肝胆疾病的生物化学检验.ppt

肝胆疾病的 生物化学检验 Chemical diagnosis of liver and bile diseases,1,掌握:肝胆疾病生化检验常用项目（ALT、AST、GGT、ALP、TBA、TBIL、TP、ALB、PA）的检测方法、参考区间及临床意义 熟悉:胆红素代谢过程；胆汁酸的代谢与功能；肝细胞损伤时的代谢改变 了解：肝纤维化检验项目,本章教学要求：,2,第一节 概述,肝脏的解剖结构特点 肝脏的生物化学功能 肝胆疾病的代谢紊乱,3,一、肝脏（Liver）解剖结构特点,4,肝小叶是肝结构和功能的基本单位。,中央静脉 肝板 肝血窦 胆小管,5,双重血液供应,腹主动脉的分支肝动脉,氧,门静脉,营养,双重输出管道,肝静脉,代谢降解物,下腔静脉,胆道系统,脂溶性物质及其代谢产物,体外,6,肝胆管系统,7,肝脏的组织结构特点,细胞表面丰富的微绒毛 细胞膜通透性高 丰富的线粒体 丰富的内质网、高尔基体 核糖体 丰富的酶类,物质运输基础 物质交换基础 能量保证 合成蛋白质、酶类 物质代谢、生物转化基础,特有的酶：OCT(鸟氨酸氨甲酰基转移酶),8,二、肝脏生物化学功能,（一）物质代谢功能 （二）肝脏的生物转化作用 （三）分泌与排泄功能 1、胆汁酸代谢 2、胆红素代谢,9,（一）物质代谢功能,10,【定义】 既不能构成组织细胞的成分，又不能氧化供能的物质。 环境中摄入：药物、毒物、致癌物、食品添加 剂、环境污染物等； 体内代谢生成：激素、神经递质、氨、胆红素、 胺类化合物等。 【性质】 多是有机物，水溶性低，难于排出。 非营养物质代谢废物,非营养物质,1、概念,（二）肝脏的生物转化作用,11,机体将一些内源性或外源性非营养物质进行化学转变，增加其极性或水溶性，使其易随胆汁或尿液排出，这种体内变化过程称为生物转化（biotransformation）。,部位：肝、肾、肺、胃肠道、皮肤、神经 及胎盘等组织。 亚细胞定位：微粒体、线粒体、胞液。,12,13,3、生物转化的特点,连续性 多样性 解毒和致毒的双重性,14,（三）肝脏的分泌与排泄功能,胆汁酸代谢 胆红素代谢,15,胆汁酸： 胆汁中存在的一类胆烷酸的总称。,初级胆汁酸脱去7-OH即为次级胆汁酸。 胆汁中的胆汁酸以结合型为主，以钠盐或钾盐形式存在。,胆汁酸的分类：按来源、结构及结合与否,胆汁酸代谢,16,正常人合成胆固醇约11.5g/日，其中2/5（0.40.6g）在肝内转化为初级胆汁酸。,17,鹅,胆汁酸肝肠循环,胆汁酸随胆汁排入肠腔后，通过重吸收经门静脉又回到肝，在肝内转变为结合型胆汁酸，经胆道再次排入肠腔的过程。,意义：使有限的胆汁酸能最大限度的反复利用，促进 脂类物质消化吸收。,18,19,胆红素代谢,胆红素是胆汁中的主要成分之一，正常成年人胆红素约80%来源于衰老红细胞破坏后释放的血红素，约20%来源于肌红蛋白、细胞色素的分解。肝脏是胆红素代谢的主要器官，经肝脏处理的胆红素称结合胆红素（直接胆红素），未经肝脏处理的胆红素称未结合胆红素（间接胆红素）。人血液中主要是未结合胆红素，胆汁中主要是结合胆红素。,未结合胆红素,游离胆红素,结合胆红素,20,胆红素在肠中的变化及胆素原的肠肝循环,8090%,胆素 （粪排）,1020%,门V,肝,体循环,肾 （尿胆素原）,尿排,胆汁,5%,结合胆红素 （CB）,细菌 -葡萄糖醛酸苷酶,GA,细菌（还原）,胆素原,肠道,95%,未结合胆红素 （UCB）,21,结合胆红素与未结合胆红素的定义 未结合胆红素（Unconjugated bilirubin,UCB） 即间接胆红素，未经肝细胞转化处理的胆红素，包括：游离胆红素、血中与蛋白质结合的胆红素、-胆红素；具亲脂疏水的性质。 