课件：执业兽医资格考试微生物学巴氏杆菌科及其相关属.ppt

巴氏杆菌属 曼氏杆菌属 里氏杆菌属 嗜血杆菌属 放线杆菌属,巴氏杆菌科及相关属,1,2019,-,第十八章 巴氏杆菌科及相关属,巴氏杆菌属 曼氏杆菌属：从巴氏杆菌属中分出 里氏杆菌属 嗜血杆菌属 放线杆菌属 泰勒菌属,2,2019,-,重点介绍,巴氏杆菌属 嗜血杆菌属 放线杆菌属,3,2019,-,第一节 巴氏杆菌属,为一类微小、粗短、卵圆形的G杆菌，由法国微生物学家、化学家巴斯德最早发现，故名。目前 已报道有20多种，以多杀性巴氏杆菌在兽医学上最为重要。,4,2019,-,本属细菌的共同特性：,1、 G、细小短杆菌；两极染色；无鞭毛；无芽胞； 2、需氧或兼性厌氧； 3、普通培养基多生长不良，血或血清可促进生长； 4、分解糖类产酸不产气；不液化明胶； 5、 氧化酶阳性。,5,2019,-,多杀性巴氏杆菌,多杀亚种 败血亚种 杀禽亚种,6,2019,-,多杀性巴氏杆菌,形态特性 培养特性 生化特性 抵 抗 力 抗原结构 致 病 性 微生物学诊断,7,2019,-,1、多杀性巴氏杆菌的形态特性,G、细小短杆菌，两端纯圆，中央凸起，近似椭圆形。 无芽胞，无鞭毛，有荚膜。 两极染色。,多杀性巴氏杆菌模式图,8,2019,-,2、多杀性巴氏杆菌的培养特性,需氧或兼性厌氧；最适温度37，pH7.27.4。 普通培养基中加蛋白胨、酪蛋白水解物、血液、血清或微量血红蛋白时可促进生长。 菌落形态： 血清琼脂：淡灰白、露珠样小菌落，边缘整齐、表面光滑。 血液琼脂：湿润、水滴样小菌落，不溶血。 血清肉汤或1%胰蛋白胨肉汤：均匀混浊，轴性沉淀，形成菌环。,9,2019,-,根据有无荧光及荧光色彩，可分为3种菌落类型： Fg型：菌落小，蓝绿色带金光，边缘有狭窄的红黄光带，对猪、牛、羊等为强毒菌，对鸡等禽类的毒力弱。 Fo型：菌落大，桔红色带金光，边缘有乳白色光带，对鸡及兔等为强毒菌，对猪、牛、羊等家畜的毒力则微弱。Fg型和Fo型可以发生互相转变。 Nf型：上述2型经多次传代后，毒力降低或转为无毒力，不带荧光也无毒力。,新分离的强毒菌，血清琼脂上的菌落在45度折光下观察时，在菌落的表面可看到荧光。,10,2019,-,粘液型（M型）：菌落大，有粘稠性，对小鼠有中等毒力； 平滑型（荧光）：菌落中等大小，对小鼠毒力很强； 粗糙型（蓝色）：菌落小，对小鼠毒力弱，能自家凝集。 粗糙型无荚膜，而粘液型和平滑型均有荚膜，成分为透明质酸,国外常把本菌在琼脂上的菌落分为3种类型：,11,2019,-,糖类利用情况： 分解葡、蔗、果、甘露糖和半乳糖，产酸，不产气。 大多数发酵甘露醇。 一般对乳糖、鼠李糖、杨苷、肌醇、菊糖和侧金盏花醇不发酵。 H2S()、NH3 ()、IMViC()、还原硝酸盐()、还原美蓝()、接触酶()、氧化酶()、明胶液化()、石蕊牛乳()、尿素酶()、赖氨酸脱羧酶()等,3、多杀性巴氏杆菌的生化特性,12,2019,-,4、多杀性巴氏杆菌的抵抗力,本菌抵抗力不强 易被普通的消毒药、阳光或热杀死。 3%石炭酸、3%福尔马林、10%石灰乳、0.5l%氢氧化钠、0.1%升汞及2%来苏儿经12min可被杀死。 在水浴5615min、6010min内被杀死。 直射阳光下曝晒10min可失活。,13,2019,-,5、多杀性巴氏杆菌的抗原结构,抗原结构复杂，主要有荚膜抗原和菌体抗原。 荚膜抗原有型的特异性及免疫原性。