肿瘤免疫治疗总参谋部总医院亓爱杰PPT课件

肿瘤生物免疫治疗,解放军总参谋部总医院国际肿瘤诊疗中心 亓爱杰,1,肿瘤生物治疗定义,肿瘤生物治疗是指通过调动宿主的天然防卫机制或给予机体某些物质来取得抗肿瘤效应的一种治疗手段。通俗的讲，就是通过使用一些生物反应调节剂（Biological Response Modifier，BRM）如：细胞因子、肿瘤疫苗、植物多糖等来增强患者的抵抗力，从而达到杀伤和抑制肿瘤的目的。 2000年在美国举行的“国际肿瘤生物和免疫治疗年会”的总结报告指出：生物治疗是目前医疗界已知的唯一一种有望完全消灭癌细胞的治疗手段，21世纪是肿瘤生物治疗世纪,2,肿瘤免疫治疗的发展历程（按论文报导时间先后）,2007年超级免疫粒细胞抗癌技术,1991年CIK细胞（细胞因子诱导的杀伤细胞）,1982年LAK细胞（淋巴因子激活的杀伤细胞）,1994年出现细胞融合瘤苗，后来发展成DC瘤苗技术,1989年CD3AK（CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞）,1986年TIL（肿瘤浸润淋巴细胞）,2001年DC与CIK共培养,3,肿瘤生物治疗的特点,具有肿瘤特异性（高度选择性）作用机理及毒副作用与常规治疗不同不容易产生耐药毒副作用较小,4,肿瘤生物治疗方法,5,肿瘤生物治疗的发展历程,6,生物治疗,化疗,放疗,手术,肿瘤综合治疗,第四大肿瘤治疗模式,作为第三代生物治疗技术，CIK/DC免疫治疗由于其明确的治疗优势已成为继手术、放疗、化疗之后的第四大肿瘤治疗模式。,肿瘤综合治疗,7,肿瘤生物治疗主要作用,直接调节肿瘤细胞的生长和分化，抑制肿瘤生长，使肿瘤缩小；促使肿瘤细胞从低分化向高分化发展，提高肿瘤细胞对人体抗肿 瘤免疫应答的敏感性，有利于杀伤癌细胞；特异性地作用于肿瘤新生血管，影响肿瘤的营养供应，导致肿瘤细胞坏死，而正常细胞则不受影响；刺激病人体内产生免疫应答反应，使体内有更多的抗癌细胞产生，增强抗癌能力；刺激造血功能，促进骨髓抑制的恢复，使病人可以耐受全身大剂量的放疗或化疗，减轻病人接受抗癌治疗时的损伤，增加对抗癌治疗的耐受性，提高放、化疗的效果。,8,CIK细胞治疗技术简介,CIK（cytokines -induced killer cell，细胞因子诱导的杀伤细胞） 是将人体外周血单个核细胞（PBMC）在体外模拟人体内环境，用多种细胞因子（如CD3McAb、IL-2、IFN-、IL-1等）共同培养增殖后获得的一群异质细胞。其中CD3+ CD56+双阳性细胞是CIK细胞群体中主要的效应细胞。CIK细胞兼具有T细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性的广谱杀瘤、抗病毒活性 CIK又被称为具有NK细胞作用的T淋巴细胞CIK细胞分泌的细胞因子能有效激活机体的免疫系统，提高病人自身抗肿瘤和抗病毒的能力。,9,CIK 细胞形态,14d 20,10,CIK细胞杀瘤机理,LFA-1=ICAM-1,CD3交连,肿瘤细胞,识别,11,CIK细胞抗肿瘤作用机制图,12,CIK细胞杀伤肿瘤细胞电镜照片,13,CIK细胞抗肿瘤的优势,增殖速度快，主要效应细胞CD3+CD56+细胞的增殖可达1000倍。杀瘤活性高：其杀伤活性远高于其它细胞疗法，如：LAK。杀瘤谱广：CIK细胞对消化道肿瘤、肺癌、肾癌、恶性黑色素瘤、淋巴瘤、肝癌、白血病等均表现出强大的杀伤活性。对耐药肿瘤同样可以起到杀伤的作用。杀瘤活性不受某些免疫抑制剂的影响（如环孢素A（CSA）和FK506）。