湖北省黄梅国际育才高级中学2018_2019学年高二生物周测试题.docx

湖北省黄梅国际育才高级中学2018-2019学年高二生物周测试题一、单选题1. 切取牛的生长激素基因和人的生长激素基因，构建基因表达载体，用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理是（ ）A. 基因突变：DNARNA蛋白质B. 基因工程：RNARNA蛋白质C. 细胞工程：DNARNA蛋白质D. 基因工程：DNARNA蛋白质2. 下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（）A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B. 质粒是基因工程常用的运载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有C. 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细胞繁殖快D. 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达3. 下列四条DNA分子，彼此间具有相同粘性末端的一组是( ) A. B. C. D. 4. 下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制5. 如图为DNA分子的某一片段，其中、分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是 （）A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶B. 解旋酶、限制酶、DNA酶C. DNA酶、限制酶、DNA聚合酶D. DNA酶、DNA连接酶、限制酶6. 下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件（）A. 具有某些标记基因B. 决定宿主细胞的生存C. 能够在宿主细胞中复制D. 有一个或多个限制酶切点7. 下列关于质粒的叙述，正确的是（ ）A. 质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B. 质粒是细菌、酵母菌等细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子C. 运载体就是质粒D. 细菌质粒的复制过程一定是在受体细胞外独立进行的8. 关于基因工程下列说法正确的有（ ） 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列限制酶只用于切割获取目的基因质粒是基因工程常用的运载体A. 2项B. 3项C. 4项D. 5项9. 图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因下列叙述正确的是（） A. 图甲中的质粒用BamH切割后，含有4个游离的磷酸基团B. 在构建重组质粒时，可用Pst和BamH切割质粒和外源DNAC. 导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长D. 用Pst和Hind酶切，可以保证重组DNA序列的唯一性10. 下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是（）A.是c；是b；是aB.是a和b；是a；是b C.是a和b；是b；是aD.是c；是a；是b11. 下表为常用的限制性核酸内切酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断的以下说法中，正确的是 ( )（注：YC或T，RA或G） A. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B. 限制酶切割后一定形成黏性末端C. 不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端D. 限制酶的切割位点在识别序列内部12. 下列关于基因操作工具的叙述，正确的是（ ）A. 通常以抗生素合成基因作为标记基因B. 并非所有目的基因都可用PCR方法获取C. 限制酶识别并在特定位置断开氢键D. DNA连接酶可将脱氧核苷酸连接成长链13. 下列有关目的基因的相关叙述，正确的是（ ）A. 目的基因只能是编码蛋白质的基因B. 获取目的基因的常用方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增目的基因及人工合成目的基因C. 如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同D. 通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因需要模板链14. 下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（）A. 载体质粒必需有复制原点、起始密码、终止密码和标记基因B. 应用DNA探针可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达C. 只要抗虫基因能成功地插入到植物细胞染色体上就能使之表达出抗虫性状D. PCR反应中温度的周期性改变是为变性、复性、延伸创造条件15. 