,荚膜抗原共有6个：用大写英文字母表示 菌体抗原（O抗原）共有16个型：用阿拉伯数字表示 我国 禽多杀性巴氏杆菌以5:A最多，其次是8:A； 猪以5:A和6:B为主，其次是8:A和2:D； 牛、羊以6:B最多； 家兔以7:A为主，其次是5:A。,14,2019,-,6、多杀性巴氏杆菌的致病性,可引起多种畜禽巴氏杆菌病(亦称出血性败血症) 。 不同动物的巴氏杆菌，常对该种动物呈现较强的致病力，对其他动物较少引起交叉感染。 猪巴氏杆菌病：猪肺疫 马巴氏杆菌病 牛巴氏杆菌病：牛出血性败血症 羊巴氏杆菌病 家兔巴氏杆菌病 禽巴氏杆菌病：禽霍乱，又名禽出败 鹿巴氏杆菌病 貂巴氏杆菌病：貂出血性败血症 骆驼巴氏杆菌病,15,2019,-,毒力因子及实验动物的感染,实验动物：小鼠极易感染，家兔、鸽感染性强 毒力因子 荚膜 耐热外毒素 内毒素：含氮的磷酸脂多糖,16,2019,-,分离培养：新鲜病料接种于鲜血琼脂和麦康凯琼脂。 菌落观察：麦康凯上不生长，鲜血琼脂平板上生长，24h后，可形成淡灰色、圆形、湿润、露珠样小菌落，不溶血。 革兰氏染色为阴性两极浓染的短小杆菌。 血清琼脂生长良好，于45折光下观察菌落荧光； 生化试验：见前述,7、多杀性巴氏杆菌的微生物学诊断,17,2019,-,动物感染试验,血琼脂培养物,悬浮于2ml生理盐水中,动物死后剖检，观察病变,注射小白鼠、家兔,血液、肝、脾组织,美蓝染色和革兰氏染色,心血、肝、脾等组织,血琼脂平板，观察菌落,18,2019,-,预防,使用疫苗： 禽霍乱氢氧化铝甲醛菌苗 禽霍乱弱毒活菌苗 禽霍乱组织灭活菌苗 使用抗菌药物 喹诺酮类 磺胺类 链霉素、土霉素、氯霉素、庆大霉素及强力霉素,19,2019,-,第二节 曼氏杆菌属,该属1999年成立，至少有7个种，代表种为溶血性曼氏杆菌（M.haemolytica），原名叫溶血性巴氏杆菌.,20,2019,-,溶血性曼氏杆菌,形态和多杀巴氏杆菌相似，但比较大一些，长2.5um，宽0.5um，呈球状或杆状。 G 、无芽胞、无鞭毛、有荚膜，两极着色。 营养要求不严格，普通培养基生长良好，培养24h后，菌落呈圆形、光滑、湿润，半透明。在血液琼脂上，新分离的菌落呈微弱的溶血。连续传代培养，溶血性便减弱或消失。,21,2019,-,发酵某些糖类产酸不产气（如葡、麦、蔗、半乳、果、甘露醇等）。与多杀巴氏杆菌相比不产生靛基质、紫乳变酸且凝固，有些菌株产生硫化氢。在麦康凯上生长慢，生成红色菌落 本菌的抵抗力与多杀巴氏杆菌相似。 本菌按生化特性和致病力可分为两个生物型： A生物型包括1、2、5、6、7、8、9和11、12、13、14血清型； T生物型分为3、4、10、15血清型。 引起牛和绵羊的肺炎、新生羔羊败血症。,22,2019,-,血清型,属的水平划分 按其生化反应和致病力可分为A和T两个生物型 根据菌体表面蛋白抗原的差异，可分为17个血清型 T生物型：3，4，10，15 A生物型：其余均属此型 溶血性曼氏杆菌包括:1，2，5，6，7，8，9，12，13，14，16。代表株为血清型2，从绵羊分离,23,2019,-,致病性 毒力因子包括毒素、菌毛及荚膜多糖 一般认为毒力较强的致病菌株才有致病性 本菌存在于牛、羊鼻咽部等，可致牛、绵羊肺炎、新生羔羊败血症、羊乳腺炎等 微生物学诊断：从患病动物的肺、水肿液等病料中分离本菌,24,2019,-,第三节 里氏杆菌属 （Riemerella ）,概述 代表种为鸭疫里氏杆菌，原名鸭疫巴氏杆菌，为雏鸭传染性浆膜炎的病原菌,25,2019,-,鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer）,鸭疫里默氏杆菌感染是家鸭、火鸡和多种鸟类的一种接触性传染病。 