课件：诊断——临床常用免疫学检查.ppt

2019/8/21,1,临床常用免疫学检查,临床常用免疫学检查 Immunological tests,2019/8/21,临床常用免疫学检查,2,临床常用免疫学检查,免疫功能检查 (immunological function) 血清免疫球蛋白检测 血清补体检测 细胞免疫检测(immunoglobulin, complements, cell immune) 自身免疫检测 (auto-antibodies) 类风湿因子测定 抗核抗体检测 组织和细胞抗体检测 (RF ANA other antibodies) 感染免疫检测 (infectious immunology) 细菌感染免疫检测 病毒感染免疫检测 其它(寄生虫感染、性病等）(bacterial , virus and so on ) 肿瘤标志物检测 (tumor markers) 蛋白质类肿瘤标志物 糖脂类肿瘤标志物 酶类肿瘤标志物(proteins, glycolipid, enzymes markers) 器官与骨髓移植的检测 (organ and bone marrow transplantation) 病毒肝炎血清标志物 (virus hepatitis markers) 其它 循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测,2019/8/21,临床常用免疫学检查,3,免疫功能检查 (immunological function),血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test) 血清补体检测 (Complements) 细胞免疫检测 (Cell immune),2019/8/21,临床常用免疫学检查,4,Immunoglobulin,概念：具有抗体活性和抗体样结构的球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。 分类: 用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类： IgG、IgA、IgM、 IgD 、 IgE,2019/8/21,临床常用免疫学检查,5,Immunoglobulin,2019/8/21,临床常用免疫学检查,6,2019/8/21,临床常用免疫学检查,7,2019/8/21,临床常用免疫学检查,8,IgG最多、占75%85%抗体活性 IgA血清型和分泌型两种 IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子。最早；最先 IgD功能尚不完全清楚 IgE与变态反应有关(0.002%),2019/8/21,临床常用免疫学检查,9,2019/8/21,临床常用免疫学检查,10,ADCC,normal range,2019/8/21,临床常用免疫学检查,11,2019/8/21,临床常用免疫学检查,12,多克隆(Polyclonal)增高: IgG IgA IgM均增高 单克隆(Monoclonal)增高: 仅某一种Ig增高而其他种不增高,2019/8/21,临床常用免疫学检查,13,增高： 多克隆性增高(polyclonal elevate) 慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病 (chronic infection, chronic hepatitis, AID) 单克隆性增高(monoclonal elevate) 免疫增殖性疾病 ( proliferative disease),增高临床意义,增高临床意义,2019/8/21,临床常用免疫学检查,14,2019/8/21,临床常用免疫学检查,15,M蛋白（Monoclonal protein）,概念：单克隆B淋巴细胞异常增殖产生免疫球蛋白，具有相同结构和电泳迁徙速度，但不具有抗体活性。,M蛋白临床意义,2019/8/21,临床常用免疫学检查,16,2019/8/21,17,临床常用免疫学检查,2019/8/21,临床常用免疫学检查,18,减低： 先天性(congenital) 体液免疫缺陷和联合免疫缺陷（先天性无（低）丙种球蛋白血症等） 获得性(acquired) 肾病综合征（大量流失蛋白）、淋巴网状系统肿瘤、病毒感染、免疫抑制剂应用,减低临床意义,2019/8/21,临床常用免疫学检查,19,immunological function,血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test) 血清补体检测(Complements) 细胞免疫检测 (Cell immune),2019/8/21,临床常用免疫学检查,20,Compleme,2019/8/21,临床常用免疫学检查,21,血清补体（complement,C）,组成：由传统途径的9种成分c1（c1q 、c1r 、c1s ）c9,旁路途径的3种成分及其衍生物B、D 、 P 、H 、I等因子组成。 