下列有关叙述错误的是（）A. 从基因组文库中获取的某种生物的部分基因，可以实现物种间的基因交流B. 从cDNA文库中获取的目的基因，既无启动子，又无终止子C. 用人胰高血糖素基因制成的DNA探针，检测人胰岛B细胞中的mRNA，可形成杂交分子D. 基因表达载体中的标记基因不能含有限制酶的切割位点16. 以下关于基因表达载体构建的说法正确的是（ ）A. 天然质粒通常含有复制原点、标记基因等B. 基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤C. DNA聚合酶与启动子结合驱动DNA的复制和转录D. 载体质粒通常采用抗生素合成基因作为标记基因17. 水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用（）A. 促使目的基因导入宿主细胞中B. 促使目的基因在宿主细胞中复制C. 使目的基因容易被检测和选择D. 使目的基因容易成功表达18. 下列关于构建人胰岛素基因表达载体并导入大肠杆菌的叙述，正确的是（）A. 表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得B. 有关的DNA聚合酶能识别并结合到启动子区域从而驱动转录C. 人胰岛素基因与基因探针能通过磷酸二酯键结合而形成杂交带D. 含目的基因的大肠杆菌表达出来的胰岛素不一定有生物学活性19. 下列关于核酸分子杂交和抗原抗体杂交的叙述，正确的是（ ）A. 核酸分子杂交是指两条脱氧核苷酸链的杂交B. 抗原抗体杂交的原理为碱基互补配对原则C. 核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录D. 抗原抗体杂交常以目的基因产物作为抗体20. 土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T-DNA片段转入植物的基因组。利用农杆菌的Ti质粒作为运载体进行转基因，下列相关叙述正确的是（）A. 目的基因应插入T-DNA片段外，以防止破坏T-DNAB. 用Ca2+处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞C. Ti质粒是一种环状DNA分子，属于细菌的拟核DNAD. T-DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体中21. 科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成并分泌人的生长激素，在医学研究及相关疾病的治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是( )A. 选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为该细胞全能性较高B. 采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达C. 人的生长激素基因能在小鼠细胞中成功表达，说明遗传密码具有通用性D. 与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛22. 现有一长度为1 000碱基对(bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco RI酶切后得到的DNA分子是200bp和800bp两种长度的DNA分子，用Kpnl单独酶切得到1000 bp的DNA分子，用EcoRI,Kpnl同时酶切后得到200 bp和400 bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（ ）A. B. C. D. 23. 下图为利用转基因技术将控制人抗胰蛋白酶基因导入受体细胞，最终培育出能在乳腺细胞表达人抗胰蛋白酶的转基因羊的过程简图，图中GEP基因为绿色荧光蛋白基因。下列相关叙述错误的是 （）A. 抗胰蛋白酶基因和GEP基因的基本组成单位相同B. GEP基因可作为标记基因C. 图中受体细胞为羊的乳腺细胞D. 可用显微注射法将重组质粒导入受体细胞a酶切割产物（bp）b酶再次切割产物（bp）2100、1400、1000、5001900、200、800、600、1000、50024. 某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关说法不正确的是（ ） A. a酶与b酶切断的化学键相同B. a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接C. 在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个D. 用a酶、b酶和DNA连接酶对该DNA分子反复切割、连接操作，若干循环后，序列会明显增多25. 研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内，获得抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是（ ）A. 设计相应DNA单链片段作为引物利用PCR技术扩增目的基因B. 利用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶构建基因表达载体C. 