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文档简介
1、第六章,补体结合试验和补体测定,第六章,补体结合试验和补体测定,补体,是存在于人和脊椎动物血清与组织液中,一组经活化后具有酶活性的蛋白质,可辅助,和补充抗体介导的免疫溶菌和溶细胞作用,组成,固有成分,激活过程的补体成分,C1-C9,调节蛋白,调节补体活化和效应的补体成分,补体受体,补体的生物学功能,补体介导的细胞溶解,调理作用,清除免疫复合物,免疫粘除作用,引起炎症反应,过敏毒素,趋化作用,免疫调节作用,第一节,补体结合试验,补体可和抗原抗体的复合物结合,而游离,的抗原或抗体则不结合补体,以溶血素致敏的绵羊,RBC,为指示系统,指,示补体是否结合,从而判断抗原或抗体是,否对应,已知的抗原或抗体
2、,待检系统,待检抗原或抗体,绵羊红细胞,补体结合试验,指示系统,溶血素(绵羊,RBC,的特异抗体,补体,取自豚鼠的新鲜血清,补体结合试验原理,补体,待检系统,指示系统,补体结合试验(结果阳性,补体消耗,指示系统(不溶血,待检系统,补体结合试验原理(结果阴性,补体未消耗,待检系统,指示系统(溶血,Ab,阳性,Ag,Ag,No Ab,阴性,待测血清,Ag,Ag,第二节,补体测定,活性测定,含量测定,一、活性测定,一)血清总补体溶血活性测定,50 ,补体溶血试验,CH50,测定,RBC,与溶血素量一定时,在一定时间内,补体的量及活性与溶血程度呈正相关,结果与,C1-C9,的量及活性有关,CH50,分
3、析,用已知的指示系统,检测,试验系统,是否结合补体,待测血清,指示系统,SRBC,和溶血素,补体,溶血,阴性;不溶血,阳性,二)补体旁路途径溶血活性测定,原理,正常情况下,涎酸抑制,B,因子的活性,兔,RBC,含量低,可激活血清中的,B,因子,致,旁路途径激活,兔,RBC,溶解,50,溶血为终点,方法,经典途径活需有,Ca,Mg,离子,而旁路途径只需,Mg,离子,加入,EDTA,阻断经典途径的活化,兔,RBC,用枸橼盐抗凝,测,50,溶血的活性,三,C4,溶血活性的测定,原理基本同总补体活性测定,不同:先用豚鼠血清用,氨水,处理,去除其中的,C4,就不能使溶血素致敏的,SRBC,溶解,加待测人血清,发生溶解作用,测定,50,溶,血活性,或用,水合肼,四,B,因子的溶血活性测定,原理,正常人血清,56,15min,B,因子灭活,缺乏,B,因子,旁路途径不能激活,加入兔,RBC,时不发生溶血,此时加入待测血清,兔,RBC,发生溶血,依溶血程度,测,B,因子活性,二、补体含量测定,含量最高,C3,1.2 g/L,含量最低,D,因子,0.001-0.002 g/L,该如何选择检测方法,三、补体测定意义,活性与含量测不能相互替代,含量上升:传染病、组织损伤、急性炎
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