脑脊液检测PPT课件

脑脊液和浆膜腔积液检验,1,一脑脊液检查,脑脊液的生理脑脊液标本的采集检测项目脑脊液检查的临床应用,2,脑脊液生理,脑脊液（cerebrospinal fluid，CSF）是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体。成人平均总量约150ml.血脑屏障（blood brain barrier，BBB） 对血浆各种成分通透性各有不同，其中通透性高的有：Na、Cl、Mg离子及乙醇等 其次为：清蛋白、葡萄糖、Ca离子、尿素和肌酐等最难通过有：Fbg、补体、抗体、胆固醇、胆红素等,概念,脑脊液（cerebrospinal fluid，CSF）,血脑屏障（blood brain barrier，BBB）,3,生理,70%脉络丛,30%细胞间隙,侧脑室,第三脑室,室间孔,中脑导水管,第四脑室,蛛网膜下腔及脑池,中间孔,两侧孔,超滤作用,主动分泌,蛛网膜绒毛,血管及神经根间隙,吸收,4,标本采集,CSF标本一般通过穿刺取得，部位：腰椎，特殊情况下可由小脑延髓池或侧脑室压力测试：穿刺成功后先作压力测定，正常在80180mmH2O超过200mmH2O放出CSF量应控制在2ml内，低于80mmH2O可作动力试验以了解有无蛛网膜下腔阻塞。采集：采CSF于3支无菌试管中，每管12ml，采集顺序如下,1细菌学检查,2化学学检查,3理学学检查,如怀疑恶性肿瘤可再留1 管作细胞学检查,5,标本采集的注意事项,细胞破坏或CSF凝固影响细胞计数和分类糖分解致GLU结果偏低，细菌自溶或死亡影响细菌检出率 化学检查 肝素抗凝一般性状检查 EDTA抗凝,送检及时,抗凝剂选择,6,CSF检查项目,显微镜检查,免疫学检查,化学检查,病原学检查,理学检查,7,理学检查,颜色 透明度 凝固性 压力,8,CSF颜色,9,红色时新旧出血鉴别,10,黄色：黄变症,11,透明度,混浊原因,脑脊液中细胞成分增多,脑脊液中细菌、真菌增多,脑脊液中蛋白质增多,几种常见脑脊液,正常脑脊液,清晰透明,化脓性脑膜炎,结核性脑膜,病毒性脑炎、神经梅毒,明显混浊,毛玻璃样轻度混浊,透明外观,12,凝固性,CSF的凝固性表现形式CSF的凝固性的临床意义正常CSF：静置1224h不形成薄膜、凝块或沉淀。化脓性： 标本静置12h可形成凝块或沉淀；结核性： 静置1224h标本表面有纤细网膜形成，黄色胶冻 蛛网膜下腔梗阻， CSF循环受阻，蛋白质高达15g/L时。,薄膜（pellicle）,凝块（clot）,沉淀,正常CSF标本,化脓性脑膜炎,结核性脑膜炎,黄色胶冻状,不形成,13,比密测定,正常人腰穿CSF比密为：1.006-1.008比密增高:见于颅内高压 比密降低:见于脑脊液分泌增多,14,显微镜检查,1、细胞计数,2、白细胞分类计数,3、细胞学检查,显微镜检查,15,1 细胞计数,细胞计数 参考值 1.红细胞：无。2.白细胞：成人（010）106/L；儿童（015）106/L；新生儿（030）106/L。,细胞总数计数,白细胞计数,1、细胞计数,细胞计数方法,手工显微镜计数,16,2 白细胞分类计数,方法:直接分类和染色分类参考值 淋巴细胞和单核细胞为主，两者之比约7：3。