主要发生于23周龄鸭，死亡率10%，也称为新鸭病、传染性浆膜炎。 鹅也可发生，称为鹅渗出性败血症。 该病呈急性或慢性败血症，特征病变为：纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪性输卵管炎和脑膜炎；也可能发生无任何症状的呼吸道感染。,26,2019,-,该菌曾称为“鸭疫巴氏杆菌”为什么？,形态特性：与巴氏杆菌形态相似，为G ，有荚膜，无芽胞、不运动，两极着色。菌落形态也与巴氏杆菌相同。 培养特性：在巧克力琼脂、血琼脂、姨酶大豆琼脂生长良好。（但该菌培养时需要5%的CO2） 生化特性：与败血性巴氏杆菌基本相同。 由于以上等等因素，曾一度把鸭疫里默氏杆菌称为“鸭疫巴氏杆菌”,27,2019,-,现在为什么称为 “鸭疫里默氏杆菌”,Hendrickson和Hilbert对该菌进行了分离鉴定，称为“鸭疫斐佛氏菌” Bruner和Fabricant认为该菌与莫拉氏菌有较多的共同点，建议命名为“鸭疫莫拉氏菌”。 第7版伯杰氏细菌学鉴定手册列为鸭疫巴氏杆菌。 第8版、第9版伯杰氏系统细菌学手册列为分类地位未定种。但将该菌从莫拉氏菌、巴氏杆菌中划分出来。 Segers等人，根据DNA-rRNA杂交分析、蛋白质、脂肪酸组成和表型特征（如不产生色素、产生呼吸醌“7-甲基萘醌”）等，建议将该菌单独列为“里默氏杆菌属”，将该菌命名为“鸭疫里默氏杆菌”,28,2019,-,抵抗力：不强，对多种药物敏感，但易形成耐药性 致病性：主要感染雏鸭，以23周为主，兔和小鼠不易感，雏鹅也有感染 微生物学诊断： 材料选择：选用纤维素性渗出物，心包液、肝或心血 培养基：选用绵羊鲜血琼脂或巧克力琼脂,血清型：目前已发现21个，我国以1型为主，近年 来也报道了2型存在,29,2019,-,第四节 嗜血杆菌属,某养鸡户饲养的商品蛋鸡，发生了一种疾病。产蛋率由90%降至65%，无死亡。发病初期表现发热、精神不振，食欲减退，有时下痢。比较典型的症状是：眼睑和面部肿胀，流泪。从鼻道和窦腔内流出浆液性分泌物，并有难闻气味。严重者整个头部水肿，眼垢粘着眼睑，造成了暂时性失明。病鸡呼吸困难，气管出现罗音，张口伸颈或甩头，不断摇头甩出泡沫状粘液。 剖检变化主要是：鼻腔和窦发生炎症，粘膜充血水肿，表面有大量粘液和炎性渗出物的凝块结痂，严重时气管粘膜也有类似的炎症。眼结膜充血、肿胀，眼部皮下水肿。病程较长的病鸡可见鼻腔、眶下窦和眼结膜内有干酪样物。,30,2019,-,1、嗜血杆菌的染色与形态特性,染 色： G 。 大 小：小到中等大小 ，0.4-0.81.0-3.0m 。 形 态：单个、成对分布，两极着色重 ，菌体形态似“哑铃” 。有时形成丝状，表现为多形性。 新分离菌株有时能见到荚膜；无芽胞；无鞭毛。,31,2019,-,32,2019,-,流感嗜血杆菌,Gram stain of Haemophilus influenzae from sputum,33,2019,-,嗜血杆菌的酶系统不够完善，培养时需要加入X和V两种生长因子。 X因子是指具有生长促进作用的血红蛋白衍生物。 V因子是辅酶I或辅酶II两种脱氢酶的一种。 血液中含有X和V两种生长因子。 