将基因表达载体导入番茄体细胞之前需用Ca2+处理细胞D. 运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达26. 如图表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径，据图判断下列说法正确的是（ ）A. 导入受体细胞 C 需要用 Mg2+处理使大肠杆菌处于感受态B. 利用显微注射的方法将目的基因导入受体细胞 A 即受精卵C. 受体细胞 B 通常为莴苣的卵细胞，经脱分化、再分化形成个体D. 三种方法得到的胰岛素结构完全相同27. 下列关于基因工程应用的概述，错误的是（ ）A. 基因治疗是治疗遗传病的最有效的手段B. 在农业上主要是改良植物品质和培育具有抗逆性的农作物C. 向植物体内转入Bt毒蛋白基因来培育抗病毒转基因植物D. 利用乳腺生物反应器可表达出抗凝血酶、生长激素等医药产品28. 有关基因工程的应用及安全性的说法中，正确的是( )A. 用基因工程方法培育的抗虫植物也能抗病毒B. 在同一DNA分子中，限制酶的识别序列越长，酶切点出现的概率越大C. 以受精卵为受体细胞时，先要用Ca2+处理细胞以使其处于感受态D. 基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异29. 下图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述正确的是 （）A. 过程用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化B. 过程用Ca2+处理可提高转化成功率C. 过程应在培养基中加入除草剂和物质KD. 筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织30. 利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是（） A. 过程需使用逆转录酶B. 过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因C. 过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D. 过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已经表达31. 下列有关基因工程及其应用的叙述，正确的是（）A. 基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B. 目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物C. 限制性内切酶可用于切割烟草花叶病毒的核酸D. 载体上的抗性基因有利于促进目的基因的表达32.下图1是由氨基酸合成蛋白质的示意图，图2表示DNA部分结构模式图。下列有关叙述正确的是 ( ) A. 图1中由a到b的过程中，必须脱去一个水分子B. 图1的全过程都发生在内质网上的核糖体上C. 图2中的f可表示构成DNA的基本组成单位D. 限制酶的作用位点在图2中的处33.我国科学家将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入某植物，使赖氨酸的含量比对照组明显提高。如图所示是相关培育过程，下列说法正确的是（） A. 如果植物受体细胞为体细胞，过程可利用植物组织培养技术获得转基因植株B. 图中过程采用农杆菌转化法C. 若只有一个目的基因整合到受体细胞染色体DNA上并成功表达，发育成的富含赖氨酸植株自交，子代植株全部都富含赖氨酸D. 过程前获得的重组质粒只需要两种工具34.DNA疫苗是指将编码外源性抗原的基因插人到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。医学专家将含病毒抗原基因的重组质粒注入人体表达后使人获得免疫能力。下列相关叙述，不正确的是（ ）A. 在切割质粒时，需要用到限制酶B. 病毒抗原基因与质粒重组时需要用到DNA连接酶C. 重组质粒在内环境中表达后引起机体免疫反应D. 注射DNA疫苗后机体会产生相应的记忆细胞35.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是-GGATCC-，限制酶的识别序列和切点是-GATC-。根据图示判断下列操作正确的是（ ） A. 目的基因和质粒均用限制酶切割B. 目的基因和质粒均用限制酶切割C. 质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割D. 质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割二、非选择题36.北极比目鱼中有抗冻基因，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，请回答： （1）利用过程的方法构建的基因文库是_，除了从基因文库中获取目的基因以外，常用的获取目的基因的方法还有_和_。（2）过程中常需要使用限制酶和DNA连接酶，既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是_。