能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas-FasL凋亡。对正常骨髓造血前体细胞毒性很小。,14,CIK细胞回输前后患者外周血效应细胞亚群的变化,摘自：解放军医学杂志2004年4月29卷第4期，自体CIK细胞治疗肝癌的安全性和有效性评价。（施明等）,15,DC,数突状细胞因其成熟时有数突样或伪足样突起而得名。是目前已知的体内功能最强的抗原呈递细胞（ APC），与其它APC相比，其最大特点是能显著刺激已活化的或记忆性细胞作为DC前体存在于外周血、骨髓等多种组中，多种细胞因子能在体外刺激DC的生长和分化。具有激活静息性T淋巴细胞成为抗原特异性细胞毒性T 淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes, CTL）的特殊功能。,16,树突细胞（dendritic cell, DC）外形不规则，细胞核大、不规则，胞质较少，由于这类细胞具有长的胞浆突起，呈树突状故称为树突细胞。,17,DC形态,7d 40,18,这里添加文字,这里添加文字,DC细胞抗瘤优势与特点：,很少量的DC即可激发强大的T细胞杀瘤反应,可致敏辅助T细胞的多种细胞因子，以激活静止状态的T细胞,（DC刺激免疫反应的特点）,帮助重建肿瘤患者对肿瘤细胞的免疫监视功能,19,DC-CIK共培养技术简介,是在CIK诱导体系中加入已诱导成熟的DC，共同培养，直至细胞成熟。DC-CIK共培养，不仅能够提高CIK细胞杀伤作用，而且也能显著提高DC的功能。,20,采集外周全血60-100ml,分离PBMC,CIK细胞诱导及培养,DC诱导及培养,DC成熟,肿瘤抗原,成熟DC-CIK,5-7d,5-7d,12-16d,适当因子,适当因子,适当因子,活率90%,数量5-10 109,细菌、真菌、支原体检测,21,DC-CIK联合培养细胞特点,增殖活性提高,22,DC-CIK联合培养细胞特点：,细胞毒活性提高,23,肿瘤综合基础优化治疗一线选择！,CIK/DC免疫治疗与三大常规治疗方法的对比优势,24,这里添加文字,这里添加文字,这里添加文字,生物医学细胞实验室,GMP认证的200平米整体万级、局部百级实验室，必备的设备,完善的实验室管理和技术标准操作手册及严格的治疗保证系统,全程检测、保证细胞保证细胞数量与质量。,25,CIK/DC细胞治疗流程,第一步：采集患者外周血,第二步：DC/CIK培养,第三步：观察细胞数量质量,第四步： CIK/DC回输,26,CIK/DC细胞治疗流程,27,适用于各种不同病程阶段肿瘤的治疗（细胞淋巴癌/瘤除外） 呼吸系统：肺癌（小细胞肺癌、鳞癌、腺癌）等消化系统：肝癌、胃癌、肠癌 食道癌 胰腺癌 等 泌尿系统：肾癌、肾上腺癌、膀胱癌、前列腺癌及其转移癌等 血液系统：急慢性白血病、淋巴瘤（除T细胞淋巴瘤）。 其他肿瘤：恶性黑色素瘤、鼻咽癌、乳腺癌、舌癌等。 对胸水、腹水的胸腹腔灌注治疗效果显著。 ,28,CIK/DC 细胞治疗注意事项与禁忌症,以下情况慎用或遵医嘱：1正在使用免疫抑制药物，或器官移植后长期使用免疫抑制剂的患者；2正在接受化疗、放疗患者，不能与化疗、放疗同时应用，一般要求间隔1周或以上；3严重肝、肾功能异常者；4严重凝血功能异常者；5近期内有活动性出血史者；6严重感染未控制或高热患者；7严重的心脑血管疾病、糖尿病患者；8. 严重自身免疫性疾病患者；9. 孕妇或哺乳期妇女；10顽固性或持续性癫痫患者；11. RH阴性患者（自体血可用）。,29,禁忌症：1.细胞淋巴癌/瘤患者；2. HIV阳性患者；3. 