需氧或兼性厌氧，鸡嗜血杆菌培养时需要5%的CO2环境。,2、嗜血杆菌的培养特性,34,2019,-,常用巧克力培养基。 在巧克力琼脂上生长形成圆形、隆起、表面光滑、边缘整齐、灰白色半透明的小菌落 普通琼脂和鲜血琼脂生长不良。 卫星现象：在鲜血琼脂上培养时，如同时有葡萄球菌生长，由于葡萄球菌可合成较多的V因子，因此可出现葡萄球菌周围的嗜血杆菌菌落较大，离葡萄球菌越远则越小。 菌落特点：呈针尖大小的露滴状菌落 菌落光滑、透明、不溶血，边缘整齐。,续：,35,2019,-,副鸡 嗜 血 杆 菌,36,2019,-,37,2019,-,糖发酵试验： 能发酵：葡、麦、甘、蔗； 不发酵：乳、伯胶糖等。 硝酸盐还原()、H2S () 、明胶液化() 、靛基质() 氧化酶和接触酶：因不同菌株而有差异。,3、嗜血杆菌的生化特性,38,2019,-,4、抗原及分型,荚膜多糖抗原： 多糖和磷壁酸，具有型特异性 菌体结构抗原：脂多糖抗原和外膜蛋白抗原，在种内和属内均有交叉 流感嗜血杆菌根据荚膜抗原分为6个生物型，以型表示,39,2019,-,嗜血杆菌的抵抗力不强： 常用消毒剂可杀灭； 一般在60条件下1020分钟即可杀灭； 室温下只能生存24天。,5、嗜血杆菌的抵抗力,40,2019,-,6、嗜血杆菌属的致病力,毒力因子：荚膜、菌毛和内毒素 临床意义： 流感嗜血杆菌：引起各种呼吸道感染及小儿脑膜炎 副流感嗜血杆菌：寄居人的上呼吸道 副猪嗜血杆菌：4个血清型，为猪的下呼吸道的正常菌群，应急状态下，可引起全身感染，比如引起猪多浆病，即在大的体腔、关节、脑脊膜的纤维蛋白性炎症。本菌也常与猪流感病毒联合引起猪流感 副禽嗜血杆菌：引起禽类呼吸道系统疾病，引致鸡鼻炎（可从气管侵入到整个肺部）、打喷嚏及面部水肿，产蛋减少，对雏鸡致病力较强,41,2019,-,（以鸡传染性鼻炎为例） 病原分离鉴定： 镜检 采取脑脊液、血液、分泌液 分离培养 采用鲜血琼脂或巧克力琼脂 V因子需要试验 用灭菌棉拭子蘸取病鸡的眶下窦中的粘液或浆液，在鲜血琼脂上划线，并取保姆菌交叉划线，于蜡烛瓶或CO2培养箱中培养1824小时，若分离菌在血琼脂平板上生长呈现“卫星现象”，菌落呈露滴状、针尖大小的小菌落，且过氧化物酶试验呈现阴性，则可作出诊断。 由于嗜血杆菌在体外存活时间很短，对该病原菌的分离必须及时。,7、嗜血杆菌的微生物学检查,42,2019,-,除了传统的分离鉴定及常规的血清学方法外，还建立了更加特异敏感的ELISA方法、DNA探针及PCR诊断技术。,43,2019,-,制定合适的防疫程序，加强预防力度，可减少传染病的发生。（以传染性鼻炎为例） 接种传染性鼻炎菌苗能有效地预防本病的发生，现在中国和外国都有这类商品性灭活菌苗供应。 在鸡传染性鼻炎的防制上，一般是在68周龄时进行第一次菌苗接种，34周以后或产蛋前再加强免疫接种一次，可获良好的免疫保护效果。,8、嗜血杆菌的免疫,44,2019,-,第五节 放线杆菌属 Actinobacillus,本属细菌为G杆菌，两极染色，兼性厌氧。,猪胸膜肺炎放线杆菌 林氏放线杆菌 驹放线杆菌,对家畜有致病性的主要有3种：,45,2019,-,1、形态、染色,G球杆菌，两极染色，无抗酸性； 三无：无荚膜、无芽胞、无鞭毛。,46,2019,-,2、培 养,兼性厌氧； 普通琼脂生长不良；常用血清琼脂。 菌落细小、圆形、粘稠；,猪胸膜肺炎放线杆菌溶血 林氏放线杆菌蓝灰色,47,2019,-,3、致病性,（