中性粒细胞可见少量偶见软脑膜和蛛网膜细胞、室管膜细胞、脉络膜细胞。,17,3 细胞学检查,细胞成分:可见免疫活性细胞、单核吞噬细胞、多形核白细胞、肿瘤细胞。细胞收集方法：离心沉淀、细胞玻片离心仪染色方法可用综合应用多种染色鉴别（吖啶橙荧光染色-肿瘤细胞等）PAS染色-鉴别原淋与腺癌细胞,18,CSF细胞计数和分类的临床意义1,增高常见于,19,1.常见NS系统感染性疾病细胞计数与分类特点,细胞数（1050）106/L为轻度升高，（50100）106/L为中度增高， 200106/L以上为显著增高,20,CSF细胞计数和分类的临床意义2,。,均匀血性脑脊液，可见大量红细胞N明显增高出血23天后可见吞噬细胞,细胞数正常或稍高，L为主，可见肿瘤细胞。找到白血病细胞是脑膜白血病证据,细胞数可增高，可见E及浆细胞增高，沉淀可查出虫卵、原虫、幼虫等,2.蛛网膜下腔出血,3.中枢神经肿瘤,4.脑寄生虫病,21,（二）化学检查,蛋白质检查,蛋白质定量试验,蛋白质定性试验,葡萄糖测定,氯化物测定,酶学检查,ALT、AST、CK、LD、NSE,22,蛋白定性试验,23,蛋白质定量试验,磺柳酸-硫代硫酸钠比浊,1.蛋白沉淀剂比浊法,丽春红S、考马斯亮蓝,2.染料结合比色法,参考值 （成人）腰池 200400mg/L 小脑延髓池100250mg/L 脑室 50150mg/L,对灵敏度和精密度较高，对pH要求高,简便、快速、无需特殊仪器、标本量大、对球蛋白和白蛋白沉淀能力不同精密度差,方法学评价:,代表方法:,24,蛋白质检查的临床意义,1. 血脑屏障通透性增加：脑膜炎：化脓性脑膜炎显著增高、结核性脑膜炎中度增高，病毒性脑膜炎轻度增高。出血、内分泌或代谢性疾病：脑室或蛛网膜下腔出血、糖尿病毒性神经病变、甲状腺功能减退、尿毒症及脱水药物中毒：如乙醇、酚噻嗪、苯妥因。,25,蛋白质检查的临床意义,2. 脑脊液循环障碍 ：脑部肿瘤或椎管梗阻如蛛网膜下腔粘连。蛛网膜下腔梗阻时，蛋白质10g/L以上，脑脊液呈胶冻状，有蛋白-细胞分离现象。3. 鞘内Ig合成增加：如多发性硬化症，神经梅毒,26,葡萄糖测定,常用方法葡萄糖氧化酶法己糖激酶法，特异性更高；,方法学评价测定应及时，久时间放置应加适量氟化钠抑制细菌或细胞利用葡萄糖，理想采血时间应在禁食4小时后。,参考值 2.54.4mmol/L,27,临床意义,1.减低中枢神经系统细菌性、真菌性感染：化脓性感染时降低最为严重且早期就可明显降低。结核性其次中枢神经系统肿瘤：脑膜瘤时脑脊液葡萄糖含量明显降低甚至为零。脑寄生虫病：脑囊虫病、血吸虫、弓形虫病时2.升高 血糖升高或下丘脑受损伤,28,氯化物测定,脑脊液中氯化物含量影响因素脑脊液自身理化性质、血浆氯化物含量血液PH值影响。方法：滴定法、比色法、电量法、离子选择电极法，后者目前常用。参考值 120130mmol/L,29,氯化物测定的临床意义,减低 见于细菌性、真菌性脑膜炎：结核性脑膜炎下降显著，可低于102mmol/L。低氯血症：呕吐、肾上腺功能减退增高 见于尿毒症、呼碱 等,30,病原学检查,1、标本离心取沉淀涂片作染色革兰氏染色抗酸染色墨汁染色或苯胺黑染色荧光染色。涂片镜检：血吸虫卵、肺吸虫卵、阿米巴、弓形虫等 。