课件：免疫球蛋白细胞免疫检测肿瘤标志物.ppt

临床常用免疫学检测,李朝虹 徐医临床学院 内科诊断教研室,第一节 血清免疫球蛋白检测,概述,免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)是指一组具有抗体活性的球蛋白。 由浆细胞合成与分泌，存在于机体的血液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上。 按其功能和理化性质分IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五大类。,一、免疫球蛋白G检测,免疫球蛋白G（IgG） 为人体含量最多和最主要的Ig， 占总Ig的7080； 对病毒、细菌和寄生虫都有抗体活性； 唯一能够通过胎盘的Ig。,一、免疫球蛋白G检测,参考值：7.016.6g/L 临床意义： 1、IgG增高： 多克隆增高：即IgG、IgA、IgM均增高。 常见于慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球菌感染及自身免疫性疾病如SLE、RA。,一、免疫球蛋白G检测,临床意义： 1、IgG增高： 单克隆增高：仅有某一种Ig增高。 主要见于免疫增殖性疾病，如分泌型MM（分为IgG型、IgA型、IgD型、IgE型）,一、免疫球蛋白G检测,临床意义： 2、IgG降低： 各种先天性和获得性体液免疫缺陷病 肾病综合征：蛋白丢失 病毒感染：抑制免疫 应用免疫抑制剂患者,二、免疫球蛋白A检测,IgA分为血清型IgA与分泌型IgA（SIgA） 血清型IgA占血清总Ig的1015 SIgA在外分泌系统中有重要的免疫功能： 如呼吸道、消化道、泌尿生殖道的 感染、炎症、肿瘤,二、免疫球蛋白A检测,参考值： 血清IgA：0.73.5g/L SIgA： 唾液平均为 0.3 g/L 泪液 3080 g/L 初乳平均为 5.06 g/L 粪便平均为 1.3 g/L,二、免疫球蛋白A检测,临床意义： 1、IgA增高：IgA型MM、SLE、肝硬 化、肾脏疾病 2、IgA降低：反复呼吸道感染、非IgA型 MM、原发性和继发性免疫缺陷病,三、免疫球蛋白M检测,IgM是分子质量最大的Ig; 占血清总Ig的 510; 是有效的凝聚和溶解细胞的因子。 参考值：0.52.6g/L,三、免疫球蛋白M检测,临床意义： 1、IgM增高：初期病毒性感染、肝 硬化、RA、SLE、原发性巨球 蛋白血症。 2、 IgM降低：IgG型重链病、IgA型 MM、先天性免疫缺陷症、免疫 抑制疗法。,四、免疫球蛋白E检测,血清中最少的一种Ig; 与变态反应、寄生虫感染和过敏 反应有关。 参考值：ELISA法：0.10.9mg/L,四、免疫球蛋白E检测,临床意义： 1、IgE增高：IgE型MM、重链病、 肝脏病、结节病、RA以及各种 过敏性疾病（哮喘、荨麻疹、 寄生虫感染）。,四、免疫球蛋白E检测,临床意义： 2、IgE降低： 先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症 恶性肿瘤 应用免疫抑制剂,五、血清M蛋白检测,M蛋白又称单克隆免疫球蛋白，是一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。 参考值：阴性,五、血清M蛋白检测,临床意义： 阳性提示单克隆免疫球蛋白增殖病 MM 、 巨球蛋白血症、 重链病、轻链病、半分子病、 7S IgG病,第二节 血清补体检测,概述,补体（complement,C）是一组具有 酶原活性的糖蛋白； 补体参与灭活病原体的免疫反应； 补体也参与自身免疫损伤；,一、总补体溶血活性检测,CH50以溶血素致敏的绵羊红细胞（抗原抗体复合物）激活待测血清的C1，引起补体活化的连锁反应，最终引起绵羊红细胞溶解。 溶血程度与补体量呈正相关，为S形曲线关系。 一般以50溶血作为检测终点（ CH50 ）。,一、总补体溶血活性检测,参考值：试管法50100kU/L 临床意义：主要反映补体传统途径 活化的活性程度。 CH50增高：见于急性炎症、组织 损伤、恶性肿瘤。,一、总补体溶血活性检测,临床意义： CH50减低：更有意义。 见于各种免疫复合物性疾病， 如肾小球肾炎、自身免疫性疾病 （SLE）、感染性心内膜炎、病毒 性肝炎和慢性肝病。