作用：参与灭活病原体的免疫反应，也可破坏自身组织或自身细胞造成免疫损伤,2019/8/21,临床常用免疫学检查,22,2019/8/21,临床常用免疫学检查,23,total hemolytic complement activity CH50 正常值：50100 ku/L 临床意义 ： 减低 1.先天性 2.合成减少 hepatitis ,营养不良 3.消耗或者丢失过多 SLE 增高急性炎症、组织损伤、某些肿瘤等。,2019/8/21,临床常用免疫学检查,24,补体C3检测 C3在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路途径被激活的关键物质。 正常值：0.851.7g/L 补体C4检测 C4代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用 。 正常值：0.220.34g/L,2019/8/21,临床常用免疫学检查,25,参见CH50减低和增高的临床意义 C3增高在急性炎性反应更敏感 C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低更有意义,临床意义,2019/8/21,临床常用免疫学检查,26,immunological function,血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test) 血清补体检测(Complements) 细胞免疫检测 (Cell immune),2019/8/21,临床常用免疫学检查,27,细胞免疫检测(Cell immune) T细胞免疫检测 B细胞免疫检测 自然杀伤细胞检测(NK cell) 细胞因子检测(cytokine),2019/8/21,临床常用免疫学检查,28,T细胞分化抗原测定 (免疫荧光法;流式细胞） CD3总T细胞 正常值： 69.4%4.86% CD4T辅助细胞（TH） 正常值： 41.17%5.28% CD8T抑制细胞（TS） 正常值： 24.58%4.02% CD4 /CD8 2.20.7/1,流式细胞仪检测T细胞亚群,2019/8/21,临床常用免疫学检查,30,临床意义： CD4降低病毒感染（CMV,HIV,HBV) CD4/ CD8增高恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、排异反应 CD4/ CD8减低见于艾滋病(HIV)、恶性肿瘤、传单及乙肝急性期。 CD3 CD4 CD8均增高T细胞型淋巴细胞恶性疾病 (T lymphocytes malignant disease),B细胞分化抗原测定： 应用CD19、CD20、 CD21 、 CD22 和CD40等单克隆抗体标记单个核细胞B细胞，通过免疫荧光或流式细胞术进行检测。 CD19 为全部B细胞共有的表面标志，B细胞活化后不消失，是最重要的B细胞标记分子。 CD22 为成熟B细胞的表面标志。 参考值：CD19 11.743.73 %,临床意义 升高B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、Burkitt淋巴瘤等 减低无丙种球蛋白血症、长期免疫抑制剂应用后,2019/8/21,临床常用免疫学检查,33,自然杀伤细胞免疫检测 自然杀伤细胞（NK）介导天然免疫应答，它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞 自然杀伤细胞（NK）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一,2019/8/21,临床常用免疫学检查,34,细胞因子检测,细胞因子（cytokine）是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的，介导和调节免疫、炎症反应的小分子多肽。 