2、细菌培养（血平板、巧克力平板CO2环境培养、中国蓝平板）动物接种、真菌培养,31,脑脊液检查的临床应用,1. 中枢神经系统感染性疾病的诊断与鉴别诊断2. 脑血管病诊断与鉴别诊断3. 脑肿瘤诊断4. 中枢神经系统疾病治疗及疗效观察,32,常见中枢神经感染疾病CSF检查特点,33,二 浆膜腔积液检验,浆膜腔（serous cavity）：是人体的胸腔、心包腔、腹腔和关节腔的统称，正常情况下仅含少量液体起润滑作用，浆膜腔积液：病理情况下浆膜腔内大量液体潴留形成的积液，根据产生原因及其性质不同分为漏出液（transudate）渗出液（exudate）,34,漏出液和渗出液,漏出液是通过毛细血管滤出、并在组织间隙或浆膜腔内积聚的非炎症性组织液，多为双侧性。原因有毛细血管流体静压增高，血浆胶体渗透压减低，淋巴回流受阻，钠水潴留,渗出液是毛细血管通透性增高，以致液体、血液内大分子物质和细胞从血管渗出至血管外、组织间隙及浆膜腔形成的积液原因 微生物的毒素缺氧炎性介质等,漏出液,渗出液,35,标本采集与保存,采集：分装4管第1管.细菌学检查（注意无菌、及时）第2管.化学检查第3管.一般性状检查（理学）第4管.细胞检查理学和细胞学检查可加EDTA-K抗凝，化学检查可加肝素,穿刺术采集,第1管.细菌学检查（注意无菌、及时）第2管.化学检查第3管.一般性状检查（理学）第4管.细胞检查,保存,理学和细胞学检查可加EDTA-K抗凝，化学检查可加肝素,36,检查项目,理学检查,免疫学检查,显微镜检查,化学检查,CEA,AFP,TAP,CA-125,SCCP,细菌学检查,37,理学检查,1 量 正常时量较少，病理情况下液体较多其程度与病变轻重及部位有关。2. 比密 渗出液1.018 漏出液1.015,38,一般性状检查,3 颜色 正常为清亮、淡黄色液体。病理时变化多样，一般渗出液色深些1）红色：淡红、鲜红、暗红等 多由穿刺损伤、结核、肿瘤、出血性疾病所致2）白色：呈脓性或乳白色，多因白细胞增加、胸导管阻 塞破裂，大量脂肪变性细胞3）绿色：铜绿假单胞菌感染4）棕色：阿米巴感染5）黄色或淡黄：黄疸6）黑色：曲霉菌感染7）草黄色：尿毒症引起的心包积液,39,一般性状检查,4.透明度 与其所含细胞、细菌、蛋白质量有关。正常浆膜腔液：清晰透明渗出液 ：不同程度混浊，乳糜液 ：脂浊漏出液 ：清晰透明。5凝固性 正常 ：无凝块，漏出液 ：无凝块，渗出液 ：有凝块，也可因纤溶酶溶解无凝块。,40,化学检查,1粘蛋白定性试验（Rivalta test）粘蛋白等 电点在PH35，在稀酸溶液中产生白色沉淀，漏出液为阴性，渗出液多为阳性2蛋白质定量1） 方法与血清蛋白定量一致，漏出液一般小于25g/L，电泳清蛋白相对较高，大分子蛋白相对较少。渗出液大于30g/L，电泳谱与血清蛋白电泳一致。 2 ）常以积液蛋白与血清蛋白比大于0.5为渗出液的判断指标之一,41,化学检查,3葡萄糖定量漏出液葡萄糖含量较血糖稍低，渗出液多明显降低3.33mmol/L，4乳酸铁(lactate iron)测定 鉴别细菌性和非细菌性感染,升高提示细菌感染。,42,显微镜检查1,1.细胞计数，RBC意义不大，WBC渗出液500106/L漏出液1001