,三、补体C3检测,补体C3是一种由肝脏合成的2球蛋白，由和两条多肽链组成； 在补体系统各成分中含量最多； 是传统途径和旁路途径被激活的关键物质；,三、补体C3检测,参考值：0.81.5g/L 临床意义： 增高：见于急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应。 减低：见于急性肾小球肾炎、链球菌感染后肾炎、狼疮肾炎；活动性的SLE、RA。,四、补体C4检测,是一种多功能1球蛋白. 在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒方面发挥作用. 参考值：0.20.6g/L,四、补体C4检测,临床意义： 升高：急性风湿热、结节性动脉炎、皮肌炎。 降低：自身免疫性肝炎、1型糖尿病、SLE、狼疮肾炎、RA、SSc、IgA性肾病、胰腺癌。,第三节 细胞免疫检测,概述,人体淋巴细胞分为T、B、NK等细胞群； 其分别有若干亚群，并各有其特异的表面标志和功能； 临床上各种免疫病可出现不同淋巴细胞数量和功能的变化；,一、T细胞亚群的检测,（一）T细胞花结形成试验 T细胞表面有绵羊红细胞（SRBC）受体，可与SRBC结合形成花结样细胞，称为红细胞玫瑰花结形成试验或E玫瑰花结形成试验（ERFT）。,一、T细胞亚群的检测,以每个T淋巴细胞粘附3个羊红细胞者称为花结形成细胞（EtRFC）。 显微镜下计数花结形成细胞占淋巴细胞的比例，而检测T细胞的数量。 不能反映T细胞的免疫功能。 参考值：EtRFC 64.46.7,一、T细胞亚群的检测,临床意义： 降低：见于免疫缺陷疾病，如恶性肿瘤、免疫性疾病、大面积烧伤、多发性神经炎等。 升高：见于甲亢、甲状腺炎、重症肌无力、慢活肝、SLE活动期和器官移植排斥反应。,一、T细胞亚群的检测,（二）T细胞转化试验 体外培养时，T淋巴细胞被PHA和ConA刺激，转化为母细胞。 计数淋巴细胞和转化的母细胞数，求出转化率。,一、T细胞亚群的检测,参考值： 形态学法：转化率60.17.6 临床意义：同T淋巴细胞花结试验， 但Down综合征时明显增高。 反映T细胞的免疫功能； 估计疾病的疗效和预后；,一、T细胞亚群的检测,（三）T细胞分化抗原测定 T细胞膜表面有许多特异性抗原，统称为白细胞分化抗原（CD）； CD3代表总T细胞 CD4代表T辅助细胞（TH） CD8代表T抑制细胞（TS）,一、T细胞亚群的检测,参考值： 免疫荧光法 流式细胞术 CD3 63.110.8 6185 CD4 42.89.5 2858 CD8 19.65.9 1948 CD4/CD8 2.20.7/1 0.92.0/1,一、T细胞亚群的检测,临床意义： CD3减低：见于自身免疫性疾病，如SLE、RA CD4减低：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者 CD8减低：见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病,一、T细胞亚群的检测,临床意义： CD4/CD8比值增高： 见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染、变态反应； 提示器官移植后的排斥反应,一、T细胞亚群的检测,临床意义： CD4/CD8比值减低： 见于艾滋病（常0.5） CD1CD8增高： 可能为T细胞型ALL,二、B细胞分化抗原检测,应用CD19、CD20、CD22等单克隆 抗体，分别与B细胞表面抗原结合。 分别求出CD19、CD20、CD22等 阳性细胞百分率。,二、B细胞分化抗原检测,参考值： CD19 11.74 3.37 临床意义： 升高：ALL、CLL 降低：无丙种球蛋白血症、 使用化疗或免疫抑制剂后。,第四节 肿瘤标记物检测,概述,肿瘤标志物（tumor marker）是由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。 主要包括蛋白质类、糖类物质和酶类肿瘤标志物。,一、蛋白质肿瘤标志物的检测,（一）甲种胎儿球蛋白（AFP）测定 AFP是在胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白，出生后受到抑制。当干细胞或生殖腺胚胎组织发生恶性病变时，又重新合成，致血中AFP明显增高。 对诊断干细胞癌及滋养细胞恶性肿瘤有重要临床价值。