IL-2、IL-6、IL-8、IL-10和TNF、IFN,2019/8/21,临床常用免疫学检查,35,临床常用免疫学检查,免疫功能检查 自身免疫检测 肿瘤标志物检测 感染免疫检测 (infectious immune) 器官与骨髓移植的检测 病毒肝炎血清标志物 其它,2019/8/21,临床常用免疫学检查,36,自身免疫检测,类风湿因子测定 抗核抗体检测 组织和细胞抗体检测,2019/8/21,临床常用免疫学检查,37,RA,2019/8/21,临床常用免疫学检查,38,rheumatoid factor,RF,概念： RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。 分型：可分为IgM型、IgG型、IgA型等，用胶乳凝集法测出的主要是IgM型，速率散射比浊检测准确定量分析，用ELISA法可检出其它型。,2019/8/21,临床常用免疫学检查,39,RF-IgG RF-IgA RF-IgM,2019/8/21,临床常用免疫学检查,40,参考值： 阴性 30 U/L 临床意义： 1、类风湿关节炎(RA)（阳性率79.6%）；与疾病活动有关 2、其它自身免疫性疾病（SLE、SS等） 3、慢性肝病、慢性感染性疾病 4、健康人3%至5%阳性,rheumatoid factor,RF,RF分型意义,2019/8/21,临床常用免疫学检查,41,2019/8/21,临床常用免疫学检查,42,auto-immune test,Rheumatoid factor Anti-Nuclear Antibody tissue and cell antibody,2019/8/21,临床常用免疫学检查,43,SLE,系统性红斑狼疮：手背和甲周红色皮疹,白细胞管型,红细胞管型,心包炎,2019/8/21,临床常用免疫学检查,47,抗核抗体检测 抗核抗体（antinuclear antibody,ANA） 抗核抗体是泛指抗各种细胞核成分的自身抗体的总称（ANAS），这种抗体无器官和种族的特异性。,2019/8/21,临床常用免疫学检查,48,Immunofluorescence assay 以鼠肝细胞核或人喉癌细胞（Hep-2细胞）作抗原时该抗体（1抗）可与之结合，再加入荧光标记抗人IgG（2抗）后可产生黄绿色荧光。,2019/8/21,临床常用免疫学检查,49,2019/8/21,临床常用免疫学检查,50,根据细胞核着染荧光的图像可分为: 均质型 DNP核蛋白 核膜型 DNA 斑点型 ENA 核仁型 RNA,2019/8/21,临床常用免疫学检查,51,抗核抗体：均质型(diffused),抗DNP, 抗组蛋白抗体，抗DsDNA,2019/8/21,52,可编辑,2019/8/21,DsDNA,53,抗核抗体：核膜型(spherical),2019/8/21,抗核糖体核蛋白颗粒,54,抗核抗体：斑点型(speckled),2019/8/21,RNA,55,抗核抗体：核仁型(nucleolus ),2019/8/21,临床常用免疫学检查,56,参考值： 免疫荧光法为阴性 血清滴度1：100为阳性,2019/8/21,临床常用免疫学检查,57,临床意义： 1、ANA阳性最多见于未治疗的SLE，阳性率达80%100%（活动期几乎100%阳性） 2、ANA阳性是结缔组织病的标志，是SLE最佳筛选试验。 3、其它疾病,如原发性胆汁性肝硬化(Primary biliary cirrhosis)、慢性肝病、慢性感染、肿瘤等也可出现阳性,ANA荧光图形临床意义,2019/8/21,临床常用免疫学检查,58,2019/8/21,临床常用免疫学检查,59,2.抗脱氧核糖核酸抗体 （anti-DNA antibody） 其中抗双链DNA（double stranded-DNA,ds-DNA）抗体的靶抗原是细胞核中的DNA双螺旋结构，识别双碱基对的DNA。 正常结果：阴性 临床意义： 1. 为SLE特异性抗体(Specific antibody for SLE)，特异性率95%100%；敏感性30-50%。 2.与活动程度相关 3.特别在并发狼疮性肾炎时起重要作用。 4.其它风湿病中抗ds-DNA抗体也可阳性。,2019/8/21,临床常用免疫学检查,60,3.可提取性核抗原多肽抗体谱 ENA（extractable antinuclear antigen）由多种相对分子质量不同的多肽构成，利用免疫印迹试验可对这些抗原的自身抗体进行检测，目前已经发现20余种。