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文档简介
关于血涂片染色及白细胞分类计数第1页,课件共18页,创作于2023年2月1.瑞氏染色1.1试剂成分:伊红——酸性——嗜碱性染料亚甲蓝(美蓝)——碱性——嗜酸性染料甲醇——固定溶剂磷酸缓冲液(pH:6.4-6.8)第2页,课件共18页,创作于2023年2月1.2着色原理:化学亲和作用+物理的吸附作用伊红+细胞中的碱性物质——红色亚甲蓝+酸性物质——蓝色中性物质+伊红和亚甲蓝——淡紫色第3页,课件共18页,创作于2023年2月1.3pH对细胞染色影响pH过低
<PI
正电荷增多——易与伊红结合——偏红pH过高>PI
负电荷增多——易与亚甲蓝结合——偏蓝最适环境:弱酸(pH6.4-6.8)第4页,课件共18页,创作于2023年2月
血涂片:淡紫红色镜下:成熟红细胞——粉红色
白细胞——胞质呈现其特有的色彩细胞核紫红色染色质结构清楚判别方法第5页,课件共18页,创作于2023年2月染色偏酸:
红细胞、嗜酸粒细胞颗粒偏红白细胞核淡紫红色或不着色染色偏碱:红细胞灰蓝色中性粒细胞颗粒深暗、偏粗,紫黑色嗜酸性粒细胞暗褐色或紫黑色、蓝色第6页,课件共18页,创作于2023年2月第7页,课件共18页,创作于2023年2月1.4器材载玻片、推玻片、洗耳球1.5试剂
瑞氏染液(商品)
I液:瑞特染料、纯甲醇、甘油
I液:磷酸盐缓冲液(KH2PO4Na2HPO4)
第8页,课件共18页,创作于2023年2月1.6操作制备血涂片(待完全晾干)
加I液数滴覆盖整个血膜0.5-1min
滴加等量或稍多的II液(洗耳球混匀)5-10min
冲洗(注意)
干燥第9页,课件共18页,创作于2023年2月注意事项1.血涂片干后方可染色2.加染液不能过少3.冲洗时应以流水冲洗4.染色过淡可复染,先加缓冲液再加染液5.染色过深可用水冲洗或浸泡一定时间,也可用甲醇脱色6.染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关。应在具体实践中摸索合适的时间。
第10页,课件共18页,创作于2023年2月2.WBC分类计数2.1原理2.2器材:显微镜、香柏油、拭镜纸、清洁剂2.3操作步骤
1.采末梢血——染色
2.低倍镜下选择细胞分布均匀、着色良好的域,滴香柏油一滴
3.油镜下分类,分类时要有秩序的连续进行(“几”字形),避免主观选择视野。通常分类100个白细胞,计数并报告各种白细胞所占百分比。
4.计算
5.报告方式:XX细胞:XX%第11页,课件共18页,创作于2023年2月2.4外周血正常白细胞形态特征:中性粒细胞:杆+分10-15
μm圆形胞质粉红胞质内颗粒量多、细小、均匀、紫红色核弯曲呈杆、带状染色质粗糙,紫红色分叶核:核分2-5叶第12页,课件共18页,创作于2023年2月13-15
μm圆形胞质着色不清胞质内颗粒粗大、整齐、均匀、充满胞质、桔红色核多分2叶染色质粗糙,紫红色嗜酸性粒细胞+淋巴细胞第13页,课件共18页,创作于2023年2月10-12
μm圆形胞质着色不清胞质内颗粒量少、大小不匀、排列零乱、紫黑色,可盖核上核形不清染色质粗糙,紫红色嗜碱性粒细胞第14页,课件共18页,创作于2023年2月6-15
μm圆形/椭圆形胞质透明、淡蓝色胞质内多无颗粒核形圆/椭圆/肾形染色质粗紧成块,深紫红色,核外缘光滑淋巴细胞第15页,课件共18页,创作于2023年2月12-15
μm圆/椭圆/不规则胞质半透明、灰蓝色或灰红色胞质内有细小、尘土样紫红色颗粒核形不规则/山字/肾/马碲形,扭曲折叠染色质疏松网状,淡紫红色,有膨胀感和立体起伏感第16页,课件共18页,创作于2023年2月2.5注意事项:1.分类最佳区域为体、尾交界处2.分类时要有秩序地连续进行3.白细胞总数与分类个数4.分类中如见幼红细胞,不计入100个细胞内,以分类100个白细胞过程中见到幼红细胞多少个来报告,并应注明其所属阶段。
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