结合胆红素（ Conjugated bilirubin,CB） 即直接胆红素，在肝细胞内经过生物转化与葡萄糖醛酸结合而形成的胆红素；具亲水疏脂的性质。,胆汁中的胆红素绝大多数为结合胆红素 血液中的胆红素绝大多数为未结合胆红素,22,结合胆红素与未结合胆红素的区别,未结合胆红素,结合胆红素,别名,间接胆红素,直接胆红素,与葡萄糖醛酸结合,未结合,结合,与重氮试剂反应,慢或间接反应,迅速、直接反应,溶解度,小,大,经肾随尿排出,不能,能,细胞毒作用,大,无,23,（一）蛋白质代谢紊乱 1、蛋白质的合成：合成除-球蛋白以外的几乎 所有血浆蛋白。 合成： 自身蛋白 血浆蛋白 清蛋白 凝血因子 肝功能受损：清蛋白 水肿、A/G 凝血因子 凝血障碍 胞质、线粒体内酶 血 血液中多种酶活性,三、肝胆疾病的代谢紊乱,24,2.氨基酸分解代谢 转氨基、脱氨基、转甲基、脱羧基 肝细胞内转氨酶含量高：ALT、AST 急性肝炎：ALT,25,26,血氨来源： 1、氨基酸脱氨基形成 2、谷氨酰胺经肾脏分解生成 3、肠道内细菌作用生成 血氨去路： 1、在肝内通过鸟氨酸循环合成尿素 2、用于酮酸的氨基化，形成谷氨酰胺，在肾内形成铵盐从尿中排出,（3）解除氨毒,27,（3）解除氨毒,血氨参考区间：1872umol/L,临床意义：诊断肝昏迷和肝性脑病,（二） 糖代谢紊乱 维持血糖浓度的恒定 糖原合成 糖原分解 糖异生 肝功能受损：饥饿时易发生低血糖。 糖耐量曲线异常。,28,1.消化、吸收 :胆固醇 胆汁酸 肝功能受损：“脂肪泻” 2.合成、运输： （1）合成：TG、ChE/Ch、PL、LCAT、酮体 （2）运输：VLDL、HDL 肝功能受损：PL “脂肪肝” LCAT 血ChE/Ch,（三）脂代谢紊乱,29,（四）胆红素代谢紊乱,1.黄疸 黄疸（jaundice）指由于胆红素代谢障碍，血浆中胆红素含量增高，胆红素进入组织，引起皮肤、巩膜、黏膜等组织黄染的一种病理变化和临床表现。,隐性黄疸 TBIL： 17.134.2mol/L 显性黄疸 TBIL： 34.2mol/L,30,肉眼可否见到黄染现象分为： -显性黄疸和隐性黄疸 发病原因可分为： -溶血性、肝细胞性和梗阻性黄疸。 病变部位可分为： -肝前性、肝性和肝后性黄疸。 血中升高的胆红素的类型分为： -高未结合胆红素性黄疸及高结合胆 红素性黄疸。,2.黄疸的分类,31,3.黄疸发病机制,溶血性黄疸：胆红素形成过多,32,33,34,35,（五）胆汁酸代谢紊乱,1.胆汁酸合成缺陷-遗传性疾病 2.肝脏疾病时胆汁酸代谢异常 升高 急慢性肝病 胆汁酸淤积 3.肠道疾病时胆汁酸代谢异常 降低 4.胆汁酸代谢与高脂血症,36,第二节 肝胆疾病的生化检验,一、相关酶及同工酶 （一）反映肝实质细胞损害为主的酶：ALT、AST、LD、GD （二）反映胆汁淤积为主的酶：GGT、ALP （三）反映肝纤维化为主的酶类：MAO 二、蛋白质合成功能：Alb、PA、PT、ChE 三、血清胆汁酸 四、血清胆红素 五、肝纤维化检验项目,37,ALP ALT -GT 5-NT AST -PH MAO 急性肝炎 酒精性肝炎 N, 慢性肝细胞疾病 N, N, N, N, N, 肝硬化 N, N, N, N, N, 肝肿瘤 胆汁淤积 ,肝病的血清酶学检查,一、相关酶及同工酶,38,（一）反映肝实质细胞损害为主的酶,1、血清转氨酶（ALT和AST）,DeRitis比值（ASTALT）对于急、慢性肝炎的诊断、鉴别诊断以及判断转归有特别价值。急性肝炎时比值1，肝硬化时比值2，肝癌时比值3。 “酶胆分离”现象重症肝炎时由于大量肝细胞坏死，血中ALT、AST逐渐下降，而胆红素却进行性升高，常是肝坏死的前兆。,39,2、乳酸脱氢酶（LD）,LD有五种同工酶，LD1，LD2，LD3，LD4和LD5。肝脏以LD5为主，其次是LD4。肝病时血清中LD虽然升高，但敏感度远不及转氨酶。