（3）为使过程获取的目的基因在番茄细胞中能够表达，在构建表达载体时，需要将目的基因插入_。（4）此题中将目的基因导入受体细胞的方法是 。（5）要检测番茄的DNA上是否插入抗冻基因，应以 为探针，与番茄基因组DNA杂交。37.下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉索抗性基因，BamH、Hind、Sma直线所示为三种限制酶的酶切位点 据图回答下面的问题 （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶（用图示中限制酶类型来表示）同时酶切载体和人乳铁蛋白基因 （2）筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_（填字母代号） A启动子 BteRC复制原点DampR （3）过程可采用的操作方法是 。 （4）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_（填字母代号）技术 A核酸分子杂交 B基因序列分析 C抗原-抗体杂交 DPCR （5）基因工程中最常用的载体是质粒，除此之外，还可以有 和 （6）基因工程的四个操作步骤是 、 、 和 。38.植酸酶能提高饲料中磷的利用率，减少磷随畜禽粪便排出，进而降低环境污染。科学家试图将黑曲霉植酸酶基因（phyA）转入猪细胞中，以培育出转植酸酶基因猪。下图为实验过程中基因表达载体的构建过程，图中A、A1、B、B1表示引物，Nhe （识别序列和切割位点为GCTAGC）、Xho （识别序列和切割位点为CTCGAG）为限制酶切点。请回答下列问题： （1）实验室通常是利用从黑曲霉细胞中提取的RNA，再通过 过程形成cDNA，从基因结构分析，它比黑曲霉细胞中的基因pyhA少了 等结构（至少写两个）。（2）由图可知，科学家首先将黑曲霉植酸酶基因pyhA与猪腮腺分泌蛋白基因信号肽基因（Ps）拼接在一起，其目的是 。实验室中，过程（解链）一般可通过 方法完成。（3）限制酶Xho 切割DNA形成的粘性末端可以表示为 。过程中先利用Nhe 酶和Xho 酶处理目的基因和运载体，其主要优点是 。（4）研究中需要将基因表达载体导入 ，再运用胚胎工程技术培育获得转基因猪。39.回答下列有关基因工程问题： 基因工程自20世纪70年代兴起后，飞速发展，目前已经成为生物科学核心技术，在农牧业、工业、环境和医药卫生等方面展示出美好的前景。（1）植物基因工程：主要用于提高农作物的_以及改良农作物的品质和利用植物生产药物。（2）动物基因工程：可以用转基因动物生产药物，科学家将药用蛋白基因与_等调控组件重组在一起，导入哺乳动物的受精卵中，进而培育出转基因动物，在其进入泌乳期后，通过分泌的乳汁获得所需药品，称之为_。（3）医药卫生方面：可以利用基因工程生产药物，还可以治疗疾病。治疗遗传病最有效的手段是_。答案和解析1-5 DCDCA 6-10BBADA 11-15CBBDC 16-20BCDCD21-25BCCBA 26-30BCDBA 31-35BAACD36.（1）部分基因文库（cDNA文库） 利用PCR技术扩增 人工合成（2）T4DNA连接酶 （3）Ti质粒的T-DNA（4）农杆菌转化法 （5）用放射性同位素标记的目的基因37.（1）BamHI和HindIII （2）含氨苄青霉素 A（3）显微注射技术 （4）C（5）动植物病毒 噬菌体的衍生物（6）目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定38.（1）逆转录；启动子、终止子、内含子等（2）使phyA基因能够在腮腺细胞中高效地表达和分泌；加热（或高温处理）（3）AGCT；可保证目的基因定向插入运载体中（防止目的基因和运载体的反向连接）（4）受精卵39.（1）抗逆能力（2）乳腺蛋白基因的启动子乳腺生物反应器（乳房生物反应器） （3）基因治疗答案和解析1.【答案】D【解析】【分析】本题考查基因工程的原理及技术和遗传信息的传递和表达的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力。【解答】根据题意分析可知：牛的生长激素基因和人的生长激素基因转入小鼠的受精卵中，在小鼠的个体发育过程中产生了生长激素，调节其发育成“超级鼠”，说明生长激素基因能在小鼠体内通过转录和翻译进行表达，产生了生长激素。因此，此项技术遵循的原理是基因工程及DNARNA蛋白质。综上所述，D正确，A、B、C错误。故选D。2.【答案】C【解析】【分析】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。【解答】A.重组DNA技术所用的工具是限制酶、连接酶和运载体，其中工具酶是限制酶和连接酶，A错误；B.质粒是基因工程常用的运载体，不仅存在于细菌中，某些真核细胞中也具有，但不存在于病毒中，B错误；C.细菌细胞体积小，繁殖周期短，遗传物质少，所以可选用细菌作为重组质粒的受体细胞，C正确；D.目的基因进入受体细胞中，由于操作失误和不可预测的干扰等，并不是所有受体细胞都能按照预先设计方案进行重组和表达，真正能有效表达的只是一小部分，而且细胞中的基因也是选择性表达的，D错误。故选C。3.【答案】D【解析】略4.【答案】C【解析】【分析】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及特点、操作步骤等，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。