,一、蛋白质肿瘤标志物的检测,参考值：RIA或ELISA法300g/L 2、生殖腺胚胎癌（睾丸癌、卵巢 癌、畸胎瘤）、胃癌、胰腺癌 时，AFP可增高。,一、蛋白质肿瘤标志物的检测,临床意义： 3、病毒性肝炎、肝硬化 AFP （20200g/L） 4、妊娠34月， AFP开始增高， 78月达到高峰，然后下降。 多低于300g/L,一、蛋白质肿瘤标志物的检测,（二）癌胚抗原（CEA）测定 CEA是一种富含多糖的蛋白复合物，胎儿六月后渐减少，出生时含量极低。 CEA水平对肿瘤的诊断、预后、复发的判断有意义。,一、蛋白质肿瘤标志物的检测,参考值： ELISA法和RIA法60g/L 2、CEA浓度随病情变化而波动。,一、蛋白质肿瘤标志物的检测,临床意义： 3、结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病、 哮喘等也常见CEA轻度增高。 4、胃液和唾液中CEA对胃癌诊断 有一定价值。,二、糖脂肿瘤标志物检测,（一）癌抗原-50（CA-50）测定 CA-50是一种肿瘤糖类相关抗原，对肿瘤的诊断有广泛性。 参考值： IRMA和CLIA法02.0万u/L,二、糖脂肿瘤标志物检测,临床意义： 1、增高见于87的胰腺癌、80胆囊癌、73的原发性肝癌、50的卵巢癌、20的结肠癌、乳腺癌、子宫癌。,二、糖脂肿瘤标志物检测,临床意义： 2、动态观察其水平变化对肿瘤疗效、预后判断及复发检测具有意义。 3、鉴别良恶性胸腹水。 4、慢性肝病时增高。,二、糖脂肿瘤标志物检测,（三）糖链抗原19-9（CA19-9） CA19-9是一种糖蛋白，在成人的胰、胆部位少量存在。 参考值： 健康人血清CA19-93.7万u/L,二、糖脂肿瘤标志物检测,临床意义： 1、胰腺癌、肝胆和胃肠道疾病可明显增高。其阳性率胰腺癌8595，胆囊癌和胆管癌85，胃癌、结肠癌40。但无早期诊断价值。 2、结合CEA检测，对胃癌诊断符合率85,二、糖脂肿瘤标志物检测,临床意义： 3、连续检测对病情进展、手术疗效、预后估计、复发诊断有重要意义。 4、急性胰腺炎、胆汁淤积型胆管炎、胆石症、急性肝炎亦增高。,二、糖脂肿瘤标志物检测,（四）癌抗原125（CA125）测定 CA125是一种糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在卵巢肿瘤的上皮细胞内。 参考值：3.5万u/L,二、糖脂肿瘤标志物检测,临床意义： 1、对诊断卵巢癌（阳性率6090）有较大临床意义。 2、宫颈癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、肺癌等。 3、良性卵巢瘤、子宫肌瘤、肝硬化,三、酶类肿瘤标志物检测,（一）前列腺酸性磷酸酶测定 PAP是一种前列腺外分泌物中能水解磷酸脂的糖蛋白。 参考值：RIA法和CLIA法2.0g/L,三、酶类肿瘤标志物检测,临床意义： 1、前列腺癌时明显增高，与癌瘤 发展呈平行关系。 2、前列腺肥大、前列腺炎时， PAP水平升高。,三、酶类肿瘤标志物检测,（三）异常凝集酶原（APT）测定 肝细胞癌时可生成大量的APT，故其测定是反映肝细胞癌的一种标志物。 参考值：20g/L,三、酶类肿瘤标志物检测,临床意义： 1、APT增高：见于90以上的肝细胞癌，均值高达900g/L。 2、AFP水平较低的肝细胞癌，APT往往增高。 3、慢性肝炎、VitK缺乏症。,三、酶类肿瘤标志物检测,（四）-L-岩藻糖苷酶（AFU）测定 AFU是一种溶酶体酸性水解酶，参与糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。 原发性肝癌的标志物之一。,三、酶类肿瘤标志物检测,参考值： ELISA法和分光光度连续监测法 234414mol/L 临床意义： 1、原发性肝癌患者血清AFU增高， 与AFP联合提高其诊断阳性率。,三、酶类肿瘤标志物检测,临床意义： 2、动态观察以判断肝癌的疗效、 预后、复发。 3、在转移性肝癌、肺癌、乳腺癌、 卵巢癌中可增高； 肝硬化、慢性肝炎亦可轻度增高。,掌握免疫球蛋白的参考值和临床意义； 掌握补体的临床意义； 掌握T、 B淋巴细胞的临床意义； 掌握常见肿瘤标志物的检测结果和临床意义；,谢谢大家,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用