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第1章 微生物培养技术 第3节 测定微生物的数量学业达标测评一、选择题1下列不属于统计菌数方法的是()A显微镜直接计数法B活菌计数法C稀释平板计数法D标志重捕法【解析】标志重捕法是统计动物种群密度的方法。【答案】D2测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养;而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释,其原因是()A细菌个体小,真菌个体大B细菌易稀释,真菌不易稀释C细菌在土壤中含量比真菌高D随机的,没有原因【解析】稀释的目的是使平板培养基上菌落数适中,便于计数。细菌在土壤中含量比真菌高,故稀释倍数高。【答案】C3某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)()A2.34108B2.34109C234 D23.4【解析】平板上菌落的平均数稀释倍数每毫升样品中的菌落数,即234101062.34109个。【答案】B4下列关于“检测土壤中细菌总数”的实验操作的叙述中,不正确的是()A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,高温、高压灭菌后倒平板B取稀释倍数为104、105、106的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL涂布于不同的平板上C将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448小时D确定对照组无菌后,选择菌落数在300个以上的平板进行计数【解析】本题以“检测土壤中细菌总数”实验为命题点。检测土壤中细菌总数时,要先用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板,然后取稀释倍数为104、105、106的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上,将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448小时,最后在确定对照组无菌后,为保证实验结果的准确性,应选择菌落数在30300个的平板进行计数。【答案】D5下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()AKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水BKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、琼脂、水CKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、琼脂、水DKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水【解析】分解尿素的细菌除了加入尿素作为氮源外,还需要葡萄糖作为碳源和能源。【答案】A6在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有()由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照实验A BC D【解析】导致A同学菌落数目过高的原因既可能是取样问题,也有可能是培养基被其他微生物污染,还有可能是实验操作出现失误。与设置对照实验与否无关。【答案】A7下列叙述错误的是()A因为土壤中各类微生物的数量不同,所以,为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离B测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同C只有得到了3个或3个以上菌落数目在30300之间的平板,才说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数D牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落【解析】如果涂布三个平板能够得到2个菌落数目在30300之间的平板,就说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数。计数的方法是舍弃相差很大的一个,然后取平均值。【答案】C8某细菌培养至对数期,当细菌数目为105个/mL时,开始计时,90 min后细菌数目为1.6106个/mL。试问再经过多久,细菌数目会达到6.4106个/mL()A30 min B45 minC60 min D90 min【解析】按公式NtN02t,则1.61061052t,2t16,t4。即细菌由105个/mL1.6106个/mL,共繁殖了4代,每个繁殖周期为22.5 min。仍按此公式可知,由1.6106个/mL6.4106个/mL,繁殖了2代,共需222.545 min。【答案】B二、非选择题9自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。(1)步骤如下:制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。若对大肠杆菌进行计数,应选用_法接种样品。适宜温度下培养。(2)结果分析测定的大肠杆菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,与事实更加接近的是_。A一个平板,统计的菌落数是23B两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24C三个平板,统计的菌落数分别是31、9和32,取平均值24D四个平板,统计的菌落数分别是31、32、34和35,取平均值33一同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上菌落数的平均值为23.4,那么每毫升样品中的菌株数是(涂布平板时所用的稀释液体积为0.2 mL)_。用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量_(填“多”或“少”),因为_。【解析】(1)若对大肠杆菌进行计数,则需要用稀释平板涂布法接种样品。(2)应选取多个菌落数相差不大的平板计数,取其平均值。23.40.21061.17108。因为菌落可能由1个或多个细菌连在一起生长而成,所以实际活菌数量要比测得的数量多。【答案】(1)稀释平板涂布(2)D1.17108多当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的是一个菌落10在现代农业中,常在饲料中加入一定量的尿素去饲养牛等牲畜,因这类牲畜具有特殊的器官瘤胃,在瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物以尿素为唯一氮源。某同学设计了如下实验,对能分解尿素的细菌进行分离和计数。取样:到屠宰场从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先准备好的信封中密封。制备培养基:制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。由于初次实验,选择了一个较宽的稀释范围,并且每个稀释度下需要3个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基。微生物的培养与观察:按稀释度的顺序分别吸取0.1 mL菌液进行平板涂布操作。将涂布好的培养皿放在30 下培养,并且需要无氧条件。比较两种培养基中菌落的数量、形态等,并做好记录。挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红指示剂的培养基中,观察是否发生颜色反应。细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取平板计数。请回答下列问题:(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的目的是_。(2)每个稀释度下需要3个选择培养基,原因是_。(3)上述培养需要无氧条件, 请解释原因_。(4)应用含酚红指示剂的培养基的目的是_,结果会呈现_色,原理是_。(5)计数时应选_的平板进行计数,写出计算样品中细菌数目的方法_。【解析】(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的目的是为了比较其中的菌落数目和选择培养基的菌落数目,看选择培养基是否起到了选择作用。(2)设立3个培养基的目的是作为重复组,取平均值,以减小误差。(3)牛的瘤胃是一个无氧环境,生活在其中的微生物多为厌氧菌,所以设计实验时要创造无氧环境。(4)分解尿素的细菌在脲酶的作用下反应:CO(NH2)2H2OCO22NH3,其产物中的NH3可使培养基碱性增强,pH升高,使酚红指示剂呈现红色。(5)选择菌落数在30300个的平板计数,结果会最准确。【答案】(1)作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用(2)涂布3个平板作为重复组,以增

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