【解答】A.切割质粒的限制酶一般能特异性地识别6个核苷酸序列，且识别的序列有中心对称轴，也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成，A错误；B.引物是一小段单链DNA或RNA，作为DNA复制的起始点，两引物之间没有什么关系，B错误；C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，C正确；D.外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行转录，而复制需要有复制原点，D错误。故选C。5.【答案】A【解析】【分析】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的操作工具，要求考生识记限制酶和DNA连接酶的作用，能结合图中信息做出准确的判断。【解答】是氢键，是解旋酶的作用位点； 是磷酸二酯键，限制酶可将其断裂； DNA连接酶可将DNA片段之间的磷酸二酯键连接起来。因此， 相应的酶依次是解旋酶、限制酶、DNA连接酶 。综上，A正确，BCD错误。 故选A。 6.【答案】B【解析】略7.【答案】B【解析】【分析】本题考查质粒的相关知识，解答本题的关键是明确质粒的本质。【解答】A、B.质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子，不属于细胞器，A错误、B正确；C.质粒中的基因往往不是细菌生活所必需的，C错误；D.细菌质粒的复制过程可以在宿主细胞内进行，D错误。故选B。8.【答案】A【解析】【分析】本题属于简单题，属于考纲中识记层次的要求，考查了基因工程的工具和操作步骤等方面的知识，要求考生能区分工具和工具酶，并且理解细菌作为受体细胞的优点等知识。【解答】重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶，运载体不属于工具酶，错误；基因工程又称转基因技术，是在DNA上进行的分子水平的设计施工，正确；一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，其具有特异性，所以限制酶的切口不都是GAATTC碱基序列，错误；目的基因进入受体细胞后需要检测和鉴定，不一定能成功实现表达，错误；一种限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列，即具有特异性，错误；限制酶用于切割获取目的基因和切割运载体，错误；基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等，正确。综上所述，A正确，BCD错误。故选A。9.【答案】D【解析】【分析】本题主要考查了基因工程的相关知识，掌握基因工程的操作流程是解答本题的关键。【解答】A.分析题图，图甲中的质粒用BamH切割后，会破坏两个磷酸二酯键，磷酸二酯键是由相邻脱氧核苷酸的磷酸基团和脱氧核糖脱水形成的，因此只含有2个游离的磷酸基团，A错误；B.由于BamH的切割位点在目的基因的内部，使用它切割外源DNA会破坏目的基因，B错误；C.用Pst和Hind切割质粒后，由于氨苄青霉素抗性基因遭到破坏，因此导入目的基因的大肠杆菌只能用含新霉素的培养基进行筛选，C错误；D.用Pst和Hind切割外源DNA后，可得到两个能与质粒连接的DNA片段，但是只有带目的基因的DNA片段与酶切后的质粒才能连接，D正确。故选D。10.【答案】A【解析】略11.【答案】C【解析】【分析】本题结合限制酶的识别序列和切割位点，考查限制酶的相关知识，意在考查考生从表中获取有效信息的能力；识记能力和理解所学知识要点的能力。【解答】A.由图可知，一种限制酶可识别多种核苷酸序列，如Sau3A可识别BamH的识别序列，A错误；B.限制酶切割后不一定都形成黏性末端，也有平末端，如Sma，B错误；C.不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端，如BamH和Sau3A，C正确；D.限制酶的切割位点不一定在识别序列内部，如Sau3A，D错误。故选C。12.【答案】B【解析】【分析】本题主要考查与基因工程相关的知识，如目的基因的获取等基因工程的操作程序，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释并做出合理判断得出正确结论的能力。【解答】A.载体质粒上抗生素抗性基因可作为标记基因，供重组DNA的鉴定和选择，不是抗生素合成基因，A错误；B.用PCR技术提取目的基因，需要已知目的基因的部分起始核苷酸序列，以便制备引物，而并非所有的目的基因都已知其核苷酸序列，B正确；C.限制酶识别并在特定位置断开磷酸二酯键，C错误；D.DNA聚合酶可将脱氧核苷酸连接成长链，D错误。故选B。13.【答案】B【解析】【分析】本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。【解答】A.目的基因主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子，A错误；B.获取目的基因的常用方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增目的基因及人工合成目的基因，B正确；C.mRNA是由基因中的外显子转录形成的，因此cDNA文库中的基因不包含启动子和内含子等结构，与该生物的基因组文库中的基因结构不同，C错误； D.