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文档简介
沙门氏菌的生物学特性 及鉴定要点,1. 形态与染色:革兰氏阴性杆菌,菌体细长,有周鞭毛。,2. 培养特性:在麦康凯平板上35培养1824小时,形成无色、透明的菌落。SS平板上显无色、透明菌落,但大部分菌落中央显黑色(产H2S),沙门氏菌分为6个亚属,2200多个血清变型。D群中的伤寒沙门氏菌是临床上最为重要的沙门氏菌。,3.生化反应: 氧化酶(-),发酵葡萄糖,乳糖(-),TSI或KIA为K/A,有动力,赖氨酸脱羧酶(+),硝酸盐还原试验(+),大多菌主H2S(+)。 KIA:斜面(K),底层(A), H2S“(+)或(-)“ MIU:动力(+),吲哚(-),脲酶(-),4.鉴别要点:,4.1 本菌属特点:选择SS平板上无色透明、半透明或中心黑色的菌落,TSI为K/A,H2S(+)或(-),动力(+),氧化酶(-),脲酶(-) 符合上述特性者,可通过血清凝集试验做出诊断。,4.2 与志贺菌属的鉴别:少数伤寒沙门氏菌在TSI或KIA上H2S(-),动力不明显,易于志贺氏菌相混淆,可用血清凝集试验相鉴别。,5.操作步骤,5.1 观察菌落特征,挑取可疑菌落做KIA,MIU或TSI初筛。,5.2 血清学鉴定,5.3 从SS平板上挑取纯菌落,传统生化反应进行菌落坚定。,5.4 初步鉴定,6.血清凝集步骤,6.1 筛选: 取营养琼脂斜面(或KIA斜面)培养物与AFO多价抗血清作玻片凝试验,若呈明显凝集,提示被检菌可能属于AFO6个0群范围内,再按0抗原血清凝集定群。若与多价0抗血清不凝集,有如下3种可能:(1),含有Vi抗原 (2),AFO群之外的沙门氏菌 (3),沙门氏菌以外的细菌,按下述方法进一步检验。 将营养琼脂斜面培养物用1ml无菌生理盐水或蒸馏水洗下,制成浓厚菌液,再合成2份,1份不经处理,为洗菌液,另一份放100水浴中30分钟,为加热菌液。 取活菌与Vi抗血清,取加热菌与Vi抗血清,AFO多价抗血清分别进行玻片凝集试验。,根据结果作如下分析: (1)活菌与Vi抗血清凝集,加热菌与Vi抗菌,按下述定群用O7和O9抗血清定群; (2)活菌与Vi抗血清不凝集,可能属于AFO群意外的沙门氏菌或其他菌属细菌,应进行全面生化试验定属,若符合沙门氏菌属细菌特征,宜送专门机构鉴定; (3)加热菌也与Vi抗血清凝集,而与AFO多价O抗血清不凝集者,可报告为阴性。,6.2 定群,取O2(A群),O4(B群),O7(C1群),O8(C2群),O9(D群),O3.10(E群),O11(F群)分别进行玻片凝集试验。若与其中1种因子血清凝集,可报告为阳性。,6.3 血清型分析: 菌群确定后先分析第1相鞭毛抗原,再分析第2相鞭毛抗原。,A:第1相鞭毛抗原分析:根据菌群分析结果,分别选用第1相鞭毛因子血清进行玻片凝集试验。,B:第2相鞭毛抗原分析:改用抗血清,通常是复合因子(1,2,3
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