,2019/8/21,临床常用免疫学检查,61,ENA抗体谱,2019/8/21,临床常用免疫学检查,62,SS,2019/8/21,临床常用免疫学检查,63,SS,SS,2019/8/21,临床常用免疫学检查,64,SSA SSB,2019/8/21,临床常用免疫学检查,65,SSC,Scl-70,Raynaud Phenomenon,皮肤色素沉着和脱色,面部毛细血管扩张,皮肤钙化,SSC,2019/8/21,临床常用免疫学检查,74,PM/DM,Jo-1,2019/8/21,临床常用免疫学检查,75,特征性皮肌炎皮疹,掌指关节和近端指间关节伸侧出现萎缩性 丘疹和斑疹，伴少量鳞屑，称Gottron征,2019/8/21,临床常用免疫学检查,81,auto-immune test,*Rheumatoid factor *Anti-Nuclear Antibody *tissue and cell antibody,2019/8/21,临床常用免疫学检查,82,组织和细胞抗体检测 抗线粒体抗体（anti-mitochondria antibody,AMA） 抗甲状腺球蛋白抗体（anti-thyroglobulin antibody,TG） 抗甲状腺微粒体抗体（anti-thyroid mivrosome ntibody,TM） 抗平滑肌抗体（antismooth muscle antibidy,ASMA）等 如AMA、ASMA在原发性胆汁性肝硬化、慢性肝病、自身免疫性肝炎中常为阳性,2019/8/21,临床常用免疫学检查,83,2019/8/21,临床常用免疫学检查,84,临床常用免疫学检查,免疫功能检查 自身免疫检测(auto-immune) 感染免疫检测 肿瘤标志物检测 器官与骨髓移植的检测 病毒肝炎血清标志物 其它,2019/8/21,临床常用免疫学检查,85,感染免疫检测,（一）血清抗链球菌溶血素“O” （anti-streptolysin“O”，ASO） A组溶血性链球菌的荚膜抗原代谢产物链球菌溶血素“O”具有溶血活性，能溶解人类和一些动物的红细胞。 将受检病人血清倍比稀释后，加入一定量的链球菌溶血素“O”，如病人血清中含有抗体（ASO），即能使链球菌溶血素“O”失去溶血能力，不溶血的管数越多表示ASO的效价越高。 参考值：胶乳凝集法为阴性 100IU/L,2019/8/21,临床常用免疫学检查,86,临床意义： 当机体受A组溶血性链球菌感染后23周，血清中即出现抗链球菌溶血素“O”的抗体，这种抗体滴度直至病愈后数月到半年才下降至正常水平 ASO升高常见于活动性风湿热、风湿性关节炎、急性肾小球肾炎等 假阳性见于高胆固醇血症、黄疸、溶血等,2019/8/21,临床常用免疫学检查,87,Annular erythema,2019/8/21,临床常用免疫学检查,88,Subcutaneous nodules,2019/8/21,临床常用免疫学检查,89,Heart valve damage,2019/8/21,临床常用免疫学检查,90,（二）伤寒和副伤寒Typhoid and paratyphoid 沙门菌免疫测定-肥达反应（Widal reactin WR） 人体被伤寒沙门菌感染后，菌体“O”抗原和鞭毛“H”抗原能刺激人体产生相应抗体。 副伤寒杆菌分甲、乙、丙三型 参考值：伤寒WR“H” 1：160；“O” 1：80； 副伤寒WR甲、乙、丙均 1：80,2019/8/21,临床常用免疫学检查,91,Rose rash,2019/8/21,临床常用免疫学检查,92,临床意义： 当感染伤寒沙门菌后一周可出现阳性，第二周阳性率上升为 60% 70%，第四周可达90%以上，动态观察WR持续超过参考值，或较原效价升高4倍以上更有价值 假阳性结核病、风湿病 假阴性早期使用抗生素及免疫抑制剂治疗,2019/8/21,临床常用免疫学检查,93,临床常用免疫学检查,免疫功能检查 自身免疫检测 感染免疫检测 肿瘤标志物检测(tumor marker) 器官与骨髓移植的检测 病毒肝炎血清标志物 其它,2019/8/21,临床常用免疫学检查,94,肿瘤标志物检测,肿瘤细胞分泌的标志物：蛋白质类、糖脂类、酶类 、激素类等 宿主产生的标志物：TNF、SF 不进入循环体液的标志物：,2019/8/21,临床常用免疫学检查,95,临床常用肿瘤标志物,2019/8/21,临床常用免疫学检查,96,AFP,胎儿早期肝脏和卵黄囊合成的血清糖蛋白，当肝细胞或生殖腺胚胎细胞恶变，基因激活，细胞合成AFP增加。 参考值：20ng/ml 意义： 1：原发性肝癌的诊断与鉴别诊断，10%阴性。 2：生殖腺胚胎癌、胃癌、胰腺癌可升高。 3：动态检测原发性肝癌治疗前后病情变化 4：孕妇可升高,2019/8/21,临床常用免疫学检查,97,CEA,胎儿早期消化管和一些组织合成，孕6月后减少，出生后极低。生理上孕妇可升高。 参考值：15ng/ml