化学方法人工合成目的基因不需要模板，D错误。故选B。14.【答案】D【解析】【分析】本题主要考查了基因工程原理以及应用，准确识记相关知识点是解题的关键。【解答】A.载体质粒必需有复制原点、启动子、终止子和标记基因，A错误；B.应用抗原-抗体杂交法可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达，B错误；C.抗虫基因能成功地插入到植物细胞染色体上，不一定就能使之表达出抗虫性状，C错误；D.PCR反应中温度的周期性改变是为变性、复性、延伸创造条件，D正确。故选D。15.【答案】C【解析】【分析】本题考查基因工程相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤及相关细节，了解基因工程技术的相关应用，能结合所学的知识准确判断各选项。【解答】A.从基因组文库中获取的某种生物的部分基因，可以实现物种间的基因交流，A正确；B.从cDNA文库中获取的目的基因，既无启动子，又无终止子，B正确；C.用人的胰高血糖素基因制成的DNA探针，检测人胰岛A细胞中的mRNA，可形成杂交分子，C错误；D.基因表达载体中的标记基因不能含有限制酶的切割位点，D正确。故选C。16.【答案】B【解析】【分析】本题主要考查基因表达载体构建的相关知识。掌握基因工程技术的基本步骤及基因表达载体构建的相关知识是解答本题的关键。【解答】A.质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比，质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量尽可能减少，以便于基因工程操作。作为运载体的质粒，应该具有标记基因，以利于鉴别目的基因是否导入受体细胞，具有启动子和终止子，以利于目的基因的表达，A错误；B.基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取（2）基因表达载体的构建（3）将目的基因导入受体细胞（4）目的基因的检测与鉴定，基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，B正确；C.DNA中启动子的作用是使RNA聚合酶与启动子结合，驱动基因转录出mRNA，C错误；D.载体质粒通常采用某些抗性基因作为筛选标记基因，D错误。故选B。17.【答案】C【解析】略18.【答案】D【解析】【分析】本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识记以及理解能力。【解答】A.由于基因的选择性表达，在人的肝细胞中，没有胰岛素基因转录的mRNA，A错误； B.基因表达载体中具有启动子，使RNA聚合酶识别并开始转录，B错误； C.能与由胰岛素基因制成的DNA探针形成杂交分子的可以是胰岛素基因或由胰岛素基因转录而来的mRNA，该人的胰岛A细胞和肝细胞内部都含有胰岛素基因，所以其中的DNA可与该探针形成杂交分子，该人胰岛B细胞内胰岛素基因转录形成的mRNA也能与该探针形成杂交分子，而该人胰岛A细胞内的胰岛素基因并没有表达，所以胰岛A细胞内的mRNA不能与该探针形成杂交分子，C错误； D.大肠杆菌无内质网和高尔基体，不能对胰岛素原进行加工，因此人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，D正确。 故选D。19.【答案】C【解析】【分析】本题考查基因工程的原理及技术。核酸分子杂交是基因诊断的最基本方法之一。掌握基因诊断技术的基本原理和目的基因的检测与鉴定是解题的关键。【解答】A.核酸分子杂交是指两条核苷酸链的杂交，A错误；B.抗原-抗体杂交的原理是抗体与抗原特异性结合，B错误；C.核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录，C正确；D.抗原-抗体杂交中目的基因产物常作为抗原，D错误。C正确。20.【答案】D【解析】【分析】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具、操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题。【解答】A.在农杆菌转化法中，需要将目的基因插入到T-DNA片段上，A错误；B.农杆菌转化法中不需要用Ca2+处理农杆菌，应直接利用土壤农杆菌感染植物细胞，B错误；C.Ti质粒是一种环状DNA分子，是存在于细菌细胞质中的DNA，C错误；D.T-DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体，D正确。故选D。21.【答案】B【解析】【分析】本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生对所学知识的应用能力。【解答】A.选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为该细胞全能性较高，A正确；B.采用DNA分子杂交技术可检测外源基因是否存在小鼠细胞内，B错误；C.人的生长激素基因能在小鼠细胞中成功表达，说明遗传密码具有通用性，C正确；D.与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛，D正确。