MSH6在子宫内膜癌中的种系突变情况及特征荟萃分析.doc

MSH6在子宫内膜癌中的种系突变情况及特征荟萃分析【摘要】目的 了解错配修复基因MSH6在子宫内膜癌人群中的种系突变频率及特征，提供真正的突变热点。方法 收集1997-2008年国内外公开发表的有关文献进行评述，提取信息，并进行统计学分析。结果 MSH6在子宫内膜癌总人群中的突变频率为9.77%;置换突变和移码突变为主要突变类型，突变频率均为1.70%;外显子4为主要突变部位，突变频率为3.69%;携带MSH6突变的子宫内膜癌患者发病的平均年龄为(54.82.8)岁。结论 错配修复基因MSH6在子宫内膜癌人群中的突变率较高，突变种类以置换突变和移码突变为主，外显子4是主要突变部位，携带突变者发病年龄较晚。 【关键词】 子宫内膜肿瘤; 基因; 突变【Abstract】 Objective To explore germline mutation frequencies and features of mismatch repaired gene MSH6 in persons with different kinds of endometrial cancer. Methods The papers about MSH6 mutations were reviewed and information was derived from studies published between 1997 and 2008, data were analyzed by statistical methods. Results MSH6 mutation in all endometrial cancer patients was 9.77%; Substitute mutation and frameshift mutation were the main types of the mutation, and each mutation frequency was 1.70%; exon 4 was the main mutable site, and the mutation frequency was 3.69%; the mean age at onset of MSH6 mutation carriers was (54.82.8) years old. Conclusions The mutation frequencies of MSH6 in persons with different kinds of endometrial cancer were higher; substitute mutation and frameshift mutation were the main types of the mutation, exon 4 was the main mutable site, the mean age of onset was higher.【Key words】 Endometrial neoplasms; Gene; Mutation子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)是妇科最常见的恶性肿瘤之一，占女性生殖道恶性肿瘤的20%30%，多见于绝经后妇女，以腺癌为主1，平均发病年龄63.1岁，75%的患者在50岁后发病，年轻妇女患EC的比例为2%14%。在过去几十年里，其发病率在发达国家和发展中国家逐年上升2。子宫内膜癌是遗传性非息肉型结直肠癌(hereditary nonpolyposis colorectol cancer,HNPCC)家族中最常见的肠外肿瘤之一3，HNPCC突变者中子宫内膜癌的累积发病率很高，约有22%43%4，患HNPCC的女性有40%60%患子宫内膜癌终生风险5。Goodfellow等6的研究显示，错配修复基因,尤其是MSH6的突变与子宫内膜癌的发生有密切关系。MSH6基因位于2p15，作用是纠正碱基错配以及小片段插入和缺失，Akiyama等71997年首次报道人类生殖细胞MSH6突变。已发表的研究由于受到样本量等条件的限制，很难得出该基因的突变频率以及由于该基因突变而具有的一些特征;另一方面，以往有关基因的突变热点往往根据发表研究的数量而定，而真正的突变热点应为不同研究对象的突变频率。因此，本文综合分析近几年的研究成果，以期获得MSH6在子宫内膜癌中的突变频率、突变热点以及发病特点，为制定监测策略提供准确信息和依据。1 材料与方法1.1 资料来源以MSH6,GTBP,HSAP,HNPCC5,MMR和endometrial cancer为关键词，在Medline，Highwire press，Ovid，SCI，EMBASE，Springer，Free Medical Journals，PNAs，Web of science等数据库中检索1997年(MSH6基因突变于1997年在人类首次报道)至2008年公开发表的文章，并获得全文。1.2 资料入选标准(1)1997-2008年间在国内外发表的独立文章;(2)研究对象是子宫内膜癌患者;(3)研究内容涉及到错配修复基因MSH6突变频率;(4)检测样本为外周血或癌旁正常组织;(5)文献报道了错配修复基因MSH6种系突变;(6)有关MSH6突变的个案报道予以剔除;(7)对于重复报告文献采用最近或最大数据的文献。1.3 相关定义说明(1)有家族史：三级直系亲属以内有子宫内膜癌相关肿瘤的家族史(包括典型HNPCC，即符合Amsterdam 标准、8;非典型HNPCC，即有肿瘤家族史，但不符合Amsterdam标准);(2)散发子宫内膜癌：三级直系亲属以内没有肿瘤家族史;(3)发病年龄：患者为异时性子宫内膜癌时，发病年龄为首发年龄;先证者多个家属亦患子宫内膜癌且携带错配修复基因MSH6种系突变时，发病年龄为平均年龄。1.4 数据的提取信息记录侧重于MSH6基因的突变部位、突变种类、发病年龄。