严重过敏体质者，尤其对IL-2过敏患者。,CIK/DC 细胞治疗注意事项与禁忌症,30,CIK/DC细胞治疗的安全性及不良反应,DC细胞治疗和CIK细胞治疗的安全性好，至今未有严重不良反应（严重的变态反应、肝肾功能损害、骨髓抑制等）的报道。 少部分患者可出现一过性类流感样症状，如发烧、头痛、关节酸痛，按常规处理即可，大多可自行缓解。 其治疗有效性确切，安全性高，副作用极小，在广泛的临床应用中得到证实。,31,推荐CIK/DC联合治疗方案,32,典型病例,董某，男，66岁右肾颗粒细胞癌,双肺转移治疗9个月后,接近CR,治疗前,治疗后,33,部分患者治疗后肿瘤体积先增大，而后逐步缩小。,34,细胞回输前后,35,临床有效性的研究,1、2000年YamazakiT 等人在柳叶刀杂志报道了CIK预防肝癌根治性肿瘤切除术后复发的随机对比临床研究。统计显示，经过CIK治疗的病人肝癌复发的危险降低了41%， 3年无复发率为48% (对照组：33%)。2、天津医科大学附属肿瘤医院任秀宝等应用DC-CIK治疗非小细胞肺癌并进行了3年临床研究。术后42例生物治疗+化疗组与同期42例常规化疗对照组对比2年总生存率显著提高94.7，对照组为78.8%7.0%（P0.05)。3、上海第二军医大曹雪涛、万涛教授等2008年完成了150例转移性晚期大肠癌应用肿瘤抗原负载DC细胞治疗的临床研究，研究结果CR+PR达到46.2%，显著高于随机对照化疗组22.5%。,36,4、苏州大学附属第三医院蒋敬庭等进行CIK治疗29例老年人中晚期胃癌患者副反应分析。结果回输患者PR8例，MR9例，SD7例，PD5例，总缓解率58.6%5、广州中山大学附属第三医院司徒杰等报道了9例肾癌患者CIK治疗的情况。应用CIK治疗后，肾癌患者体内的T细胞亚群比例有治疗前的抑制状态恢复到正常比例，患者随访最长4年均无复发及转移。,37,目的：评价非小细胞肺癌患者术后行常规化疗，再接受DC细胞活化的CIK细胞治疗对患者免疫反应的作用。,方法84例IIII期非小细胞肺癌对照组 42例，术后只行常规化疗研究组 42例，术后行化疗，并采取DC活化的CIK细胞治疗评价无病生存率和总生存率检测CIK细胞针对肿瘤细胞的细胞毒性,结果CIK细胞的细胞毒性:通过DC细胞的活化被显著提高2年总生存率:研究组对照组（P0.05）2年无病生存率：无显著差异。DC细胞活化的CIK细胞治疗在肿瘤无进展患者能增加具有抗瘤作用的细胞因子的产生（包括：IFN- ，MIG，TNF和TNF ），但在发生复发和转移的患者体内无此作用。,DC细胞活化的CIK细胞提高非小细胞肺癌患者术后化疗的抗肿瘤作用,天津肿瘤医院任秀宝等,美国细胞治疗2009年，第11卷，第8期,38,经肝动脉栓塞化疗序贯联合射频消融和细胞因子诱导的杀伤细胞治疗肝细胞癌的随机研究,中山大学肿瘤医院影像介入中心，华南肿瘤学国家重点实验室赵明、吴沛宏、曾益新等,目的：随机对照研究一组原发性肝癌病例治疗对照组：肝动脉栓塞化疗（TACE）序贯联合CT导向下射频消融（RFA）研究组：肝动脉栓塞化疗（TACE）序贯联合CT导向下射频消融（RFA）+CIK评价两种方法在原发性肝癌治疗中的疗效和抗病毒作用,方法：64例原发性肝癌患者经TACE序贯联合RFA治疗后68周，经临床评价无明确残留病变后分组研究组：33例首先连续完成4次CIK细胞经静脉/肝动脉回输，每次间隔时间为13周；再每4周1次，共行4次CIK细胞经静脉/肝动脉回输随访1年以上并每12个月评价肿瘤情况对照组：31例出院每12月评价肿瘤情况，随访1年以上,结果：2组病例1年生