kasuga T Geiser D M Hibbett DS Fisher MC 20002 Phylogenetic species recognition and species concepts in fungi Fungal Genetics and Biology 31 21 32 Wang Jian ming Zheng Jing wu He Yun chun Li Zhi gang 1993 A study on the existing form number of distribtion and fluctuation laws of Fusarium oxysporum f sp niveum watermelon plant Scientia Agricultura Sinica 26 3 69 74 in Chinese 王建明 郑经武 贺运春 李志岗 1993 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cavendishii imported into Japan from Mazanillo Colima Mexico Morphological features of the isolates were described and illustrated and their pathogenicity to banana was determined Morphological and molecular phylogenetic analyses revealed that these isolates were assignable to F verticillioides However constant production of septate aerial conidia in chains by the banana isolates distinguished these strains from previous descriptions of this species Morphological examination of the isolates revealed that they are consistent with Wollenweber s original concept of F moniliforme var minus The effect of blacklight illumination on conidial production by these isolates was also tested Black light stimulated production of sporodochial conidia of all banana isolates and had a positive effect on conidial length Database AGRICOLA Score Accession Number IND43827299 Author Patino B Mirete S Vazquez C Jimenez M Rodriguez M T Gonzalez Jaen M T Title Characterization of Fusarium verticillioides strains by PCR RFLP analysis of the intergenic spacer region of the rDNA Source Journal of the science of food and agriculture 2006 Feb 86 3 p 429 435 Abstract Thirty three Fusarium verticillioides strains from diverse origins and hosts have been analysed for fumonisin production and characterized in order i to detect the variability present in this species and ii to discriminate among isolates The method used was a combination of polymerase chain reaction PCR and restriction fragment length polymorphism 10 RFLP generated by restriction endonucleases applied to the IGS region intergenic spacer of rDNA All the F verticillioides strains associated with crops produced fumonisins B1 and B2 except those isolated from banana Analysis of the IGS region by PCR RFLP proved to be useful to detect variability within F verticillioides and allowed discrimination of two related groups of isolates belonging to distinct lineages differing in fumonisin production and host preferences the fumonisin producing group associated with cereals and the fumonisin non producing group associated with banana The method used facilitates early detection and characterization of F verticillioides strains required to control both types of pathogens and to evaluate plant exposure to the toxin quality of the raw material to be processed and the potential fumonisin contamination in order to prevent fumonisins entering the food chain Database AGRICOLA Score Accession Number IND23335030 Author Torres A M Ramirez M L Arroyo M Chulze S N Magan N Title Potential use of antioxidants for control of growth and fumonisin production by Fusarium verticillioides and Fusarium proliferatum on whole maize grain Source International journal of food microbiology June 25 2003 83 3 p 319 324 Abstract The effect of interactions between two food grade antioxidants butylated hydroxyanisole BHA and propyl paraben PP 100 200 500 micrograms g 1 and water activity a w 0 995 0 98 0 95 of irradiated maize on lag phase prior to growth growth rate and fumonisin production by Fusarium verticillioides and Fusarium proliferatum was evaluated at 25 degrees C Both antioxidants had an effect on growth characteristics and fumonisin production However this was dependent on the dose used and the a w treatment At 500 micrograms g 1 BHA and PP increased the lag phase prior to growth and reduced the growth rate of both Fusarium species significantly especially at 0 95 a w Both antioxidants significantly reduced the production of fumonisin by both Fusarium species especially at 0 98 and 0 95 a w These results suggest that these antioxidants have potential for treatment of maize grain for controlling growth of these mycotoxigenic species and prevent fumonisin accumulation Database 11 AGRICOLA Score Accession Number IND23311112 Author Torres M R Ramos A J Soler J Sanchis V Marin S Title SEM study of water activity and temperature effects on the initial growth of Aspergillus ocharaceus Alternaria alternata and Fusarium verticillioides on maize grain Source International journal of food microbiology Mar 25 2003 81 3 p 185 193 Abstract A scanning electron microscopy SEM study of the effect of water activity aw temperature and fungal interactions on the very early phases of Aspergillus ochraceus Alternaria alternata and Fusarium verticillioides development on maize grains was carried out Germination and growth of individual fungal strains were assayed at 0 92 0 95 and 0 98 aw and 20 and 30 degrees C Hyphal lengths were measured on micrographs taken by SEM at different periods of incubation A alternata had the highest linear growth at 0 98 aw and was the only species able to grow under all conditions tested whereas A ochraceus was not able to germinate at 0 92 aw at any temperature assayed F verticillioides demonstrated a different behaviour depending on growth temperature Fungal interactions were studied at 0 95 aw and 30 degrees C A ochraceus germination was inhibited when it was coinoculated with one or two of the other species A alternata showed an in