故选B。22.【答案】C【解析】【分析】本题考查限制酶的知识，意在考查分析能力及理解应用能力。【解答】根据题意，Kpnl单独酶切得到1000bp的DNA分子，要推测DNA分子为环状，同时也可知，DNA分子中只有一个Kpnl切割位点可用排除法解此题Kpnl单独酶切得到1000bp的DNA分子，要推测DNA分子为环状，同时也可知，DNA分子中只有一个Kpnl切割位点AB选项是链状结构，排除，D中有两个Kpnl切割位点，排除，C只有一个切割位点，且用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子是200bp和800bp两种长度的DNA分子，用EcoR，Kpnl同时酶切后得到200bp和400bp两种长度的DNA分子，C符合题意。综上所述，ABD均错误，C正确。故选C。23.【答案】C【解析】【分析】本题考查了基因工程原理以及操作，准确识记相关知识点是解题的关键。【解答】A.抗胰蛋白酶基因和GEP基因的基本组成单位都是脱氧核苷酸，A正确；B.GEP基因为绿色荧光蛋白基因，GEP基因可作为标记基因，B正确；C.图中受体细胞为羊的受精卵细胞，C错误；D.可用显微注射法将重组质粒导入受体细胞，D正确。故选C。24.【答案】B【解析】【分析】本题结合图表，考查基因工程的原理及技术，重点考查限制酶的相关知识，要求考生识记限制酶的特点及作用，能比较图中a酶和b酶的识别序列，明确两者切割后产生的黏性末端相同；能分析表中数据，明确a酶有3个识别位点，b酶有2个识别位点，再结合所学的知识准确判断各选项。分析题图：a酶和b酶识别的脱氧核苷酸序列不同，但切割后产生的黏性末端相同。分析表格：a酶可以把原有DNA切成4段，说明有该DNA分子上有3个切口，即a酶的识别序列有3个；b酶把大小是2100的DNA切成大小分别为1900和200两个片段，把大小是1400的DNA切成大小分别为800和600两个片段，且a酶和b酶的识别位点不同，说明b酶的识别序列有2个。【解答】A.a酶与b酶切断的化学键相同 ，都是磷酸二酯键，A正确；B.根据a酶和b酶的识别序列可知，a酶与b酶切出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B错误；C.由以上分析可知，a酶的识别序列有3个，b酶的识别序列有2个，C正确；D.a酶和b酶切割后形成的黏性末端相同，在DNA连接酶的作用下可连接形成AGATCCTCTAGG或GGATCTCCTAGA。所以用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，所得DNA分子中AGATCCTCTAGG序列会明显增多，D正确。故选B。25.【答案】A【解析】略26.【答案】B【解析】【分析】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查。【解答】A.将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即用Ca2+（或CaCl2）处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞，利于完成转化过程，A错误；B.利用显微注射的方法将目的基因导入受体细胞A即受精卵，B正确；C.受体细胞B通常为莴苣的体细胞，经脱分化、再分化形成个体，C错误；D.大肠杆菌是原核生物，羊和莴苣是真核生物，原核生物和真核生物对蛋白质的加工能力不同，所以三种方法得到的胰岛素结构不完全相同，D错误。故选B。27.【答案】C【解析】【分析】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作工具及操作步骤，能结合所学的知识准确判断各选项。【解答】A.基因治疗是治疗遗传病的最有效的手段，A正确；B.在农业上主要是改良植物品质和培育具有抗逆性的农作物，B正确；C.向植物体内转入Bt毒蛋白基因来培育杀虫转基因植物，如抗虫棉，C错误；D.利用乳腺生物反应器可表达出抗凝血酶、生长激素等医药产品，D正确。故选C。28.【答案】D【解析】【分析】本题主要考查基因工程的有关知识，构建知识网络，提高综合运用能力。【解答】A.用基因工程方法培育的抗虫植物，不能抗病毒，A错误；B.限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大，B错误；C.以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2+处理细胞以使其处于感受态，以便目的基因的导入，C错误；D.基因工程可以突破生殖隔离，实现不同物种之间的基因交流，实现生物的定向变异，D正确。故选D。29.【答案】B【解析】略30.【答案】A【解析】【分析】本题考查了基因工程的相关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤，通过操作步骤确定图中各标号表示的生理过程。【解答】A.过程表示利用mRNA逆转录合成相应DNA，逆转录过程需要逆转录酶，A正确；B. 过程表示利用PCR技术对目的基因进行扩增。该过程不用解旋酶，B错误；C.过程表示将目的基因导入受体细胞。而感受态细胞用氯化钙溶液制备，不用NaCl溶液制备，C错误；D.过程表示通过筛选获取工程菌。