1.5 统计分析全部突变频率数据用SPSS 13.0软件进行统计分析。异质性及发表偏倚分析用Comprehensive Meta Analysis(Version 2)分析，I2≤30%异质性小，I230%异质性较大。2 结果2.1 文献基本情况共13篇文献纳入分析，病例总数为768例，其中单发子宫内膜癌711例，子宫内膜癌合并大肠癌57例;266例有家族史，散发子宫内膜癌169例，其余333例家族史不详。文献见表1。2.2 错配修复基因MSH6在子宫内膜癌患者中的突变频率MSH6在子宫内膜癌人群中的突变频率为9.77%;266例有家族史的子宫内膜癌患者中有38例发生MSH6突变，突变频率为14.29%;169例散发子宫内膜癌患者中有19人发生MSH6突变，突变频率为11.24%(表2)。2.3 子宫内膜癌患者错配修复基因MSH6突变部位部分文献未报道具体突变部位，根据已有数据显示，外显子4突变最多，为11例，突变频率为3.69%，占全部突变的57.89%，其次是外显子2、5和9(表3)。表1 纳入子宫内膜癌MSH6突变的文献基本情况表2 MSH6在不同人群的突变频率表3 不同外显子突变频率2.4 子宫内膜癌患者错配修复基因MSH6突变种类基因突变主要有两种类型，即置换突变和移码突变。大部分文献(647例)都研究了突变种类，结果显示11例为置换突变(置换突变包括同义、错义、无义突变，本研究中11例全部为错义突变)，突变频率为1.70%;11例为移码突变(移码突变为碱基插入和缺失的表现)，突变频率也为1.70%;置换突变和移码突变都占了全部突变的50.00%。2.5 携带MSH6突变的子宫内膜癌患者年龄分析在13篇文献中，有9篇显示了具体的年龄分布，发病年龄在1980岁之间。携带MSH6突变的子宫内膜癌患者发病平均年龄为(54.82.8)岁;而携带MLH1或MSH2突变的患者发病平均年龄为(48.06.5)岁。可见，携带MSH6突变的子宫内膜癌患者发病年龄比携带MLH1或MSH2突变的子宫内膜癌患者晚(P0.001)。2.6 异质性和发表偏倚分析对13篇文献进行Meta分析，显示I2=61.360%，异质性较大(图1);漏斗图分析显示存在发表偏倚(图2)。注：Q=31.056,P0.001,I2=61.360%。图1 子宫内膜癌中MSH6突变频率Meta分析森林图图2 子宫内膜癌中MSH6突变频率Meta分析漏斗图3 讨论近年来，MSH6基因在染色体2p15的突变被认为是非典型HNPCC发生的主要原因21，在HNPCC家族中，约5%10%有MSH6突变22，而子宫内膜癌的累积发病率也很高，大约是22%43%。Plaschke等23的研究表明，MSH6在家系的突变频率为1%2%;而Goodfellow等6的研究结果突变率为23%。以上均是单一文章，由于受到样本量的限制，结果可能不稳定。本研究综合分析了近几年的研究，发现MSH6在子宫内膜癌总人群中的突变频率为9.77%，在有家族史的子宫内膜癌患者中的突变频率为14.29%，在散发子宫内膜癌人群中的突变频率为11.24%，三者的突变频率与Goodfellow和Plaschke的结果比较则差距较大，可能由于种族差异所致，本研究包括了多个种族，是一个平均水平。MSH6有10个外显子，cDNA全长约4.3 kb，其中外显子4长约2.8 kb。研究结果显示，在显示了具体的突变部位的患者中，外显子4突变最多，为11例，突变频率为3.69%，占全部突变的57.89%，其余外显子突变频率较低或未报道。研究发现突变位置较为分散，并未发现突变热点，需进一步研究。MSH6蛋白通过与MSH2蛋白结合形成二聚体来发挥作用的，主要修复碱基错配、插入和缺失。而二聚体MSH3MSH2的功能与前者有重复，主要修复碱基插入和缺失24。本研究中，在647例显示了突变种类的患者中，11例为置换突变，11例为移码突变，突变频率均为1.70%，故本研究认为置换突变和移码突变为主要突变类型。同样，受到样本量的限制，还需进一步研究。另外，癌症发病年龄的延迟也是MSH6突变者的特征25。Cederquist的研究显示，携带MSH6突变的子宫内膜癌患者发病的平均年龄(58岁)比携带MLH1或MSH2平均年龄(49岁)高17。本研究结果显示携带MSH6突变的子宫内膜癌患者发病的平均年龄为54.8岁，比Cederquist等17的结果稍低，原因可能是种族差异、样本量等。 在本Meta分析中，发表偏倚较大，且存在异质性。这可能是如下一个或多个因素引起的：不同的研究设计(部分研究以检出新突变为主，部分研究根据突变类型为基因诊断和咨询提供依据)和样本大小;不同的突变检测方法：直接测序检测突变的有9篇(69%)，变性梯度凝胶电泳法(DGGE)检测突变的有3篇，聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SSCP)检测突变的有1篇;部分文献的数据详细信息缺失。一个Meta分析的结果比单个的研究结果更可靠，可以对MSH6在子宫内膜癌的突变频率有个更全面的认识。但是Meta分析的缺点也不能忽略：关于MSH6在子宫内膜癌中的突变频率的研究相对较少，关于携带MSH6突变的子宫内膜癌患者的年龄介绍的文献更少;异质性较大。尽管有这些缺点，但本次研究结果还是有统计学意义的，而且也得出了比较重要的结论：MSH6在子宫内膜癌人群中的突变频率为9.77%;外显子4突变频率最高;携带MSH6突变的子宫内膜癌患者发病的平均年龄(54.82.8)岁比携带MLH1或MSH2突变的患者发病平均年龄(48.06.5)岁晚，差异有统计学意义。【参考文献】 1 曹云霞，刘华英. 子宫内膜癌高危因素研究及诊治进展 J. 疾病控制杂志， 1997,28(2):139140.2 Creasman WT, Odicino F, Maisonneuve P, et al. 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