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第三章 传统发酵技术的应用,实验10 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定,课题背景,泡菜制作容易,成本低廉,营养卫生,风味可口,利于贮存。在我国四川、东北、湖南、湖北、河南、广东、广西等地民间均有自制泡菜的习惯。,四川泡菜:味道咸酸、口感脆生、色泽鲜亮。,韩国泡菜:微酸偏辣,相传是从我国传入的,堪称韩国“第一菜”。,认识乳酸菌,生物分类:原核生物(单细胞细菌)代谢类型:异养厌氧型繁殖方式:二分裂应 用:制作泡菜和酸奶,乳酸杆菌:28-32,泡菜制作与乳酸发酵,原理:乳酸菌是异养厌氧型细菌,在无氧条件下,将葡萄糖分解成乳酸。,实验1:泡菜的腌制,材料:白菜、洋白菜、黄瓜、柿子椒、胡萝卜、白萝卜等。,调味料,不可少,调味品:辣椒、蒜、葱、花椒、胡椒、八角茴香、白酒等。,菜刀及菜板,泡菜罐,食糖,食盐,Step1:原料预处理,将菜洗净并切成小块。洗净泡菜坛,并加热水洗内壁两次。,Step2:配制盐水,清水与盐按4:1的比例配制好后煮沸冷却。,盐的作用:调味,抑制微生物生长。煮沸的目的:除去水中氧气,杀灭盐水中的细菌。冷却:为了不影响乳酸菌的生命活动。,Step3:加料入坛,泡菜坛,火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好,特别注意:如果泡菜坛漏气会使需氧型微生物大量繁殖,引起蔬菜腐烂。,将各种蔬菜、盐水、糖、白酒和调味品放入坛内(八成满),混合均匀,使盐水没过全部菜料,盖好坛盖。,加少量白酒有何作用?,白酒:可抑制泡菜表面杂菌的生长,它也是一种调味剂,可增加醇香感。,用水封闭坛口:防止外界空气进入,为了保证坛内乳酸菌的发酵所需的无氧环境。,Step4:密封发酵,腌制1周,经常补水,泡菜发酵的三个阶段,乳酸菌和乳酸的含量变化,实验2 :亚硝酸盐的定量测定,比色计,原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物,可用光电比色法定量。,比色杯,亚硝酸盐食品添加剂,防腐剂和增色剂,亚硝酸盐:包括亚硝酸钾和亚硝酸钠,为白色粉末,易溶于水。当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.30.5 g时,会引起中毒,达3 g时会引起死亡。,光电比色法,亚硝酸钠标准显色液,测定原理:亚硝酸盐+显色剂(对氨基苯磺酸+N-1-萘基乙二胺)紫红色。,(1)样品处理:泡菜25 g制匀浆过滤后用NaOH溶液调pH至8.0加硫酸锌溶液25 mL加氢氧化钠溶液至产生白色沉淀水浴加热至60过滤取滤液定容至500 mL。(2)测定:10 mL样品溶液+4.5 mL氯化铵缓冲液+2.5 mL 60%乙酸溶液+5 mL显色剂定容至25 mL暗处静置25 min用光程为1 cm的比色杯在550 nm处测定光密度值(10 mL水作空白对照)。(3)标准曲线的绘制:以亚硝酸钠质量为横坐标,以光密度值为纵坐标,绘制标准曲线。(4)计算:样品中亚硝酸盐含量(mg)/取样量(10mL滤液的质量,kg)。,实验结果,特别注意:在腌制过程中,亚硝酸盐含量先增多,后减少(一般在腌制十天后,亚硝酸盐的含量降到最低值)。,亚硝酸盐含量的变化,腌制条件如何控制?,特别注意:温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。,例题:(2013新课标全国卷)回答下列有关泡菜制作的问题:(1)制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的目的是。(2)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的中。(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、和等。(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内,泡菜液逐渐变酸,这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ,原因。,杀灭杂菌,增加乳酸菌数量,厌氧呼吸,细胞质,温度,腌制时间,食盐用量,乳酸菌数量增多,杂菌数量减少,乳酸菌比杂菌更为耐酸,例题:(2009浙江高考)下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请回答:(1)食醋可用大米为原料经三步发酵来制作:第一步:大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶,将原料中的淀粉分解成(填中间产物),然后进一步分解成葡萄糖,这一过程可用(填淀粉指示剂)来检测,因为该试剂遇淀粉呈蓝色,遇上述中间产物呈红色。第二步:用菌将葡萄糖转化成乙醇,这一发酵过程中,玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是 。第三步:用 菌将乙醇转化成乙酸,这一过程 氧气。,糊精,碘-碘化钾溶液,酵母,发酵过程中会产生大量CO2,使瓶内压强升高,而可能引起爆裂,醋化醋杆,需要消耗,(2)泡菜发酵过程中,会产生多种酸,其中主要是,还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用法,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺偶联成色化合物。进行样品测定时,还要取等量水进行同样的测定,目的是。,乳酸,光电比色,紫红,作为对照,例题:(2013绍兴高二检测)萝卜干和泡菜是深受市场欢迎的腌制食品,下图是一般的生产流程,据图回答下列有关问题:(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料,原因是。(2)腌制过程加入的盐水量不能过满,否则会出现溢坛现象,其原因是。,亚硝酸盐的含量低,萝卜会在盐水中发生渗透失水现象,(3)发酵过程主要利用了乳酸菌和菌对萝卜中有机物的分解作用,产生有机酸和醇类物质,使萝卜更可口美味。同时在生产过程中通过多种措施控制其他杂菌的繁殖,以保证产品的质量,下列不属于此种措施的是( )A.加盐B.加白酒 C.加水密封D.加糖(4)为确保发酵所需的无氧环境,应注意。(5)泡菜的制作方法不当,很容易造成泡菜变质,甚至发霉变味,试写出其中一种可能的原因: 。,假丝酵母,将坛口用水密封,泡菜坛子密封不严或盐的比例过小,(6)如果在腌制过程中加入一些已经腌制过的泡菜汁效果

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