过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞，但不能鉴定目的基因是否表达，D正确。故选A。31.【答案】B【解析】【分析】本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生分析和解决问题的能力。【解答】A.基因治疗就是用正常基因代替缺陷基因的作用，A错误；B.目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物，B正确；C.限制性内切酶只能用来切割DNA，烟草花叶病毒的核酸是RNA，C错误；D.载体上的抗性基因有利于筛选目的基因，D错误。故选B。32.【答案】A【解析】【分析】本题考查蛋白质合成及DNA结构的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容的能力。【解答】A.两分子氨基酸脱去一分子水形成一个肽键，A正确；B.只有分泌蛋白的合成发生在内质网上的核糖体上，加工过程在内质网和高尔基体上，B错误；C.图2中的f中的磷酸与脱氧核糖与碱基之间为磷酸二酯键，不是同一个脱氧核苷酸的组成分子，故不是构成DNA的基本组成单位，C错误；D.限制酶的作用位点是在磷酸二酯键处，D错误。故选A。33.【答案】A【解析】【分析】本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力。【解答】A.农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，故如果植物受体细胞为体细胞，过程可利用植物组织培养技术获得转基因植株，A正确；B.图中过程通常需要使用钙离子处理，使其成为感受态细胞，B错误；C.目的基因整合到受体细胞染色体上后，该染色体上存在目的基因，而它的同源染色体没有该基因，因此可认为是杂合子，自交后子代植株部分富含赖氨酸，C错误；D.通过过程形成重组质粒需要三种工具，分别是限制酶、DNA连接酶和质粒，D错误。故选A。34.【答案】C【解析】【分析】本题考查基因工程的原理和操作程序，意在考查考生理解所学知识要点的能力。【解答】A.质粒是环状DNA，需用限制酶进行切割，A正确；B.DNA连接酶能连接病毒抗原基因与质粒，实现重组，B正确；C.重组质粒在细胞内表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答，使人获得免疫能力，C错误；D.注射DNA疫苗后，可诱导机体产生免疫应答，产生相应的记忆细胞，D正确。故选C。35.【答案】D【解析】【分析】本题考查基因工程限制酶相关知识，意在考查考生的识图和理解能力，解题的关键是理解基因表达载体构建的过程。【解答】限制酶I的识别序列和切点是-GGATCC-，限制酶II的识别序列和切点是-GATC-，可知限制酶II能够识别和切割限制酶I的识别序列据题图可知，目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点：-GGATCC-和限制酶II的识别序列和切点:-GATC-，只有用限制酶II才能将目的基因切割下来质粒有GeneI和Gene表示两种标记基因，分别有限制酶II的识别序列和限制酶I的识别序列；如果用限制酶II切割，则GeneI 和Gene都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶I切割，则破坏Gene，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA。综上所述，D正确，ABC错误。故选D。36.【答案】（1）部分基因文库（cDNA文库） 利用PCR技术扩增 人工合成（2）T4DNA连接酶（3）Ti质粒的T-DNA启动子 终止子（4）农杆菌转化法（5）用放射性同位素标记的目的基因 抗原-抗体杂交【解析】【分析】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，掌握基因工程采用的工具及具体操作步骤，能准确判断图中各步骤的名称，再结合所学的知识准确分析各小题。【解答】（1）分析图解可知，过程表示反转录法获取目的基因的过程，构建的基因文库是部分基因文库。此外，常用的获取目的基因的方法还有PCR扩增，用化学法人工合成。（2）过程中常需要使用限制酶和DNA连接酶，既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是T4DNA连接酶。（3）为使过程获取的目的基因在番茄细胞中能够表达，在构建表达载体时，需在目的基因的两端加入启动子、终止子，二者为调控序列。Ti质粒中的T-DNA能转移到植物细胞并整合到染色体DNA上，故目的基因要插入到T-DNA中。（4）将重组质粒导入农杆菌，并通过农杆菌的转化作用，可以将目的基因导入番茄体细胞中染色体的DNA上，其原理是目的基因随农杆菌中Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上，该方法叫农杆菌转化法。（5）要检测番茄的DNA上是否插入抗冻基因，应以放射性同位素标记的目的基因为探针，与番茄基因组DNA杂交；要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中正确表达，应用抗原-抗体杂交技术检测转基因番茄植株中该基因的表达产物（或抗冻蛋白）。37.【答案】（1）BamHI和HindIII （2）含