许多肝外疾病如心肌梗死、肺梗死、溶血时也会升高。故LD的监测对肝病的诊断缺乏特异性。,40,3、谷氨酸脱氢酶（GD）,GD是线粒体酶，集中分布在肝小叶的中央区域。在不侵犯线粒体的肝细胞损伤时，GD正常，当肝细胞坏死时，线粒体受损而释放出大量GD，血清中该酶活性显著升高。所以GD正常不能排除肝细胞的轻度损害，而GD异常提示肝细胞坏死。,41,42,检测方法,双抗夹心法,参考区间,4-22U/L,临床意义,酒精中毒伴肝坏死、局部缺血及卤烷中毒时 急性黄疸型肝炎、慢性肝炎及肝硬化时,升高,（二）反映胆汁淤积为主的酶,1、-谷氨酰转移酶（GGT）,是一种含巯基的线粒体酶，参与体内谷胱甘肽的代谢。肾脏、肝脏和胰腺中含量丰富，但血清中GGT主要来自肝胆系统。GGT在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统，因此肝内合成亢进或胆汁排出受阻时，血清中GGT升高。,43,原发性肝癌时，GGT活性显著升高，特别是诊断肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发时，GGT的阳性率可以达90%。 胆汁淤积可使GGT从膜结合部位溶解释出，导致GGT极度升高。其上升程度与血清胆红素、ALP一致，且GGT检测比ALP更敏感，阳性率更高。,临床意义,44,2、碱性磷酸酶（ALP）,碱性磷酸酶（ALP或AKP）是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。它不是单一的酶，而是一组同功酶，目前发现有六种同工酶，ALP1、ALP2和ALP6来自肝脏。 肝胆疾病如肝外胆道阻塞、肝癌、肝硬化、毛细胆管性肝炎等ALP升高。,45,（三）反映肝纤维化为主的酶,单胺氧化酶（MAO）,MAO分为两类，一类存在于肝肾等组织的线粒体内，以FAD为辅酶，参与儿茶酚胺的分解代谢；另一类存在于结缔组织。血清中MAO和结缔组织中性质相似，能促结缔组织的成熟。在胶原形成过程中，参与胶原成熟最后阶段架桥的形成，使胶原和弹性硬蛋白结合。,46,47,检测方法,比色法,参考区间,12-40U/L,临床意义,肝硬化，阳性率在80%以上 爆发性重症肝炎、急性肝炎伴随肝坏死时 严重脂肪肝患者 甲亢、糖尿病合并脂肪肝、充血性心衰等,升高,二、蛋白质合成功能,总蛋白（TP） 白蛋白（ALB） 前白蛋白（PA） 凝血酶原（PT） 胆碱酯酶（ChE）,48,三、血清胆汁酸（TBA）,检测方法,HPLC法、层析法、免疫法、循环酶法、酶偶联比色法,参考区间,空腹TBA（F-TBA）：0.14-9.66umol/L 餐后TBA（P-TBA）：2.4-14umol/L,49,临床意义,1、急性肝炎、肝癌：显著升高，可达正常人水平的10-100倍 2、慢性肝炎：明显升高 3、肝硬化：增高幅度在4倍以上 4、乙醇性肝病：明显升高 5、中毒性肝病：增高 6、胆汁淤积：测定TBA有较高的灵敏度和特异性。TBA显著升高。,50,四、血清胆红素（BIL）,检测方法,重氮试剂法、胆红素氧化酶法,参考区间,总胆红素（TBIL）：3.4-17.1umol/L 直接胆红素（DBIL）：0-3.4umol/L 间接胆红素（IBIL）：1.7-10.2umol/L,51,临床意义,1、血清总胆红素测定的意义 （1）黄疸及黄疸程度的鉴定,隐性黄疸 TBIL： 17.134.2mol/L 显性黄疸 TBIL： 34.2mol/L,（2）肝细胞损害程度和预后的判断,TBIL明显升高反映有严重的肝细胞损害,52,2、血清结合胆红素测定的意义,DBIL与TBIL比值可用于黄疸类型的鉴别 60% 阻塞性黄疸,53,应用评价,1、判断有无黄疸及黄疸的程度,17.134.2umol/L 隐