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文档简介
武定县己衣卫生院 作 业 指 导 书 文件名称:艾滋病病毒抗体快速 (胶体金法)操作细则 受 控 号:WDJY-JL/B-JY9 拟制部门:检验科 拟 制 人:吴圣芳 审 核 人:陈登学 批 准 人:凤国荣 发布日期:2013 年 8 月 10 日 实施日期:2013 年 8 月 10 日 文件编号:WDJYJL/B JY9武定县己衣卫生院作业指导书 第 1 页共 4 页 YL/0第 1 版 第 2 次修订文件名称:艾滋病病毒抗体筛查试验之快 速胶体金法操作细则 发布日期:2013 年 8 月 10 日 1 目的 快速胶体金法是艾滋病病毒抗体筛查试验中一项常用的方法,根据卫 生部全国艾滋病检测工作规范(卫疾控发1997第 28 号),现对艾滋病病 毒(HIV)抗体筛查试验之快速硒(金)标法必要说明和补充,以规范本中心艾 滋病抗体检测工作。 2 适用范围 本操作细则适用于检验科艾滋病病毒抗体筛查试验之快速胶体金法。 3 职责 3.1 检测人员执行本规程。 3.2 监督员负责规程执行情况的检查和监督。 3.3 科室主任负责对违规情况进行查处,并进行跟踪纠正。 4 程序 4.1 样品采集:明胶凝聚法 4.1.1 静脉采集人血清、血浆和全血必须在无菌条件下进行,避免样品溶血。 4.1.2 对全血及血浆样品必须使用 EDTA 抗凝管。 4.1.3 末梢全血的采集 4.1.3.1 对成人和 1 岁以上儿童可选择中指、无名指和食指采集。 4.1.3.2 用酒精消毒手指,晾干 4.1.3.3 手掌向上,将穿刺针置于指尖,紧靠手指刺破皮肤,将穿刺针头丢 弃于尖锐危险品容器里。 4.1.3.4 用无菌纱布擦掉第一滴血 文件编号:WDJYJL/B JY9武定县己衣卫生院作业指导书 第 2 页共 4 页 YL/0 第 1 版 第 2 次修订文件名称:艾滋病病毒抗体筛查试验之快 速胶体金法操作细则 发布日期:2013 年 8 月 10 日 4.1.3.5 将手指的高度置于肘部,间歇性地挤压穿刺手指数次,用 EDTA 毛 细管吸取血样,避免气泡。 4.2 设备和材料 离心机,精确移液器,单通道可调 50ul 4.3 样品的保存 4.3.1 如果血清和血浆样品收集后 7 天内检测,须放在摄氏 28 度保存,如 果 7 天后检测须冷冻保存。 4.3.2 如果静脉全血样品收集后 7 天内检测,可将样品放在摄氏 28 度保 存。全血样品不能冷冻。 4.3.3 末梢全血样品必须马上测定。 5 测试步骤 5.1 将所需数量的测试试剂从包装盒中取出平衡至室温,打开铝箔包装袋, 平置于台面上。一次检测的样品量多时须在打开铝箔包装袋对所需的反应 板按样品号进行编号。 5.2 对血清或血浆样品 5.2.1 加 60ul 样品,或用试剂盒内所配塑料滴管吸取样本,垂直滴加两滴于 试剂的加样处。 5.2.2 加样后,阳性标本可在 130 分钟内检出。反应时间(从加样后计算起) 超过 30 分钟将实验结果的观察造成影响。 5.3 对全血样品:(静脉血) 5.3.1 加 80ul 样品,或用试剂盒内所配塑料滴管吸取样本,垂直滴加两滴 文件编号:WDJYJL/B JY9武定县己衣卫生院作业指导书 第 3 页共 4 页 YL/0第 1 版 第 2 次修订文件名称:艾滋病病毒抗体筛查试验之快 速胶体金法操作细则 发布日期:2013 年 8 月 10 日 于试剂的加样处。 5.3.2 随即加一滴金标全血样本稀释液。 5.3.3 加样后,阳性标本可在 130 分钟内检出。反应时间(从加样后计算起) 超过 30 分钟将实验结果的观察造成影响。 5.4 对全血样品:(末梢血) 5.4.1 加 40ul 样品,或用试剂盒内所配塑料滴管吸取样本,垂直滴加两滴 于试剂的加样处。 5.4.2 随即加一滴金标全血样本稀释液。 5.4.3 加样后,阳性标本可在 130 分钟内检出。反应时间(从加样后计算起) 超过 30 分钟将实验结果的观察造成影响。 5.5 结果判断 阳性:测试条/卡在检测区和对照区位置各出现一条紫红色条带。如果检测区 的紫红色条带隐约可见,建议对该样品重复试验,并使用其他方法确认。 阴性:测试条/卡在对照区位置出现一条紫红色条带。 无效:对照区未出现紫红色条带结果无效,需重做。即检测区出现,但对照区 未出现是也判为无效,需重做。 5.6 完成实验 5.6.1 处理废弃物品:按照各实验室废弃物消毒规程进行。 5.6.2 用 0.5%的次氯酸钠或 75%的酒精消毒工作台。 5.7 质控 5.7.1 为确保检测结果有效,技术人员必须严格按照实际说明书操作。 武定县己衣卫生院作业指导书 文件编号:WDJYJL/B JY9 第 4 页共 4 页 YL/0第 1 版 第 2 次修订文件名称:艾滋病病毒抗体筛查试验之快 速胶体金法操作细则 发布日期:2013 年 8 月 10 日 5.7.2 操作人员必须经过专业培训且有较好的视力以准确判断弱阳性结果。 5.7.3 冷冻样品用前需充分融化、加样前混匀,如果需要可以离心。 5.7.4 结果判定时,质控带必须出现而且样
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