药物对离体豚鼠回肠收缩的作用.ppt

目 的,学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 观察小肠平滑肌的自律性收缩，理解其原理。 观察药物acetylcholine (Ach、乙酰胆碱），histamine (His、组胺），BaCl2分别对离体豚鼠回肠平滑肌的作用，并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）为工具药，初步分析以上药物的作用原理。,原 理（1）,胃肠平滑肌收缩的自动节律性（慢波理论：Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果）。,原 理（2）,乙酰胆碱：M胆碱能受体激动药。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流，肌浆Ca2+，平滑肌收缩幅度增高。 阿托品：M胆碱能受体阻断药。阿托品与平滑肌细胞膜M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用。,原 理（2）,组胺：激动平滑肌细胞膜H1受体，通过激活G蛋白-磷脂酶C系统，使细胞内Ca2+增高，导致平滑肌收缩。 扑尔敏：H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合，阻断组胺与H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的激动作用。,原 理（3）,氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆Ba2+，平滑肌收缩幅度增高，但泵出障碍；另一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体，使平滑肌收缩幅度增高。,材 料,豚鼠1只：WT为300 g左右 麦氏浴槽，生物信号采集系统，张力换能器。 台氏液， 10-2 g/L乙酰胆碱 、1 g/L硫酸阿托品、 10-2 g/L组胺， 10-3 g/L扑尔敏、10 g/L BaCl2 溶液。,方 法,1. 实验装置准备： 打开恒温水浴37-加台氏液于麦氏浴槽中-95% O2+5%CO2持续通气（气泡一个个逸出为宜）。 2. 标本准备： 击昏豚鼠-开腹-减取回肠-冲洗内腔-截取肠段- 肠段两端对角穿线- 固定于麦氏浴槽和换能器上。 3. 实验记录： 打开配置（药物对离体豚鼠回肠的作用）-零点设置-调节换能器张力2 g -稳定10-30分钟（基线和收缩幅度稳定）,找到盲肠，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于盛有冰冷台氏液的培养皿中，冲洗干净，将回肠剪成1-1.5cm的几小段。,标本准备（1）,标本准备（2）,取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角处分别用缝针穿线，并打结。一端系于浴槽固定钩上，另一端系在张力换能器的悬臂梁上。,换能器,肠管,观察项目,记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。 加入10-2 g/L Ach 0.2ml，观察并记录曲线，作用明显时换液。 重复以上Ach剂量，待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml，观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同量的Ach，观察并记录收缩曲线，换液。 加入10-2 g/L组胺 0.3ml，作用明显时迅速换液。 预先加入10-2 g/L扑尔敏0.2 ml，5 min后（不换液）加入同量组胺，观察并记录收缩曲线 ，换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml，当作用达到最高点，加入1 g/L阿托品 0.2 ml，观察并记录收缩曲线。,实验结果,Ach 换液 Ach 阿 Ach 换液 His 换液 扑 His Bacl2 阿 (每次换液后稳定15min),稳定20min,注意事项,注意保持肠管通畅，勿使其封闭。 不要把药物直接滴加到回肠上。 每次加的台氏液量保持相等。 加的台氏液量必须预先加热到37。 药物作用明显后，尽早冲洗。 每次换液后稳定1020min。,实验结果（1）,曲线描记：标上加药时间点，药物名，洗脱时间点。 对曲线进行测量：基础张力，收缩张力。填入表格。,实验结果（2）,表3. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响 组别 标本数 基础张力（g） 收缩幅度（g） 乙酰胆碱 阿托品+乙酰胆碱 组胺 扑尔敏+组胺 BaCl2 BaCl2+阿托品,实验报告,针对实验数据，进行结果描述 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 分析Ach、阿托品、H