病毒性肝炎血清标志物检查概要.ppt

1,病毒性肝炎血清标志物检测,2,要点,简介 抗原组成 传染源 传播途径 病原学诊断 血清学模式及临床意义,End,3,A,病毒性肝炎病毒 Hepatitis Virus,肠道传播,肠道外传播,F, TTV ? 其它,E,NANB,B,D,C,病毒性肝炎- 背景,4,传染源,粪便,血液/,血源性物质/,体液,血液/,血源性物质/,体液,血液/,血源性物质/,体液,粪便,传播途径,粪-口,经皮肤/ 经粘膜,经皮肤/ 经粘膜,经皮肤/ 经粘膜,粪-口,慢性感染,否,是,是,是,否,病毒性肝炎类型,A,B,C,D,E,基因组类型 ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNA,5,一、Hepatitis B Virus,乙型肝炎的病原体 在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染 中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8%,6,Hepatitis B Virus,7,HBV virion,The infectious virion is called the DANE particle.,8,Both comprised of HBsAg,9,HBV nomenclature,HBV: hepatitis B virus HBsAg: hepatitis B virus surface antigen HBsAb: hepatitis B virus surface antibody HBcAg: hepatitis B virus core antigen HBcAb: hepatitis B virus core antibody HBeAg: hepatitis B virus e antigen HBeAb: hepatitis B virus e antibody,10,传染源,患者 潜伏期 急性期 慢性期 无症状HBsAg携带者,11,高,中等,低/不能检出,血液,精液,尿,血清,阴道分泌物,粪便,伤口渗出物,唾液,汗液,泪液,乳汁,各种体液中HBV的浓度,12,血源性传播 输血、注射、外科和牙科手术、针刺等 剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等 母婴垂直传播 宫内传播 分娩时微小皮损处传播 产后母婴密切接触 性传播,HBV 传播途径,13,抗原组成(一)-HBsAg,位于病毒表面，是一种糖蛋白： Pre-S1和Pre-S2和蛋白 4种亚型(adr,adw,ayr,ayw) 欧美国家: adw 我国汉族: adr 我国少数民族: ayw 判断HBV感染的指标之一 刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs,14,Pre-S抗原,位于HBV的外衣壳上，有两种 刺激机体产生抗Pre-S1和抗Pre-S2，能阻断HBV与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒的作用 抗Pre-S1和抗Pre-S2的出现，表示病情好转，趋向痊愈,15,抗原组成(二)- HBcAg,位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易检出游离的HBcAg 主要成分是蛋白质 刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体) 在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗-HBc 抗-HBc IgM常提示病毒处于复制状态,16,抗原组成(三)- HBeAg,位于HBV的核心,是一种可溶性蛋白抗原 HBeAg和Dane颗粒出现相平行，且与DNA多聚酶在血中的消长动态相符合 血中HBeAg的出现可作为HBV复制及血清有感染性的指标 刺激机体产生抗-HBe 抗-HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合,通过补体介导破坏受染的肝细胞,抗-HBe的出现是预后良好的征象,17,病原学诊断(一)-抗原抗体检测,项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM 方法 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性) 发光免疫分析(定量) 反相间接血凝试验(少用),18,ELISA的基本原理,利用抗原和抗体特异性结合 主要的试剂 固相抗原或抗体 酶标记的抗原或抗体 酶的底物,19,ELISA的主要方法,间接法: 测定抗-HBs 夹心法：测定HBsAg和HBeAg 竞争法：测定抗-HBc 中和法：测定抗-HBe 捕捉法：测定抗-HBc IgM,图,20,病原学诊断(二)核酸检测,核酸杂交 探针 PCR 引物,21,HBsAg 感染的标志 Anti-HBs 既往感染/接种疫苗 Anti-HBc IgM 急性感染标志 Anti-HBc IgG 既往或慢性感染 HBeAg 急性病毒复制，有传染性 Anti-HBe 病毒不再复制 HBV-DNA 急性病毒复制，比HBeAg更准确；主要用于监测治疗反应,22,血清学检测的临床意义,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 临床意义,急性或慢性感染(大三阳),+,-,+,-,+,+,+,+,乙肝后期或慢性感染(小三阳),-,-,+,+,-,-,-,潜伏期或急性乙肝早期,-,-,+,+,+,痊愈或恢复期,有免疫力,-,-,-,-,-,+,+,+,-,-,痊愈,有免疫力,疫苗接种或曾经感染过,有免疫力,23,Symptoms,HBeAg,anti-HBe,Total anti-HBc,IgM anti-HBc,anti-HBs,HBsAg,0,4,8,12,16,20,24,28,32,36,52,100,Acute HBV Infection with Recovery,Typical Serologic Course,Weeks after Exposure,Titre,24,25,IgM anti-HBc,Total anti-HBc,HBsAg,Acute (6 months),HBeAg,Chronic (Years),anti-HBe,0,4,8,12,16,20,24,28,32,36,52,Years,We